专题1基因工程1作业

专题1基因工程(1)作业1、【2019•全国I卷］［生物一一选修3：现代生物科技专题］基因工程中可以通过PCR技术扩增目的基因。回答下列问题。(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以从基因文库中获得。基因文库包括和。(2)生物体细胞内的DNA复制开始时，解开口猫双链的酶是。在体外利用PCR技术扩增目的基因时，使反应体系中的模板DNA解链为单链的条件是。上述两个解链过程的共同点是破坏了DNA双链分子中的。(3)目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是2、【2019・天津卷】B基因存在于水稻基因组中，其仅在体细胞(2n)和精子中正常表达，但在卵细胞中不转录。为研究8基因表达对卵细胞的影响，设计了如下实验。据图回答:1.B基因在水稻卵细胞中不转录，推测其可能的原因是卵细胞中(单选)。A.含B基因的染色体缺失 B.DNA聚合酶失活C.B基因发生基因突变 D.B基因的启动子无法启动转录.从水稻体细胞或中提取总RNA，构建文库，进而获得B基因编码蛋白的序列。将该序列与Luc基因（表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光）连接成融合基因（表达的蛋白质能保留两种蛋白质各自的功能），然后构建重组表达载体。.在过程①、②转化筛选时，过程中T-DNA整合到受体细胞染色体DNA上，过程在培养基中应加入卡那霉素。.获得转基因植株过程中，以下鉴定筛选方式正确的是（多选）。A.将随机断裂的B基因片段制备成探针进行DNA分子杂交B.以Luc基因为模板设计探针进行DNA分子杂交C.以B基因编码蛋白的序列为模板设计探针与从卵细胞提取的mRNA杂交D.检测加入荧光素的卵细胞中是否发出荧光.从转基因植株未成熟种子中分离出胚，观察到细胞内仅含一个染色体组，判定该胚是由未受精的卵细胞发育形成的，而一般情况下水稻卵细胞在未受精时不进行发育，由此表明。3、【2019•江苏卷】图1是某基因工程中构建重组质粒的过程示意图，载体质粒P0具有四环素抗性基因（tetr）和氨苄青霉素抗性基因（ampr）。请回答下列问题：图I■■■GATlATC-(1)EcoRV酶切位点为…CIAtTAG…，EcoRV酶切出来的线性载体P1为— 未端。(2)用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增获得的目的基因片段，其两端各自带有一个腺嘌吟脱氧核甘酸。载体P1用酶处理，在两端各添加了一个碱基为—的脱氧核甘酸，形成P2；P2和目的基因片段在酶作用下，形成重组质粒P3。(3)为筛选出含有重组质粒P3的菌落，采用含有不同抗生素的平板进行筛选，得到a、b、cm类菌落，其生长情况如下表(“+”代表生长，“-”代表不生长)。根据表中结果判断，应选择的菌落是(填表中字母)类，另外两类菌落质粒导入情况分别是、。\菌落类型\平板类型\ABc无抗生素+++氨苄青霉素++四环素+氨苄青霉素+四环素+(4)为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。图2所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，PCR鉴定时应选择的一对引物是。某学生尝试用图中另外一对引物从某一菌落的质粒中扩增出了400bp片段，原因是。

4、下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：限制酶IH加dQIEcoRISmaI识别序列及切割位点限制酶IH加dQIEcoRISmaI识别序列及切割位点GiGATCCCCTAG’GTA^AGCTTTTCGAaATGtAATTCCTTAAaGTCCC^GGGGGG|CCC抗生素 8MHI抗性w因SmaIEmRI外源DNA目的基因(1)一个如图1所示的质粒分子经SmaI切割前后，分别含有个游离的磷酸基团。若对图中质粒进行改造，插入的SmaI酶切位点越多，质粒的热稳定性越。⑵用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaI切割,原因是⑶与只使用EcoRI相比较，使用BamhI和Hindlll两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止。⑷为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体,然后在的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。5、科学家将鱼的抗冻蛋白基因转入烟草，使烟草的耐寒能力大大提高。如图是转基因抗冻烟草培育过程的示意图(ampr为抗氨苄青霉素基因)，其中①④是培育过程中的相关步骤，I、II表示相关结构或细胞。请据图作答：(1)在构建基因表达载体时，可用一种或多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶，分别对进行切割，再用酶进行连接。⑵利用含氨苄青霉素的培养基可以筛选出成功导入抗冻蛋白基因的烟草细胞，原因是。⑶图中③④过程所利用