儿童非肿瘤性EB病毒感染疾病的诊断

儿童非肿瘤性EB病毒感染疾病的诊断11234EB病毒的实验室诊断方法EB病毒感染相关的非肿瘤性疾病的诊断总结EB病毒的概述2EB病毒的概述1964年Epstein和Barr首次报道一种嗜人类淋巴细胞的疱疹病毒唾液传播（主要）、血液传播成人：90%以上的血清EBV抗体呈阳性儿童：80%以上血清EBV阳性转化与多种疾病有关肿瘤：鼻咽癌、淋巴瘤、胃癌等非肿瘤：传染性单核细胞增多症、慢性活动型EBV感染、EBV相关HLH3在人体B细胞中建立潜伏感染，受感染者将成为终生带病毒者，当机体免疫力下降，可被再激活，引起病毒复制及临床疾病潜伏抗原：EBNA-1、EBNA-2、EBNA-3A、EBNA-3B、EBNA-3C、LMP-1、LMP-2、BARTs、EBERsEB病毒的概述EBNA：EBVnuclearantigen（EB病毒抗核抗原），LMP：latentmembraneprotein（膜蛋白），BARTs：BamHI-Arightwardtranscripts（BamHI-A右向转录物），EBER：EBV-encodedRNA（EB病毒编码RNA）KimuraH,ItoY,SuzukiR,NishiyamaY.MeasuringEpstein-Barrvirus(EBV)load:thesignificanceandapplicationforeachEBV-associateddisease.RevMedVirol.2008.18(5):305-19.4潜伏类型EBNA-1EBNA-2EBNA-3sLMP-1LMP-2BARTsEBERs疾病名称潜伏0型-----±+健康携带者潜伏I型+----++Burkitt’s淋巴瘤潜伏II型+--++++HL、NKL、CAEBV、NC潜伏III型+++++++IM、PTLDEB病毒基因与相关性疾病HL：Hodgkin’slymphoma（霍奇金淋巴瘤)；NKL：NKcelllymphoma(NK细胞淋巴瘤)；CAEBV：ChronicactiveEBVinfection（慢性活动型EB病毒感染）；IM：Infectiousmononucleosis（传染性单核细胞增多症）；PTLD：post-transplantoropportunisticlymphoproliferativedisorder（移植后淋巴细胞增殖症）5EB病毒的实验室诊断方法EBV感染的实验室检查嗜异凝集抗体试验EBV特异性抗体检测EBV病毒载量检测6EBV特异性抗体检测抗CA-IgG抗CA-IgM（Capsidantigen，抗衣壳抗原）抗EA-IgG（Earlyantigen，抗早期抗原）抗NA-IgG（Nuclearantigen，抗核抗原）急性感染早期急性感染晚期感染恢复晚期7嗜异凝集抗体试验出现时间：病程第1-2周持续时间：约6个月适应症：用于IM的诊断阳性率：在青少年原发性EBV感染中阳性率为80-90%，约10%缺乏对嗜异性抗体的阳性反应。＜5岁的儿童可能阴性。8GulleyML,TangW.LaboratoryassaysforEpstein-Barrvirus-relateddisease.JMolDiagn.2008.10(4):279-92.9EBV病毒载量检测鉴别EBV健康携带者的低水平复制与EBV相关疾病患者高水平活动性感染目前主要采用Real-timePCR进行监测不同EBV疾病进行PCR检测时需要的标本不同101112EB病毒感染相关非肿瘤疾病传染性单核细胞增多症（IM）慢性活动型EBV感染（CAEBV）EBV相关嗜血淋巴组织细胞增多症（EBV-HLH）13传染性单核细胞增多症是原发性EBV感染所致的良性自限性疾病预后多数较好，少数可出现HLH等严重合并症多见于学龄前和学龄儿童临床表现发热、咽峡炎、淋巴结、肝脾肿大实验室结果：a.抗EBV-CA-IgM和IgG阳性，且抗EBV-NA-IgG阴性；b.抗EBV-CA-IgM阴性，但抗EBV-CA-IgG抗体阳性，且为低亲和力抗体，且抗EBV-NA-IgG阴性；c.嗜异凝集抗体阳性；d.外周血异型淋巴细胞比例≥10%e.IM患儿不推荐进行EBV载量检测14慢性活动型EBV感染定义：原发感染EBV后进入潜伏感染状态，机体保持健康或亚临床症状。少数无明显免疫缺陷的个体，原发EBV感染后病毒持续活动性复制、不进入潜伏感染状态，或处于潜伏感染状态下的EBV再次激活并且大量复制、机体再次进入病理状态，表现为IM症状持续存在或退而复现，伴发多脏器损害或间质性肺炎、视网膜眼炎等严重合并症，称为CAEBV。15EBV感染过程CTL：CytotoxicTLymphocytes（细胞毒性T淋巴细胞）NK：Naturalkillcells（自然杀伤细胞）裂解周期（产生相应的抗体）病毒与CD21受体结合潜伏感染16Kimura,H.(2006),PathogenesisofchronicactiveEpstein-Barrvirusinfection:Isthisaninfectiousdisease,lymphoproliferativedisorder,orimmunodeficiency?.Rev.Med.Virol.,16:

251–261.doi:

10.1002/rmv.50517流行病学性别：男女均可发病年龄：可发生在任何年龄发病地区：以亚洲国家多见，多为日本，西方国家少见。18临床表现IM样症状（主要）：发热、肝脾肿大、淋巴结肿大和肝功能衰竭其他症状：血小板减少、贫血、腹泻、葡萄膜炎等并发症：多器官功能衰竭、DIC、消化道溃疡/穿孔、冠状动脉瘤和恶性淋巴瘤等19实验室检查：血清EBV抗体滴度异常增高，包括抗VCA-IgG≥1:640或抗EA-IgG≥1:160，VCA/EA-IgA阳性在感染的组织或外周血中检测出EBER-1阳性细胞；外周血PBMC中EBV–DNA水平高于10拷贝/ug

DNA受累组织中EBV-EBNA或EBV-LMP1免疫组化染色阳性慢性活动型EBV感染OkanoM,KawaK,KimuraH,etal.ProposedguidelinesfordiagnosingchronicactiveEpstein-Barrvirusinfection.AmJHematol.2005.80(1):64-9.20临床分型根据外周血EB病毒感染细胞的类型分为T细胞型：主要表现为发热、高滴度抗EBV相关抗体，预后较差。NK细胞型：主要表现为蚊虫过敏（HMB，hypersensitivitytomosquitobites）及相应的皮肤损害，骨髓或外周血中大颗粒样异常淋巴细胞增多、血清IgE水平升高、PBMC中病毒载量升高KimuraH,HoshinoY,HaraS,etal.DifferencesbetweenTcell-typeandnaturalkillercell-typechronicactiveEpstein-Barrvirusinfection.JInfectDis.2005.191(4):531-9.21T细胞型CAEBVNK细胞型CAEBV症状发热+++肝脾肿大++淋巴结肿大++大颗粒异常淋巴细胞增多+++蚊虫叮咬过敏+++实验室检查抗VCA-IgG水平↑↑↑↑↑抗EA-IgG水平↑↑↑病毒载量↑↑↑预后死亡率↑↑↑22细胞因子表达细胞因子健康患儿T细胞型CAEBVNK细胞型CAEBVIL-1β-++IL-10-++IL-13-+++IFN-γ-++23诊断标准（1）持续或反复IM样症状（2）受感染组织（包括外周血）存在特异性抗EBV抗体：抗VCA抗体和抗EA抗体升高，和/或检测出EBV基因（3）排除其他EBV感染疾病24诊断标准（1）类IM症状包括：发热、淋巴结及肝脾肿大；并发症包括：血液系统、消化道、神经系统、肺、眼睛、皮肤及心血管异常。（2）抗体升高：抗VCA-IgG≥1:640；EA-IgG≥1:160；VCA和/或EA抗体阳性（3）其他推荐实验室检查：1）感染组织或外周血检测EBVDNA或相关基因（EBV-DNA，EBERs，EBNA、LMP，EBV感染靶细胞）2）组织病理学检查3）免疫学检查25治疗抗病毒药物：阿昔洛韦、更昔洛韦（效果不佳）干扰素：γ-干扰素和α-干扰素（个例）免疫、化疗药物造血干细胞移植：目前最有效的治疗方式，但移植后的并发症风险较大（目的：重建机体对EBV的有效免疫，彻底消除被EBV感染或克隆增殖的淋巴细胞）26预后总体预后较差，尤其是出现严重并发症的患儿死亡原因可包括：肝衰竭、心脏衰竭、各种类型的淋巴异常增殖性疾病、机会感染及HLH预后因素：年龄＞8岁的患儿预后较好并发血小板减少预后较差T细胞型CAEBV预后较差27EBV相关嗜血淋巴组织细胞增多症EBV-HLH是EBV感染诱发的一类HLH，是继发性HLH中重要的类型，多见于亚洲人群临床表现：持续性发热、肝脾淋巴结肿大、黄疸、肝功能异常、水肿、胸腔积液、三系下降等实验室检查（EBV）：EBV特异性抗体检测结果多样性外周血单个核细胞和血浆/血清的EBV-DNA载量较高28总结EBV病毒在人体B细胞中建立潜伏感染，并终生存在感染者内EBV抗体中：最早出现的是抗CA-IgM和IgG，持续终身的是抗CA-IgG和抗NA-IgGEBV载量检测：可鉴别健康携带者和EBV相关疾病患者。与CAEBV和EBV-HLH的病情严重程度和预后有关。29临床表现EBV特异性抗体嗜异凝集抗体试验EBV载量检测其他IM发热、咽峡炎