实验针灸学实验

第二章实验针灸学实验实验一 动物实验基本操作实验方案【实验目的】掌握动物实验的基本操作技术和方法。【实验对象】2.0～2.5kg健康家兔。【实验材料】兔台、动物秤，手术刀、手术剪、止血钳、注射器、镊子、玻璃分针。【实验步骤】称重：用动物秤称重，以千克计算。麻醉：以20%氨基甲酸乙酯按5ml／kg注意：血管，使静脉扩张。指固定兔耳的远端，并把住头部，避免家兔躁动。15原注射点的近心端重新刺入。手术：将麻醉后的家兔仰卧固定于手术台上。于颈部正中，上腹部及大腿内侧剪毛。在颈部沿正中线切开皮肤5～7cm（粗细：迷走神经—交感神经—减压神经）轻剥离组织，然后用四根线分别将颈总动脉、迷走神经、交感神经、减压神经作以标记。3～4cm于下肢股内侧纵行切口，剥离股动脉，坐骨神经。观察子宫（雌兔。处死：于耳缘静脉注射空气，造成气体栓塞致死。【思考题】在麻醉动物时应注意哪些问题？家兔耳缘静脉注射时应注意哪些问题？实验二 针刺（灸“素髎”穴对失血性休克家兔血压的调整作用【实验目的】本实验旨在通过观察针刺（灸“素髎”穴用于急救的部分机理，并掌握动物血压测量的实验方法。【实验对象】2.0～2.5kg健康家兔1只，雌雄不拘。【实验材料】Digitallab生物医学信号采集处理系统、血压换能器、动脉插管、静脉套管、动脉夹、常用手术器械120ml和5ml5100m（500m、205％枸椽酸钠、纱布、棉球、缝线。【实验步骤】调整生理记录仪及血压换能器至正常工作状态。动脉插管通过一段胶管（不宜过长5％枸椽酸钠，勿使其中有气泡。1只称重，用20％氨基甲酸乙酯溶液，按5ml／kg兔仰卧固定于兔台上，颈部及腹股沟部剪毛备皮。分离出一侧颈总动脉，长约2.0～3.0cm5％枸椽酸钠，插入动脉插管，结扎固定。切开腹股沟处皮肤，切口2.0～3.0cm的股动脉，分离出股动脉2.0～2.5cm，穿双股结扎线，结扎其远心端，用动脉夹夹住其近心端，在其上用眼科剪剪一小口，注射入少许5％枸椽酸钠，插入动脉插管，结扎固定，以备放血。为防止实验过程中凝血，在耳缘静脉注入5％枸椽酸钠适量1m／k。约3分钟后，待血压稳定后，迅速于股动脉处放血，使血压下降至止放血，并量出其放血量，放血量约为体重的2％左右。待血压稳定在某一较低水平后，针刺（灸“素髎”穴，观察并记录血压的变化。停针刺（灸）后观察血压变化情况15～20比较针刺（灸）后血压变化程度及持续时间，写出实验报告。【注意事项】1／2量可较快注入，待动物较安静后，后1／2同时注意兔的呼吸情况，出现异常情况立即停止注射。（损伤通向甲状腺的血管。注意动脉插管与颈动脉的位置，勿使其扭转而影响血压测量。气候较冷时，要有手术灯照射动物以保温。【实验结果】记录家兔颈动脉血压值（mmHg）正常值：正常值：股动脉放血后血压值：灸后血压上升的时间及幅度：灸5分钟后血压的变化：分别刺激交感神经、迷走神经后血压的变化：停灸5分钟后血压变化：【思考题】若欲验证针刺（灸）对失血性休克家兔血压的调整作用需注意哪些实验环节？请设计一个验证穴位功能相对特异性和补泻手法效应差异性的针灸升压抗休克实验。实验三 针刺对家兔心肌缺血性心电图的影响【实验目的】熟悉动物心电图描记方法，学会一种心肌缺血动物模型的复制，验证针刺“内关”穴对家兔心肌缺血的治疗作用。【实验对象】2.0～2.5kg健康家兔2只，雌雄不拘。【实验材料】Digitallab生物医学信号采集处理系统、20%氨基甲酸乙酯，毫针，G—6805电针，兔台，手术器械一套。【实验方法】两只家兔一只作实验兔，一只对照，分别称重。20%5ml／kg于腹腔麻醉后仰卧固定于兔台上。于家兔胸骨处剪毛。1cm处。（3描记心电图，增益选择、显速、参数设置视实验情况而定。20分钟，于耳缘静脉注射垂体后叶素2.5／k、3’5’、10’各记录数据一次，对照兔除不做针刺外，其他处理与实验兔相同。比较二者心电图变化之异同。【思考题】垂体后叶素导致心肌缺血的特点是什么？为什么“内关”穴可治疗心肌缺血？实验四 针刺对实验性肺水肿家兔呼吸状态的影响【实验目的】本实验在于了解哮喘动物模型制作方法及针刺对其呼吸状态的影响。【实验对象】2.0～2.5kg健康家兔1只，雌雄不拘。【实验材料】Digitallab15ml1ml20%50%15mm毫针、缝线、棉球、纱布。【实验步骤】20%氨基甲酸乙酯麻醉家兔。将家兔仰卧位固定于兔台上，并在颈部、剑突下剪毛备用。作气管切开后插入气管插管；剑突下切皮，连接膈肌放电测量装置（的针灸针互相不能接触。由呼吸和膈肌放电测量装置记录家兔呼吸运动正常值。由气管沿管壁缓慢注入50%葡萄糖注射液0.5ml／kg分钟，10分钟时呼吸波形，观察其呼吸频率、幅度的变化；膈肌放电情况变化。针刺家兔的足三里穴，加电针5分钟后出针。分别记录行针时，取针后5钟的呼吸波形。再次按半量注入50%5分钟后出针。分别记录行针时，取针后5分钟，10分钟的呼吸波形。对比二穴对哮喘模型的治疗效果。【注意事项】实验过程中呼吸波形如接近正常状态时，可向气管内补注50%葡萄糖注射液0.5ml。实验五 针刺不同穴位对小白鼠耐缺氧时间的影响【实验目的】针刺对能量代谢有明显影响同穴位是否存在功能相对特异性。【实验对象】20克左右小白鼠9只，雌雄不拘。【实验材料】50ml广口瓶9只、15mm毫针6支、秒表9只、钠石灰、胶布若干。【实验步骤】12h。2g，盖上盖子备用。9只小白鼠随机分为BC三组，做好标记。5C组为对照组，除不给予针刺外，余同针刺组。秒表开始计时。随时观察瓶内小白鼠情况，发现小白鼠呼吸停止，立即按下秒表，记录死亡时间。从小白鼠开始装入瓶内至呼吸停止为小白鼠耐缺氧时间，比较各组小白鼠耐缺氧时间统计学的显著性检验。【注意事项】小白鼠装入瓶内后，瓶盖要塞紧，必要时用蜡烛熔化封住瓶塞四周，防止漏气。钠石灰要新鲜干燥。范围内。【思考题】针刺对小白鼠耐缺氧时间影响的可能机制是什么？实验六 针刺对家兔奥狄括约肌肌电的影响【实验目的】胆石症是常见急腹症之一，发病率较高。针刺“日月“期门”穴有明显的治疗作用，能观察针刺对其调整作用。掌握奥狄括约肌肌电的记录方法。观察针刺“日月”、“期门”穴对家兔奥狄括约肌肌电的调整作用并进行比较。【实验对象】2.0～2.5kg健康家兔1只，雌雄不拘。【实验材料】Digitallab301120基甲酸乙酯溶液、浓盐酸、液体石蜡。【实验步骤】18～20兔称重，麻醉％氨基甲酸乙酯溶液5ml／kg）上腹部剪毛备用。做气管插管手术，接人工呼吸机。8cm200μm2lcm37℃～38℃石蜡油。术后30～40分钟开始实验。肌电信号输人生物信号处理系统记录，定标电压1Omm／1mV1mm／s10标记正常奥狄括约肌肌电活动。针刺“日月”、“期门”穴（1次分钟，观察肌电活动变化。【注意事项】导电极铜丝一定要处理好，两电极越近越好。地线置于切口皮下。注意防止动物挣扎导致电极脱落，一旦电极脱落，要重新安放电极，重新实验。如果奥狄括约肌损伤可影响实验结果。【思考题】正常家兔奥狄括约肌肌电有何特点？实验七 针刺对家兔小肠蠕动的调整作用【实验目的】观察针刺“足三里”对家兔小肠蠕动的调整作用。【实验对象】2.0～2.5kg健康成年家兔1只，雌雄不拘。【实验材料】Digitallab生物医学信号采集处理系统、张力换能器、25mm毫针4支、万能支架、竹夹、双凹夹、兔台、手术器械1套、喇叭型玻璃管、20%氨基甲酸乙酯。【实验步骤】取家兔1只，称重，耳缘静脉注射20氨基甲酸乙酯5mkg，仰卧固定于兔台。2cm一段小肠按下法固定。在此段小肠的两端（相距2cm左右）过空肠浆膜及肠壁，留线一段。时将穿起空肠肠壁的留线悬于管中央，上接张力换能器。用纱布覆盖局部，同时用侧灯照射以保持体温。打开记录仪，记录正常肠蠕动曲线。待记录曲线较稳定后，进行下步实验。1.5～2.510分钟后，记录肠蠕动曲线。10分钟。针刺双侧“合谷”穴，直刺2.5～3.0mm，强度以上肢微动为度，留针10肠蠕动曲线。【实验结果】波型 幅度 频度正常值针刺“足三里”穴值针刺“合谷”穴值【思考题】影响针灸对小肠蠕动调整作用的因素是什么？还有哪些穴位可调节，如何设计实验？实验八 艾灸“至阴”穴对兔子宫收缩的影响【实验目的】穴对家兔子宫活动的影响。【实验对象】2.0～2.5kg健康成年雌性家兔1只。【实验器材】Digitallab生物医学信号采集处理系统、手术器械1套（针（圆针、皮针个1、缝扎线、纱布线2010毫升注射器、生理盐水。【实验方法及步骤】20%5ml／kg上，于下腹部备皮。从耻骨联合上沿正中向上做下腹正中切口长约3～5cm，逐层切开打开腹腔（时应及时止血结扎之（双角子宫调试三道生理记录仪及传感装置，记录正常状态下的子宫收缩活动曲线。（20～30分钟，观察记录其子宫收缩活动有无变化。【思考题】对各种不同处理引起子宫收缩变化及其差异的原因、临床实用价值进行探讨分析。实验九 针刺得气时的穴位肌电变化【实验目的】学会一种肌电引导记录方法的关系探讨得气的组织学和生理学定义。【实验对象】健康人（同学间互测。【实验材料】示波器或JD-2（针刺涂绝缘漆触压角计、检查床、血压计。【实验步骤】受试者安静、仰卧于检查床上，要求体位舒适持久，全身尽量放松。测量血压，测后将气带暂留上臂备用。调试记录装置及准备记录。将仪器组装连接，并进行调试。开启电源，预热3～520μV／cm，放大器时间常数为0.035左右，示波器扫描速度为0.7s／cm；标准电压调至50μV／cm。用酒精棉球消毒合谷、阳溪、三阴交部皮肤，将垫有生理盐水棉球的电极板置于三阴交穴部固定并与放大输入的接地相连相连，放大输入的负极与准备刺入合谷穴的针灸针体相连。针合谷，行针催气并细心体会手下感觉强弱，待有手感时（记住强、中、弱程度手放开立即记录肌电，并观察其幅度大小（肌电幅度有：强者≥50μV，小者＜5μ，有无及其密集程度和持续时间。比较手感强弱与肌电幅度大小及有无是否呈现一致关系。进行对照比较（受试者主述针感强弱差异。40mmHg21止。比较触压觉和穴位肌电消失的时间。【思考题】有无一致关系？得气的组织学和生理学含义是什么？阻断血流后，从触压角和肌电与针下手感消失时间的先后说明了什么问题？实验十 针刺抗惊厥作用【实验目的】间为指标，观察针刺小白鼠水沟穴对胰岛素过量而致惊厥的缓解效应及针刺的急救效果。【实验对象】20～22克同性别的健康小白鼠9只。【实验材料】天平、秒表6只、1ml和2ml注射器、5号针头2个、50ml烧杯2个、25mm毫针4支、40／ml胰岛素注射液、生理盐水pH调至2.～3.、胶布若干。【实验步骤】14～16h（不禁水。40u／mlpH2.5～3.54u／ml10ml备用。9只，称重，编号，随机分成针刺组23只。按1u／10g注意避开肝、脾、膀胱。回抽无血及液体时再注射，注射后轻揉小鼠腹部促进吸收。继而观察小白鼠活动情况。（以捻转手法为主，手法轻柔。行针3持续总时间及死亡时间。惊厥程度评价标准强阳性：角弓反张，四肢伸直和抽搐反应强烈者，或身体呈直线性滚动者，以表示。弱阳性：轻微的角弓反张，或伴有四肢伸直，或伴有四肢抽搐者，以（＋）表示。阴性：无角弓反张，仅表现为四肢伸直，或四肢微微抽动者，以（－）表示。对照组除不针刺外，其他同针刺组。【注意事项】实验过程中避免各种因素对小白鼠的刺激，以尽量减少实验误差。【思考题】针刺抗惊厥作用的可能机制是什么？实验十一 针刺退热作用【实验目的】电针家兔大椎穴以观察针刺对实验性发热的退热效应。【实验对象】健康成年家兔2只，性别、体重均相同。【实验材料】肛温计2支、兔台2个、脱脂牛乳若干，5ml注射器2支、注射用针头2个、G-6805治疗仪2台、25mm毫针4支、凡士林适量、胶布若干。【实验步骤】称重。兔耳缘静脉麻醉。将家兔仰卧固定于兔台上。反复测肛温3次（记录均值，每次间隔2分钟，描记温度曲线。1.3ml／kg。1532分钟，描记温度曲线。3015分钟。32分钟，描记温度曲线。将针刺组与非针刺组肛温曲线进行比较。实验十二 针刺镇痛实验【实验目的】学会一种痛阈测定方法，练习痛阈测定仪的使用，验证针刺镇痛作用。【实验对象】健康人群（同学间互测。【实验材料】痛阈测定仪、生理多用仪（或G-6805治疗机、针灸针、饱和KCl球、检查床等。【实验步骤】受试者安静平卧，将痛阈测定仪调试到5mA量程测试档，并将其阳极刺激点）定于耳垂部，参考电极握于受试者左手，并瞩其感到痛时关闭手控开关。先将痛阈测定仪开到小阶梯档，然后打开刺激开关，于是测定仪的电流强度开始逐步3次，取其均值为基础痛阈（注意：受试者必须在刚感觉刺痛时针合谷（双侧）得气后行针，留针30分钟，加G-6805电针仪刺激。于针刺开始后2030分钟各测3次痛阈（间隔2分钟较。【思考题】对全班或全组15个受试者在针刺前后之痛阈变化进行统计学处理，比较其差异性，并对本实验结果进行讨论分析，对针刺镇痛效果的作用机理及影响因素进行讨论。实验十三 针麻下动物阑尾切除术实验【实验目的】了解针麻基本方法、步骤和取穴规律，掌握针麻下动物阑尾切除术的实验方法。【实验对象】2.0～2.5kg健康成年家兔2只，雌雄一致。【实验材料】G680528～30120％氨基甲酸乙酯溶液、阑2套（2224244枚5ml2ml注射器、胶布、兔台、台秤。【实验步骤】220%5ml／kg1／3量于耳缘静脉注射麻醉。将2“”（3mm5～10m穴（下唇下缘中点向下2m，针尖向下沿中线平刺115m，连接电针0微抖动而无不安挣扎为度。于针麻诱导25～30分钟后，开始按常规剪毛、消毒，行阑尾切除术。另一只家兔不用针麻诱导，亦待25～30分钟后开始按常规剪毛、消毒，行阑尾切除术。手术中分别观察两只家兔的反应，并作记录，其中动物安静无挣扎者用“一”“++”表示。实验中动物挣扎不安，或挣扎激烈不能手术者，提示动物有明显的疼痛感，可用适量20％氨基甲酸乙酯溶液静脉注射进行麻醉，以减轻疼痛（常规麻醉剂量为5m／kg。针麻镇痛效果的评价标准：实验中，针麻动物在手术过程中安静，无明显挣扎，呼吸1／320％氨基甲酸乙酯溶液用量大于常规用量的1／3才能完成手术者为针麻失败。对针麻镇痛的原理及本实验的选穴进行讨论。【注意事项】观察结果的可比性。尾动脉，然后进行阑尾切除。【思考题】根据观察记录结果分析本实验选穴的依据是什么？实验十四 循经感传的测定【实验目的】掌握循经感传的检测方法，了解循经感传的基本特征。【实验对象】健康人（同学间互测。【实验材料】探测电极、无关电极、G6805电针治疗仪，生理盐水，75%酒精棉球。【实验步骤】5～6人，轮流担任受试者，观察、记录者。5分钟后接受检测。观察者标定出各经的井穴。将无关电极置同侧内关穴（测下肢感传时，或同侧三阴交穴（测上肢感