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文档简介
儿童非肿瘤性EB病毒感染疾病的诊断11234EB病毒的实验室诊断方法EB病毒感染相关的非肿瘤性疾病的诊断总结EB病毒的概述2EB病毒的概述1964年Epstein和Barr首次报道一种嗜人类淋巴细胞的疱疹病毒唾液传播(主要)、血液传播成人:90%以上的血清EBV抗体呈阳性儿童:80%以上血清EBV阳性转化与多种疾病有关肿瘤:鼻咽癌、淋巴瘤、胃癌等非肿瘤:传染性单核细胞增多症、慢性活动型EBV感染、EBV相关HLH3在人体B细胞中建立潜伏感染,受感染者将成为终生带病毒者,当机体免疫力下降,可被再激活,引起病毒复制及临床疾病潜伏抗原:EBNA-1、EBNA-2、EBNA-3A、EBNA-3B、EBNA-3C、LMP-1、LMP-2、BARTs、EBERsEB病毒的概述EBNA:EBVnuclearantigen(EB病毒抗核抗原),LMP:latentmembraneprotein(膜蛋白),BARTs:BamHI-Arightwardtranscripts(BamHI-A右向转录物),EBER:EBV-encodedRNA(EB病毒编码RNA)KimuraH,ItoY,SuzukiR,NishiyamaY.MeasuringEpstein-Barrvirus(EBV)load:thesignificanceandapplicationforeachEBV-associateddisease.RevMedVirol.2008.18(5):305-19.4潜伏类型EBNA-1EBNA-2EBNA-3sLMP-1LMP-2BARTsEBERs疾病名称潜伏0型-----±+健康携带者潜伏I型+----++Burkitt’s淋巴瘤潜伏II型+--++++HL、NKL、CAEBV、NC潜伏III型+++++++IM、PTLDEB病毒基因与相关性疾病HL:Hodgkin’slymphoma(霍奇金淋巴瘤);NKL:NKcelllymphoma(NK细胞淋巴瘤);CAEBV:ChronicactiveEBVinfection(慢性活动型EB病毒感染);IM:Infectiousmononucleosis(传染性单核细胞增多症);PTLD:post-transplantoropportunisticlymphoproliferativedisorder(移植后淋巴细胞增殖症)5EB病毒的实验室诊断方法EBV感染的实验室检查嗜异凝集抗体试验EBV特异性抗体检测EBV病毒载量检测6EBV特异性抗体检测抗CA-IgG抗CA-IgM(Capsidantigen,抗衣壳抗原)抗EA-IgG(Earlyantigen,抗早期抗原)抗NA-IgG(Nuclearantigen,抗核抗原)急性感染早期急性感染晚期感染恢复晚期7嗜异凝集抗体试验出现时间:病程第1-2周持续时间:约6个月适应症:用于IM的诊断阳性率:在青少年原发性EBV感染中阳性率为80-90%,约10%缺乏对嗜异性抗体的阳性反应。<5岁的儿童可能阴性。8GulleyML,TangW.LaboratoryassaysforEpstein-Barrvirus-relateddisease.JMolDiagn.2008.10(4):279-92.9EBV病毒载量检测鉴别EBV健康携带者的低水平复制与EBV相关疾病患者高水平活动性感染目前主要采用Real-timePCR进行监测不同EBV疾病进行PCR检测时需要的标本不同101112EB病毒感染相关非肿瘤疾病传染性单核细胞增多症(IM)慢性活动型EBV感染(CAEBV)EBV相关嗜血淋巴组织细胞增多症(EBV-HLH)13传染性单核细胞增多症是原发性EBV感染所致的良性自限性疾病预后多数较好,少数可出现HLH等严重合并症多见于学龄前和学龄儿童临床表现发热、咽峡炎、淋巴结、肝脾肿大实验室结果:a.抗EBV-CA-IgM和IgG阳性,且抗EBV-NA-IgG阴性;b.抗EBV-CA-IgM阴性,但抗EBV-CA-IgG抗体阳性,且为低亲和力抗体,且抗EBV-NA-IgG阴性;c.嗜异凝集抗体阳性;d.外周血异型淋巴细胞比例≥10%e.IM患儿不推荐进行EBV载量检测14慢性活动型EBV感染定义:原发感染EBV后进入潜伏感染状态,机体保持健康或亚临床症状。少数无明显免疫缺陷的个体,原发EBV感染后病毒持续活动性复制、不进入潜伏感染状态,或处于潜伏感染状态下的EBV再次激活并且大量复制、机体再次进入病理状态,表现为IM症状持续存在或退而复现,伴发多脏器损害或间质性肺炎、视网膜眼炎等严重合并症,称为CAEBV。15EBV感染过程CTL:CytotoxicTLymphocytes(细胞毒性T淋巴细胞)NK:Naturalkillcells(自然杀伤细胞)裂解周期(产生相应的抗体)病毒与CD21受体结合潜伏感染16Kimura,H.(2006),PathogenesisofchronicactiveEpstein-Barrvirusinfection:Isthisaninfectiousdisease,lymphoproliferativedisorder,orimmunodeficiency?.Rev.Med.Virol.,16:
251–261.doi:
10.1002/rmv.50517流行病学性别:男女均可发病年龄:可发生在任何年龄发病地区:以亚洲国家多见,多为日本,西方国家少见。18临床表现IM样症状(主要):发热、肝脾肿大、淋巴结肿大和肝功能衰竭其他症状:血小板减少、贫血、腹泻、葡萄膜炎等并发症:多器官功能衰竭、DIC、消化道溃疡/穿孔、冠状动脉瘤和恶性淋巴瘤等19实验室检查:血清EBV抗体滴度异常增高,包括抗VCA-IgG≥1:640或抗EA-IgG≥1:160,VCA/EA-IgA阳性在感染的组织或外周血中检测出EBER-1阳性细胞;外周血PBMC中EBV–DNA水平高于10拷贝/ug
DNA受累组织中EBV-EBNA或EBV-LMP1免疫组化染色阳性慢性活动型EBV感染OkanoM,KawaK,KimuraH,etal.ProposedguidelinesfordiagnosingchronicactiveEpstein-Barrvirusinfection.AmJHematol.2005.80(1):64-9.20临床分型根据外周血EB病毒感染细胞的类型分为T细胞型:主要表现为发热、高滴度抗EBV相关抗体,预后较差。NK细胞型:主要表现为蚊虫过敏(HMB,hypersensitivitytomosquitobites)及相应的皮肤损害,骨髓或外周血中大颗粒样异常淋巴细胞增多、血清IgE水平升高、PBMC中病毒载量升高KimuraH,HoshinoY,HaraS,etal.DifferencesbetweenTcell-typeandnaturalkillercell-typechronicactiveEpstein-Barrvirusinfection.JInfectDis.2005.191(4):531-9.21T细胞型CAEBVNK细胞型CAEBV症状发热+++肝脾肿大++淋巴结肿大++大颗粒异常淋巴细胞增多+++蚊虫叮咬过敏+++实验室检查抗VCA-IgG水平↑↑↑↑↑抗EA-IgG水平↑↑↑病毒载量↑↑↑预后死亡率↑↑↑22细胞因子表达细胞因子健康患儿T细胞型CAEBVNK细胞型CAEBVIL-1β-++IL-10-++IL-13-+++IFN-γ-++23诊断标准(1)持续或反复IM样症状(2)受感染组织(包括外周血)存在特异性抗EBV抗体:抗VCA抗体和抗EA抗体升高,和/或检测出EBV基因(3)排除其他EBV感染疾病24诊断标准(1)类IM症状包括:发热、淋巴结及肝脾肿大;并发症包括:血液系统、消化道、神经系统、肺、眼睛、皮肤及心血管异常。(2)抗体升高:抗VCA-IgG≥1:640;EA-IgG≥1:160;VCA和/或EA抗体阳性(3)其他推荐实验室检查:1)感染组织或外周血检测EBVDNA或相关基因(EBV-DNA,EBERs,EBNA、LMP,EBV感染靶细胞)2)组织病理学检查3)免疫学检查25治疗抗病毒药物:阿昔洛韦、更昔洛韦(效果不佳)干扰素:γ-干扰素和α-干扰素(个例)免疫、化疗药物造血干细胞移植:目前最有效的治疗方式,但移植后的并发症风险较大(目的:重建机体对EBV的有效免疫,彻底消除被EBV感染或克隆增殖的淋巴细胞)26预后总体预后较差,尤其是出现严重并发症的患儿死亡原因可包括:肝衰竭、心脏衰竭、各种类型的淋巴异常增殖性疾病、机会感染及HLH预后因素:年龄>8岁的患儿预后较好并发血小板减少预后较差T细胞型CAEBV预后较差27EBV相关嗜血淋巴组织细胞增多症EBV-HLH是EBV感染诱发的一类HLH,是继发性HLH中重要的类型,多见于亚洲人群临床表现:持续性发热、肝脾淋巴结肿大、黄疸、肝功能异常、水肿、胸腔积液、三系下降等实验室检查(EBV):EBV特异性抗体检测结果多样性外周血单个核细胞和血浆/血清的EBV-DNA载量较高28总结EBV病毒在人体B细胞中建立潜伏感染,并终生存在感染者内EBV抗体中:最早出现的是抗CA-IgM和IgG,持续终身的是抗CA-IgG和抗NA-IgGEBV载量检测:可鉴别健康携带者和EBV相关疾病患者。与CAEBV和EBV-HLH的病情严重程度和预后有关。29临床表现EBV特异性抗体嗜异凝集抗体试验EBV载量检测其他IM发热、咽峡炎
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