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本文格式为Word版,下载可任意编辑——放线菌霉菌的形态观察微生物学测验LabworkonMicrobiology,三峡大学化学与生命科学学院微生物学教学组,测验指导老师:涂璇,测验五放线菌、霉菌形态查看,一、测验目的二、测验原理三、测验器材四、测验步骤五、测验报告,一、测验目的,学习并掌管查看放线菌、霉菌形态的根本方法。
初步了解放线菌和四类常见霉菌的根本形态特征。,二、根本原理,放线菌(原核微生物):
由不同长短的纤细的菌丝所形成的单细胞菌丝体。菌丝体分为两片面,即潜入培养基中的养分菌丝(或称基内菌丝)和生长在培养基以上的气生菌丝。有些气生菌丝分化成孢子丝,呈螺旋形、波浪形或分枝状等。孢子常呈圆形、椭圆形或杆状。气生菌丝及孢子的外形和颜色常作为分类的重要依据。,放线菌培养和查看方法,扦片法:在放线菌平板上扦上盖玻片后培养,使放线菌菌丝沿着培养基外观与盖玻片的交接处生长而附着在盖玻片上。查看时直接取出盖玻片置于载玻片上镜检。,镜检:用镊子拔出盖玻片,擦去后面培养物,将有菌的一面朝上置于载玻片上,直接镜检。
宜用略暗光线查看,低倍镜—高倍镜;
染色后查看效果更好。,玻璃纸法:将玻璃纸笼罩在平板外观,接种放线菌、培养,放线菌在玻璃纸上形成菌苔。查看时取下玻璃纸固定在载玻片上镜检。
镜检:先在载玻片上滴一小滴水,取下玻璃纸,使菌面朝上,使玻璃纸平贴于载玻片上。,优点:可查看到放线菌自然生长状态下的特征,和不同生长期的形态。,留神:整过程勿触动菌面培养物。,印片法:将要查看的放线菌的菌落或菌苔直接印在载玻片上,经染色后查看。
用接种铲或解剖刀将平板上的菌苔连同培养基一起切下,菌面朝上。另取一载玻片,微热后,轻轻按压菌苔,固定,染色后镜检。
主要用于查看孢子丝的形态,孢子的排列及其外形等,但形态特征可能有所变更。,霉菌(真核微生物):
霉菌是一类可产生繁杂分枝菌丝的真核微生物的统称。分枝菌丝分为基内菌丝和气生菌丝,气生菌丝生长到确定阶段分化产生繁殖菌丝,由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝和孢子的宽度通常比放线菌大得多。,霉菌培养和查看方法,载玻片法:将培养基薄层置于载玻片上,接种后盖上盖玻片培养,霉菌即在其间的有限空间内沿盖玻片横向生长。查看时直接将载玻片镜检。,玻璃纸法:与放线菌好像。
直接制片查看法:用解剖针挑取少量培养物置于预先滴加乳酸石炭酸棉蓝染色液中,制成霉菌制片镜检。
50%乙醇用于洗去孢子;
尽可能保持霉菌生长状态;
制止产生气泡。
特点:细胞不变形;
不易枯燥,易保存;
防止孢子飞散;
巩固反差。,霉菌菌丝较粗大,细胞易收缩变形,而且孢子很轻易飞散,制真菌标本时常用乳酸石炭酸棉蓝染色液。
用乳酸石炭酸棉蓝染色液制成的霉菌标本的特点是:(a)细胞不变形;
(b)具有杀菌防腐作用,不易枯燥,能保持较长时间;
(c)溶液本身呈蓝色,有确定染色效果。,1、菌种放线菌划线平板28℃7天后培养物,曲霉、根霉、青霉和毛霉划线平板28℃4天后培养物。
2、仪器显微镜;
3、其他材料平皿,载玻片,解剖针,香柏油,二甲苯,擦镜纸,吸水纸,染色缸等。,三、测验器材,四、操作步骤,查看放线菌气生菌丝和基内菌丝的识别取插片一片,直接在显微镜下举行查看,留神分界面两侧菌丝形态的差异,链霉菌的基内菌丝与气生菌丝,,孢子丝分隔成孢子,放线菌和细菌的异同,查看黑根霉菌丝处境和子囊孢子处境(着重鉴别孢子囊、包囊梗、假根):,查看毛霉菌丝和分生孢子着生处境:,逐级分枝,查看黑曲霉菌丝分隔处境和分生孢子着生处境(着重鉴别分生孢子梗、足细胞和分生孢子):,分生孢子梗顶端膨大成圆形或椭圆形的顶囊,由顶囊向外辐射长出一层或两层小梗,最上层小梗呈瓶状,在其顶端生成成串的分生孢子。,查看青霉菌丝和分生孢子着生处境:,五、测验报告,记录所查看到的放线菌基内菌丝和气生菌丝的区别绘图表示曲霉、根霉、青霉和毛霉的形态特征,斟酌题,在显微镜的高倍镜或油
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