消毒和灭菌技术讲稿

消毒和灭菌技术讲稿1第一页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

̶教学内容§1

基本概念§2物理方法§3化学方法§4制药工业中的消毒与灭菌（♫）2第二页，共六十六页，2022年，8月28日第一节

基本概念

3第三页，共六十六页，2022年，8月28日灭菌－杀灭或除去所有微生物的繁殖体和芽胞。消毒－杀灭或除去病原微生物。防腐－抑制微生物的生长与繁殖。抑菌剂或防腐剂。除菌:用冲洗、过滤等机械手段除去微生物的方法化疗：用对病原菌有毒力但对机体无害的化学物质杀灭或抑制机体内病原微生物的方法消毒与灭菌技术

̶基本概念4第四页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

̶基本概念无菌－在一定范围内没有活的微生物存在。。无菌操作法－防止细菌进入机体或对象的技术。无菌车间无菌操作台5第五页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

̶基本概念无菌操作：防止微生物进入工作对象的方法。无菌制剂－系指采用某一无菌操作方法或技术制备的不含任何活的微生物繁殖体和芽胞的一类药物制剂。6第六页，共六十六页，2022年，8月28日第二节

物理方法（P30）

7第七页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

̶物理灭菌法热力灭菌法（干热灭菌、湿热灭菌）辐射灭菌法（紫外线、电离幅射、微波）滤过除菌法（除菌滤器、适用物品）其他超声波（机制：裂解细菌，主要用于粉碎细胞、提取抗原）干燥与低温抑菌8第八页，共六十六页，2022年，8月28日热力灭菌法原理使微生物蛋白质变性凝固；酶失活；微生物体内的DNA断裂。干热法湿热法空气导热空气、水蒸气导热传热较慢传热快，穿透力强9第九页，共六十六页，2022年，8月28日

焚烧----最彻底的灭菌方法灼烧----直接用火焰灭菌方法如接种环、试管口、三角瓶口干烤----加热160-170℃2h

玻璃器皿、陶瓷1、干热灭菌法红外线----热效应，与干烤类似灭菌效果：可杀死营养体和芽胞10第十页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

̶热力灭菌法灼烧无菌区10-20cm11第十一页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

̶热力灭菌法干烤160℃2h12第十二页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

̶热力灭菌法红外线照射但红外线光源越强、光源距消毒物品越近，温度越高，其热效应只能在照射到的表面产生13第十三页，共六十六页，2022年，8月28日2.湿热灭菌法高压蒸汽灭菌法（热压灭菌法）最有效的湿热灭菌法121℃15-20mim（杀芽胞)煮沸消毒法水煮100℃5mim(杀繁殖体)-2h(杀芽胞)流通蒸汽消毒法巴氏消毒法间歇蒸汽灭菌法水蒸汽100℃15-30mim(杀繁殖体)反复多次流动蒸汽间歇加热灭菌(杀芽胞）较低的温度61℃30mim/71℃30s（杀致病菌）效果比干热好14第十四页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－湿热灭菌法：湿热灭菌特点蒸气比热干空气穿透力强，所以灭菌效力高于干热灭菌法。灭菌效果可靠,简便、经济、易控制制剂生产中广泛可靠的灭菌方法。除对热敏感的药物外其他药物均可选用15第十五页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法）原理适用条件是热力消毒灭菌中效果最好的一种方法利用高压及饱和蒸汽的高热所释放的潜热灭菌，潜热是指当1g100℃的水蒸汽变成1g100℃的水时所释放的热能（2，255J）115℃,70.91kPa,30min121℃，103.1kPa,15-20’临床广泛应用于耐高温、高压、潮湿物品的灭菌，如各类器械、敷料、搪瓷、橡胶、玻璃制品及溶液等是热力消毒灭菌中效果最好的一种16第十六页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法）培养基注射液手提式灭菌锅灭菌箱17第十七页，共六十六页，2022年，8月28日高压蒸汽灭菌消毒与灭菌技术

－湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法温度/℃压力/kPa(kg/cm2)时间/min11040.52(0.4)4011570.91(0.7)30120101.3(1.0)20125141.82(1.4)15130182.34(1,8)10热压灭菌所需温度与相当压力及时间18第十八页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法快速压力蒸汽灭菌器高压蒸汽灭菌器19第十九页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌常用设备手提式热压灭菌器（科研、检验、医务室）20第二十页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－湿热灭菌法：热压灭菌法（高压蒸汽灭菌法）灭菌初期先排净锅内冷空气;灭菌时间：从达到规定压力和温度开始计；锅内水分要充足;灭菌物品装量不宜太满;灭菌结束需缓慢减压；灭菌结束，趁热取出物品。高压蒸汽灭菌注意事项21第二十一页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－湿热灭菌法：流通蒸汽灭菌法水蒸汽100℃30-60’(杀繁殖体)适用对象：不需杀死芽孢的物体的消毒。适用于一些注射剂生产，尤其是1－2ml注射剂及不耐高热的品种。若在药液中加入抑菌剂（0.1%~0.5%苯酚等），可杀死芽孢此法不能保证杀灭芽孢，因此制备过程要避免污染。22第二十二页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－湿热灭菌法：间歇灭菌法将灭菌物体置于<100℃d蒸汽中，30min后，置于20~25℃

，24h。反复三次(杀芽胞）

不宜高压灭菌的培养基不耐热的药物和营养物发酵车间的管道等中药注射剂常用该法适用对象缺点：时间长、功效低，消灭芽孢效果差23第二十三页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－湿热灭菌法：煮沸灭菌法煮沸灭菌法100℃5’(杀繁殖体)，2h(杀芽胞)适用对象：注射器和外科器械的消毒。24第二十四页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－湿热灭菌法：巴氏消毒法巴氏消毒法（杀致病菌）牛奶加热至61℃30’或71℃15’’牛奶加热82℃处理4秒热水或蒸汽加热至65℃～80℃，消毒10～15分钟。适用对象：奶制、果汁、酒、糖浆等食品消毒。25第二十五页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－影响热力灭菌的因素微生物的种类和数量灭菌温度与作用时间（灭菌温度与时间成反比）被灭菌物品的性质（所含营养、pH）26第二十六页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－热力灭菌法：湿热灭菌与干热灭菌的比较同一温度下，湿热灭菌比干热灭菌效果好湿热中细菌菌体蛋白较易凝固湿热的穿透力比干热大湿热的蒸汽有潜热27第二十七页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

̶辐射灭菌法̶非电离辐射：紫外线波长240-300nm（254nm）杀菌机理：干扰DNA的复制与转录

特点：紫外线穿透力较弱房间静态空气消毒时剂量一般为0.1～0.4w/m2

通风管内流通空气可采用大于100w/m2的大剂量28第二十八页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－辐射灭菌法̶非电离辐射：紫外线杀灭繁殖体需3~5s杀灭芽孢需10min以上紫外灯必须无尘、无油垢紫外灯有效使用期为3000h一般6－15m3房间装30w紫外灯一只；灯距地面2.5—3m应在操作前照射1－2h,操作时关闭。29第二十九页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－辐射灭菌法：电离辐射包括：β射线（电子束灭菌，适用薄、密度低的物料）

60Co－γ射线（同位素辐射灭菌法）杀菌机理：产生游离基,破坏DNA。特点：射线穿透力强、被灭菌物体温度变化小适用范围：一次性医用塑料制品的消毒、食品的消毒-不破坏其营养成分30第三十页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－辐射灭菌法特点适用于热敏性药物的灭菌；γ射线穿透力强,特别适用于已包装密封的药品消毒灭菌可防二次污染；杀菌作用可靠，广泛适用于固、液、半固体物料。有可能使药效活性降低，使用中注意安全保护。31第三十一页，共六十六页，2022年，8月28日微

波

消

毒

灭

菌

法微波是频率在30-300000MHz，波长在0．001～1m左右的电磁波。微波可以杀灭各种微生物，包括细菌繁殖体、真菌、病毒和细菌芽孢、真菌孢子等常用于食物及餐具的消毒、医疗药品及耐热的非金属材料器械的消毒灭菌。

消毒与灭菌技术

－微波消毒灭菌法32第三十二页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－滤过灭菌法指药液通过无菌滤器，除去活的和死的微生物而得到无菌滤液的方法。特点：（1)适用于很不耐热的药物溶液的除菌（2)必须无菌操作（滤球、容器、药液、环境无菌等过程）。33第三十三页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－滤过除菌法34第三十四页，共六十六页，2022年，8月28日过滤灭菌35第三十五页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－滤过除菌法杀菌机理：含有微细小孔<0.22μm,只允许液体或气体及孔径<0.22μm的颗粒通过，细菌不能滤过。不能除病毒、支原体适用范围：血清、毒素、输液、生物制品、抗生素以及空气等的除菌。36第三十六页，共六十六页，2022年，8月28日

37第三十七页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－超声波消毒法不被人耳感受的高于20kHz/s的声波，称为超声波。超声波可裂解多数细菌，尤其是G-菌。主要用于粉碎细胞，以提取细胞组分或制备抗原等。38第三十八页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－干燥与低温抑菌法干燥法常用于保存食物，浓盐或糖渍食品可使细菌脱水，造成生理干燥，使细菌生命活动停止。低温可使细菌新陈代谢减慢，故常用于保存细菌菌种。39第三十九页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－物理灭菌法方法主要技术参数应用特点干热灭菌药典规定160170℃2h或140℃，3h穿透力弱，温度不易均匀，温度高，不适于大部分药品湿热灭菌热压灭菌98kPa(1kg/cm2),15-20min穿透力强，效果可靠，适用广流通蒸汽100℃，30-60min不能杀灭细菌芽胞间歇灭菌100℃，30min+室温24h，重复操作3次以上适于必须加热灭菌而又不耐高温者；时间长，效果不理想；须加抑菌剂40第四十页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－物理灭菌法紫外线灭菌200-300nm，254nm最强用于空气灭菌和表面灭菌，效果与微生物敏感性有关，对酵母菌和霉菌力弱微波灭菌2450MHz，3-6min强热效应，快速高效，适于热不稳定者辐射灭菌γ射线60Co穿透力强不升高温度，设备费用高，辐射能引起一些药物pH值、含量、活性等改变，某些制品不宜选用β射线由电子加速器产生，穿透力弱，灭菌效果差41第四十一页，共六十六页，2022年，8月28日第三节

化学方法（P37）

42第四十二页，共六十六页，2022年，8月28日利用化学药物（消毒防腐剂）破坏微生物的化学组成、物理结构和生理活动，达到防腐灭菌目的。消毒与灭菌技术

̶化学消毒法43第四十三页，共六十六页，2022年，8月28日促进菌体蛋白质变性凝固（酚、醇、醛、酸碱类等）干扰细菌酶系统和代谢（氧化剂、重金属盐类等）损伤细菌细胞膜，增加其通透性（表面活性剂、脂溶剂等）菌体成分氧化、水解或结构改变（氧化剂、卤素、醛、酚等）消毒与灭菌技术

̶化学消毒剂作用机制44第四十四页，共六十六页，2022年，8月28日浸泡法擦拭法喷雾法熏蒸法方法消毒与灭菌技术

̶化学消毒：化学消毒的方法化学消毒剂的使用方法45第四十五页，共六十六页，2022年，8月28日浸泡法侵泡法是将物品洗净、擦干后，浸没在消毒液中进行消毒灭菌的方法。擦拭法擦拭法是用消毒剂直接擦拭人体或物品表面，如皮肤、桌椅等，达到消毒灭菌的方法。喷雾法喷雾法是利用喷雾器将消毒剂变成微粒气雾弥散在空气中．对空气和物品表面进行消毒灭菌的方法。熏蒸法熏蒸法是将消毒剂加热或加人氧化剂，使其产生气体来进行消毒灭菌的方法。消毒与灭菌技术

̶化学消毒：化学消毒的方法46第四十六页，共六十六页，2022年，8月28日适用

室内物品消毒室内空气消毒不能蒸、煮、泡的物品消毒与灭菌技术

̶化学消毒：化学消毒的方法熏蒸法47第四十七页，共六十六页，2022年，8月28日熏蒸法空气物品1-2%过氧乙酸8ml/m330-120min纯乳酸0.12ml/m3＋等量水食醋5-10ml/m340%甲醛40-60ml/m3＋高锰酸钾20-40g

，6-12h环氧乙烷800-1200mg/L2.5-4h加热消毒与灭菌技术

̶化学消毒：化学消毒的方法̶熏蒸法48第四十八页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

̶化学消毒：化学消毒的方法̶熏蒸法使用能形成气体或蒸汽的化学药品适用于不耐热又不能过滤的药品（混悬液、固体药物等环氧乙烷灭菌法（制药设备、注射器、生物制品）

甲醛蒸汽熏蒸灭菌法（车间、制药设备）其他蒸汽熏蒸灭菌法(醋酸、乳酸、丙二醇、臭氧）49第四十九页，共六十六页，2022年，8月28日灭菌物品灭菌器减压排气预热通环氧乙烷混合气体抽真空排除环氧乙烷送无菌空气消毒与灭菌技术

̶化学消毒：化学消毒的方法̶环氧乙烷灭菌法50第五十页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

̶化学消毒化学：消毒的方法

̶环氧乙烷灭菌法环氧乙烷混合气体10%环氧乙烷90%二氧化碳12%环氧乙烷88%氟里昂51第五十一页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

̶化学消毒化学：消毒的方法

̶环氧乙烷灭菌法环氧乙烷维持时间浓度450mg/L45℃维持5h浓度850~900mg/L45℃,维持3h相对湿度：40%~60%温度：22~55℃52第五十二页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

－化学消毒：浸泡法与表面擦拭消毒法0.1%新洁尔灭（苯扎溴铵）0.2%—0.5%过氧乙酸2%煤酚皂溶液（来苏水）洁净区地面、门、墙、玻璃窗、天花板、清洁间水池和清洁工具的消毒70%—75%乙醇：皮肤、直接接触药物的仪器设备53第五十三页，共六十六页，2022年，8月28日杀菌浓度70％~75％效果最好

皮肤、器皿擦拭或浸泡。高浓度效果差无水的无杀菌作用消毒与灭菌技术

̶化学消毒：

常用化学消毒剂乙醇脱水剂

脂溶剂

蛋白质变性剂54第五十四页，共六十六页，2022年，8月28日无色液体，属环保型消毒剂。3%皮肤、伤口消毒。6％浸泡器皿30min消毒与灭菌技术

̶常用化学消毒剂过氧化氢55第五十五页，共六十六页，2022年，8月28日无色至微黄色液体有刺激性、腐蚀性、挥发性。消毒与灭菌技术

̶常用化学消毒剂过氧乙酸1.5%熏蒸

7ml/m30.2%

洗手0.5%

浸泡0.5%

喷雾使用56第五十六页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

̶常用化学消毒剂！注意原品密封

随配随用

对衣物有退色和腐蚀性2%~5%浓度

洗刷、喷雾、浸泡

湿处可干撒

作用约30min使

用57第五十七页，共六十六页，2022年，8月28日0.1%的高锰酸钾溶液可用来浸泡手、洗涤伤口；消毒茶具和水果。使用高锰酸钾消毒水果、餐具等物品时，先将欲消毒物品放入高锰酸钾溶液中浸泡数分钟，然后用清水冲洗干净即可。消毒与灭菌技术

̶常用化学消毒剂高锰酸钾58第五十八页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

̶常用化学消毒剂酚类石炭酸：3%~5%浸泡或喷雾来苏尔刺激性小

效力比苯酚强4倍

3%~5%喷雾、擦洗

2%消毒手新洁尔灭0.25%消毒皮肤、浸泡器具。

0.5%喷雾59第五十九页，共六十六页，2022年，8月28日消毒与灭菌技术

̶常用的消毒防腐剂及应用类型名称及使用方法作用原理应用范围醇类70%—75%乙醇脱水、蛋白质变性皮肤、器皿醛类0.5%—10%甲醛2%戊二醛（pH=8）蛋白质变性房间、物品消毒（不适合食品厂）酚类3%—5%石炭酸2%来苏儿（煤酚皂）3%—5%来苏儿破坏细胞膜、蛋白质变性地面、器具皮肤地面、器具氧化剂0.1%高锰酸钾3%过氧化氢0.2%—0.5%过氧乙酸氧化蛋白质活性基团，酶失活皮肤、水果、蔬菜皮肤、物品表面水果、蔬菜、塑料等60第六十页，共六十六页，2022年，8月28日类型名称及使用方法作用原理应用范围重金属盐类0.05%—0.1%升汞2%红汞0.1%—1%硝酸银0.1%—0.5%硫酸铜蛋白质变性、酶