疫苗制造基本程序

项目一病毒疫苗的制造项目二细菌性活疫苗制造项目三

细菌性灭活疫苗制造

内容第1页/共51页第一页，共52页。项目一病毒疫苗制造

病毒性禽胚培养疫苗制造病毒性细胞培养疫苗制造病毒性动物组织疫苗制造第2页/共51页第二页，共52页。一、病毒性禽胚培养疫苗制造

受精卵应来自SPF鸡群，至少源于未用抗生素药物的非免疫鸡群，以免受母源抗体的干扰和残留抗生素的影响。从受精卵入孵开始至培养全过程都应保持无菌，要求一定的温度和湿度，且需不断翻动，然后选择。选择一定日龄、发育正常的胚用于接毒培养。

痘病毒、正粘病毒、副粘病毒和疱疹病毒等一类生物制品，目前仍然利用禽胚特别是鸡胚制备，如鸡新城疫苗、流感疫苗（禽流感疫苗）、犬瘟热鸡胚弱毒疫苗等。禽胚疫苗生产的原材料来源方便、质量比较容易控制，制造程序简单，不需要过高的设备条件，生产的疫苗质量可靠。（一）鸡胚选择鸡胚选择种毒与毒种继代接毒与收获配苗第3页/共51页第三页，共52页。（二）种毒与毒种继代

目前适应于鸡胚的种毒多系弱毒，包括自然弱毒与人工培育的弱毒两类。各种制苗用的种毒多数由国家菌毒种保藏部门或指定单位保存，保存的种毒多为冻干毒。冻干毒种需按规定要求在鸡胚继代复壮，通常继代3代以上，经检定符合标准后方可作力生产疫苗的毒种，毒种检定内容包括无菌检验、毒价测定和其他项目的检定等。一、病毒性禽胚培养疫苗制造种毒与毒种继代鸡胚选择接毒与收获配苗第4页/共51页第四页，共52页。（三）接毒与收获

鸡胚接毒涉及接毒途径和接毒量两方面。根据不同的病毒与不同疫苗生产程序，选择最佳接种途径和接种量。接种途径：绒毛尿囊膜接种11~12日龄胚尿囊腔接种9~11日龄胚羊膜腔接种10~12日龄胚卵黄囊接种5~8日龄胚如鸡新城疫I系和II系毒采取尿囊腔接毒，前者接种10-3稀释毒种0.1ml，后者接种10-4稀释毒种0.1ml。鸭瘟鸡胚化弱毒疫苗采用绒毛尿囊膜接种50-100倍稀释毒0.2ml。1.接毒一、病毒性禽胚培养疫苗制造接毒与收获鸡胚选择种毒与毒种继代配苗第5页/共51页第五页，共52页。

鸡胚接毒后培养增殖的时间和温度、湿度以及收获的标准与内容物依不同的病毒和不同的疫苗而异。如鸡新城疫I系疫苗，接毒后于38.5~39C、相对湿度60%~70%条件培养增殖，收集接毒后24~48h内死亡胚，置0~10C冷却4~24h，收获胚液，进行无菌检验，供制备湿苗用。也可收获胚液、胎儿及绒毛尿囊膜混合制成乳剂制备冻干苗。鸭瘟鸡胚化弱毒疫苗，则收集接毒后48~120h内死亡的鸡胚，冷却后采取绒毛尿囊膜、尿囊液、胎儿制造冻干苗用。2.培养收获第6页/共51页第六页，共52页。

按规定收获的胚液、胎儿和绒毛尿囊膜乳剂经无菌检验合格后即可进行配苗。

1.湿苗通常于鸡胚液内，按每毫升加入青霉素和链霉素500~1000U，放置0~10C冷暗处处理后分装。

2.冻干苗经无菌检验后合格的胚液或胚液、胎儿、绒毛尿囊膜乳剂，按比例加入保护剂，充分混合后滤过，于滤液内按每毫升加入青、链霉素500~1000U，混合后分装冻干。

3.灭活苗

收获鸡胚液经无菌检验及毒价测定合格后，按规定比例加入平衡液，按不同病毒的灭活温度、时间进行灭活，加入相应的佐剂，制备成灭活疫苗，放置4-10C保存。（四）配苗一、病毒性禽胚培养疫苗制造配苗鸡胚选择种毒与毒种继代接毒与收获第7页/共51页第七页，共52页。流程图2——病毒性禽胚疫苗制造工艺流程受精卵禽胚毒株种毒灭活病毒液鉴定培育检验检验配制原料佐剂配苗、乳化灭活疫苗含病毒尿囊液或禽胚组织含病毒悬液配苗活疫苗保护剂分装、冻干分装灭活原料种子扩增收获配制纯化病毒悬液接种第8页/共51页第八页，共52页。示例——甲型H1N1流感疫苗数据来源：北京科兴生物制品有限公司研制情况报告全病毒裂解病毒亚单位减毒活病毒（表面抗原）不同疫苗中流感病毒的形态第9页/共51页第九页，共52页。第10页/共51页第十页，共52页。第11页/共51页第十一页，共52页。第12页/共51页第十二页，共52页。第13页/共51页第十三页，共52页。第14页/共51页第十四页，共52页。第15页/共51页第十五页，共52页。第16页/共51页第十六页，共52页。一支甲型Ｈ１Ｎ１流感疫苗自述——前世：致病流感病毒今生：抗击甲流斗士我是一支甲型Ｈ１Ｎ１流感疫苗。从我开始“孕育”到“出生”再到拿到合法“户口”大概需要４５天的时间，中间要经过各项严格的考验，才能为人类的安全保驾护航———如果把一支甲型Ｈ１Ｎ１流感疫苗想像成一个新生儿，上述这段话就是它的诞生记。８日上午，记者在位于北京市海淀区的北京科兴生物制品有限公司的厂房内，全程观摩了甲型Ｈ１Ｎ１流感疫苗的生产过程。第17页/共51页第十七页，共52页。

我的前世：飘荡千年

我的前世，是一个已经在地球上飘荡了千万年的小小病毒。我是一个直径只有８０－１２０纳米的小小病毒，但是我的祖先经过不断地变异和重组，繁衍成了一个庞大的家族，分成很多的亚型。

２００９年３月开始，我逐渐出现在人类的视野中。科学家们开始将我命名为猪流感，后来又更名为新甲型Ｈ１Ｎ１流感。科学家们把我分离出来后，与一个没有致病性的流感病毒株ＰＲ８放在一起进行繁殖。在这个过程中，我与ＰＲ８不断地重组，科学家从这些重组株中筛选出了一株具有ＰＲ８主体骨架，但同时又有Ｈ１和Ｎ１抗原特性的新毒株。安全性评估结果表明，重组后的我毒性已大大降低，适合用于疫苗的生产。于是我从此与家族决裂，并走上了一条对抗流感病毒之路。第18页/共51页第十八页，共52页。我的今生：与家族决裂

要制备大量的流感疫苗，首先必须繁殖大量的流感病毒。经过近百年的探索，科学家发现我非常适合在鸡胚的尿囊腔中繁殖。

接种机将非常少量的我准确地注入鸡胚的尿囊腔中，然后一车车的鸡胚被放入无菌、恒温的孵化间，我就悄悄地在里头快速繁殖着……三天过后，我已经繁殖出很多很多的病毒了。

此后，大量的我被合并在一起并转移到灭活间，一种特殊的灭活剂被加入到容器中，在不断搅拌的过程中我慢慢失去了知觉，沉沉睡去……大约一周过后，我从噩梦中惊醒，却赫然发现自己已经完全失去了活性，无法使人致病也无法繁殖和生长了！第19页/共51页第十九页，共52页。

在纯化区域的多个小屋子里，我多次穿过一些特殊的筛子、管道，并被放在高速离心机中旋转了很久，我逐渐被浓缩，而那些灭活剂和鸡蛋中的杂质等就被陆续去除掉了。期间工作人员还往我身边加入了一种叫做裂解剂的特殊物质，使我由一个完整的病毒分开成碎片，我身上的核酸和一些可能会引起人体不良反应的大分子蛋白以及裂解剂经进一步的纯化被去除，主要保留了能引起人体免疫反应的表面抗原有效成分和部分的内部抗原蛋白。在除菌过滤过后，我就有了一个新的身份：病毒原液。接下来我被按照一定的比例用注射用水进行稀释，并加入适量的盐分，形成了疫苗半成品第20页/共51页第二十页，共52页。

不过我要变成可以供人类直接使用的疫苗还要经过非常严格的分装和包装程序。由于我比较脆弱，需要在２℃－８℃的温度下避光保存。接下来的两三周时间里，我还要经过两道考核关：生产厂家和中国药品生物制品检定所会随机抽取一部分已经完成全部包装的我再进行严格的体检。通过企业自检和国家复检后，中国药品生物制品检定所才会给每一批疫苗颁发一个合格证书，也就是说只有这个时候我才真正获得了我的合法“户口”，马上就可以投入到抗击流感的战斗中去啦。

第21页/共51页第二十一页，共52页。二、病毒性细胞培养疫苗制造

用于制苗用的种毒应经毒力、最小免疫量、安全性、无菌检定合格，通常为冻干品，由国家指定的苗毒种保藏部门检定分发。领取的种毒应按规定在细胞继代培养适应后用作毒种，制苗用毒种应按规定控制在一定代数以内，或为湿毒毒种，或为冻干毒种。

细胞培养疫苗有细胞培养灭活疫苗和细胞培养活疫苗两类，前者多以强毒毒株培养增殖制造，后者则用弱毒毒株增殖生产，两者的制造程序既有相同之处，又有区别。由于病毒不同与疫苗性质不同，所采用的细胞及细胞培养方法也有所不同（一）种毒与毒种继代接毒与收获种毒与毒种继代配苗细胞制备第22页/共51页第二十二页，共52页。

制造疫苗用的细胞大体为原代细胞和传代细胞两类，根据病毒种类、疫苗性质与工艺流程选择不同的细胞。

选择的依据包括：病毒的适应性高、毒价高、细胞来源方便、制备简单、生命力强。如脊髓灰质炎活疫苗选择vero细胞；狂犬病弱毒细胞适应疫苗采取BHK21细胞增殖病毒猪瘟兔化弱毒牛睾丸细胞疫苗采用犊牛睾丸原代细胞；等。（三）细胞制备接毒与收获种毒与毒种继代配苗细胞制备二、病毒性细胞培养疫苗制造

培养细胞和增殖病毒用的营养液又称培养液，通常分为细胞培养用的生长液和病毒增殖用的维持液，两者不同的之处通常只是生长液内含有5%-10%的血清；维持液血清浓度为2%-5%。不同细胞所需的营养成分和生长条件不尽相同。目前常用的细胞培养方法为静止培养和转瓶培养，至于微载体培养和悬浮培养在我国尚处于试验之中。第23页/共51页第二十三页，共52页。（四）接毒与收获

病毒接种培养有同步与异步之分，前者在细胞分装同时或不久接种毒种，进行培养，如猫、犬传染性肠炎疫苗(细小病毒)；后者在细胞形成单层后接种毒种，如流行性乙型脑炎细胞培养疫苗。通常在细胞形成单层后倾去培养液，按1%-2%量接种毒种，经吸附后加入维持液继续进行培养，待出现70%-85%以上细胞病变时即可收获。病毒培养液收获时间和方法依疫苗性质而定，可将培养瓶冻融数次后收集；或加入EDTA-胰蛋白酶液消化分散收取；或在病毒增殖培养过程中可收获5-7次毒液，细胞毒液经无菌检验、毒价测定合格后供配苗用。

接毒与收获种毒与毒种继代配苗细胞制备二、病毒性细胞培养疫苗制造第24页/共51页第二十四页，共52页。（五）配苗1．灭活疫苗不同灭活剂对不同病毒的作用也不同。向细胞毒液内按规定加入灭活剂，在一定的温度下作用一定的时间，有的灭活剂还需加入阻断剂中止灭活。灭活疫苗配置通常都需加入佐剂，充分混合、分装，制成灭活疫苗。2．冻干苗细胞毒液内按比例加入保护剂或稳定剂，充分混合、分装，进行冷冻真空干燥制成冻于疫苗。

接毒与收获种毒与毒种继代配苗细胞制备二、病毒性细胞培养疫苗制造第25页/共51页第二十五页，共52页。流程图3——病毒性细胞疫苗制造工艺流程动物或胚胎组织毒株种毒灭活病毒消化鉴定培育培养检验检验配制原料佐剂传代细胞配苗（混匀、乳化）灭活疫苗细胞悬液生长细胞配苗活疫苗保护剂原苗分装、冻干分装灭活原料原料细胞培养液配制剪碎种子鉴定扩增收获配制灭菌第26页/共51页第二十六页，共52页。第27页/共51页第二十七页，共52页。三、病毒性动物组织疫苗制造

病毒在易感动物体内可大量增殖，但在各器官组织、部位中增殖病毒的量却有很大的差异，利用病毒增殖迅速、含毒量高的组织制造的疫苗称为组织疫苗(tissuevaccine)。动物组织疫苗包括动物组织灭活疫苗和动物组织弱毒活苗两类，前者多数由强毒株制造，如猪瘟结晶紫疫苗、狂犬病羊脑组织疫苗；后者均以弱毒株生产，如猪瘟兔化弱毒乳兔组织疫苗、牛瘟兔化弱毒组织疫苗等。

动物质量直接影响到组织疫苗的质量，特别是对疫苗的安全性和效力有着决定性的作用，动物必须符合下列标准：

(1)应该是清洁级(二级)以上的等级实验动物，即无规定的人兽共患性病原体动物；

(2)应是对所接种病毒易感性高的动物，即在品种、年龄和体重方面合乎要求的实验动物。（一）动物选择观察与收获动物选择配苗种毒与接种第28页/共51页第二十八页，共52页。

种毒既可用抗原性优良、致死力强的自然毒株脏器组织毒或强毒株增殖培养物，也可用弱毒株组织毒种。无论何种种毒都须经纯粹、抗原性和免疫原性检查合格后使用。接种途径依病毒性质和目的而异，例如猪瘟结晶紫苗，采取猪肌肉注射血液毒种；牛瘟兔化弱毒疫苗，以兔耳静脉注射脾淋毒种；狂犬病疫苗，用兔脑毒种接种绵羊脑内途径感染。几种动物常用的接种途径如下：

1.脑内注射：颅前后中线5mm平行线与瞳孔横线交叉处。

2.静脉注射：家兔由耳静脉注入；鸡自翅下肢静脉注入。

3.肌肉注射：选择腿部、胸部、臀部等肌肉丰满处注射。

4.皮下注射：家兔和豚鼠可选择在腹部或后腿内注射。

5.腹腔注射：家兔与豚鼠可选腹股沟处刺入腹腔。（二）种毒与接种三、病毒性动物组织疫苗制造观察与收获动物选择配苗种毒与接种第29页/共51页第二十九页，共52页。

动物在接种感染后应每天观察和检查规定的各项指标，指标或项目因不同病毒而异。常规观察、检查的项目如食欲、精神和活动状态、体温、粪便、尿和血液变化等。根据观察的征象和检查的结果选出符合要求的发病动物按规定方式剖杀，采取收集含毒量高的器官组织。如猪瘟结晶紫疫苗采取发病猪的血液制备；兔出血症组织灭活疫苗采集病兔肝脏生产；狂犬病疫苗利用发病羊的羊脑组织制造。（三）观察与收获三、病毒性动物组织疫苗制造观察与收获动物选择配苗种毒与接种第30页/共51页第三十页，共52页。1．组织灭活疫苗采取收获的组织经无菌检验及毒价测定合格后，按规定比例加入平衡液和灭活剂（甲醛、酚、结晶紫等）制成匀浆，然后按不同病毒的灭活温度、时间进行灭活。如狂犬病疫苗配制按脑组织1:4加入含有甘油及1%酚蒸馏水，于360.5C灭活7天制成；猪瘟结晶紫疫苗配制，按血毒4份，结晶紫甘油溶液1份混合，于37C~38C灭活6~8天。2.弱毒组织疫苗在无菌操作下剔除脏器上的脂肪与结缔组织等，称重后剪碎，加入适最保护剂制成匀浆，然后滤过扣除残渣量，再按滤液中的实际组织量计算稀释倍数，加入余量保护剂和青链霉素500~1000U(g/ml)，充分摇匀后置0~4C冷暗处处理一定时间后作无菌检验与毒价测定。合格者进行分装，冷冻真空干燥制成冻干疫苗。（四）制苗三、病毒性动物组织疫苗制造观察与收获动物选择配苗种毒与接种第31页/共51页第三十一页，共52页。流程图2——病毒性组织疫苗制造工艺流程动物感染动物毒株种毒灭活病毒液鉴定培育检验检验配制原料佐剂配苗、乳化灭活疫苗含病毒组织含病毒悬液配苗活疫苗保护剂分装、冻干分装灭活原料种子扩增收获配制纯化病毒悬液接种第32页/共51页第三十二页，共52页。项目二细菌性活疫苗制造第33页/共51页第三十三页，共52页。弱毒菌种多系冻干品，由中国药品生物制品检定所或中国兽药监察所传代、鉴定、保存与分发，少数由国家指定单位鉴定、保存与供给。菌种使用前应按规程规定进行复壮、挑选，并作形态、特性、抗原性和免疫原性鉴定，符合标准后方可用于制苗。将检定合格的菌种接种子于规定的培养基，按规定的条件增殖培养，经纯粹检查及有关的检查合格者即可作为种子液。种子液通常在0～4C可保存2个月，在保存期内可作为菌苗生产的批量种子使用。

细菌性活疫苗多指弱毒菌苗，尽管种类与苗型甚多，但基本制造程序相同。（一）菌种与种子二、细菌性活疫苗制造菌种的选择菌液培养浓缩配苗第34页/共51页第三十四页，共52页。按1%～3%量将种子液接种于培养基，然后依不同菌苗要求进行培养。如猪丹毒弱毒菌须在在深层通气培养中加入适当植物油作消泡剂，通入过滤除菌的热空气进行培养制造菌液如人用炭疽活疫苗、卡介苗经固体表面培养完成后须按规定要求将菌苔洗下制成菌液菌液于0～4C暗处保存，待抽样经纯粹、活菌数等检查合格后使用。（二）菌液培养二、细菌性活疫苗制造菌种的选择菌液培养浓缩配苗第35页/共51页第三十五页，共52页。

经检验合格的菌液，按规定比例加入保护剂配苗，充分摇匀后随即进行分装，分装量必须准确。分装好的菌苗迅速送入冻干柜进行预冻、真空干燥，冻于完毕后立即加塞、抽空、封口，移入冷库保存，并由质检部门抽样检验。（四）配苗与冻干

为提高某些弱毒菌苗的免疫效果，可进行浓缩，以提高单位活菌数，常用的依缩方法有吸附剂吸附沉降法、离心沉降法等，如于猪丹毒菌液内加入0.2%～0.25%羧甲基纤维素(CMC)进行浓缩，也可用离心沉淀浓缩。浓缩菌液应抽样作纯粹、活菌数等检查。（三）浓缩二、细菌性活疫苗制造菌种的选择菌液培养浓缩配苗第36页/共51页第三十六页，共52页。流程图1——细菌疫苗制造工艺流程蛋白质、肉浸液等原料培养基细菌分离菌种弱毒菌种配置、灭菌鉴定减毒检验配制灭菌检验配制灭菌原料佐剂灭活菌液配苗、乳化灭活疫苗培养菌苗原液配苗活疫苗保护剂菌液分装、冻干分装灭活原料活化种子第37页/共51页第三十七页，共52页。示例——皮上划痕人用炭疽活菌苗制造

1菌种1.1菌种来源：为无荚膜，水肿型，具有一定残余毒力，免疫原性较好的A16R菌株。由中国药品生物制品检定所分发或经同意。1.2菌种保存：应以冻干法或用50%(ml/ml)甘油保存。每3~5年应全面检定其培养特性、残余毒力、安全性及免疫力，建立种子批。生产前只检查菌形，培养特性及噬菌体特异性。1.3菌种检定1.3.1培养及生化特性在牛肉消化液琼脂或其他适宜固体培养基上生长，菌落为灰白色，不透明，呈卷发状。为革兰氏阳性大杆菌，呈链状排列。无运动力。能够形成芽胞。液体培养呈絮状发育，在血清培养基上不形成荚膜。能发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖，不分解水杨苷。1.3.2残余毒力试验用体重350～400g健康豚鼠5只，各皮下注射0.5亿/ml的牙包悬液1ml。另用体重18～20g小白鼠5只，各皮下注射0.5亿/ml的芽胞悬液0.1ml。观察10天，3只以上动物应出现水肿，可有特异死亡。但脏器涂片只应找到无荚膜的本菌。若全部动物不出现水肿，应重试。重试仍无水肿，菌种不得用于生产。第38页/共51页第三十八页，共52页。1.3.3安全试验

用体重2.0～2.5kg分健康家兔10只，各皮下注射2.5亿/ml的芽胞悬液1ml，观察10天，在注射部位可出现水肿，全部动物应活存。如有死亡，应用同数动物重试，重试仍有死亡，菌种不得用于生产。1.3.4免疫力试验

上述安全试验动物于注射后18～20天，用炭疽毒菌攻击，各皮下注射20个MLD。同时用同体重的健康家兔3只，各皮下注射1个MLD作为对照。观察10天，对照动物死亡3只。试验组保护60%；对照组死亡2只，试验组保护80%为合格。对照动物死亡1只或无死亡，为对照不成立，应重试。第39页/共51页第三十九页，共52页。2制造菌种：接种牛肉消化液琼脂或其他适宜固体培养基，于34℃培育18～20小时，经检查为纯菌者，保存于2～8℃，在2周内供作生产种子用。培养基：用pH7.2～7.4牛肉消化液琼脂或其他培养基。种子：将供制造用菌种，移种于牛肉消化液中。于34℃培育20～24小时，检查其生长特性、菌形及纯度，应符合要求。接种：经检查合格之种子培养物，接种于牛肉消化液琼脂上，置33～34℃培育。成熟的典型芽胞达至80%以上、无杂菌者采集。采集：将培养物刮入50%（ml/ml）甘油蒸馏水原液瓶内，振摇使成均匀悬液。每瓶取样按《生物制品无菌试验规程》进行纯菌试验。合并：将纯菌试验合格之原液进行合并分批，取样做纯菌试验、浓度测定及活菌计数。稀释分装用灭菌的50%甘油蒸馏水将原液稀释成每ml含芽胞40亿个，即为皮上划痕用菌苗。分装按20人份/ml分装。规格为每安瓿1或2ml，抽样进行成品检定。制造菌苗的工作室及设备应当专用，不得与其他细菌工作混用。生产中应严格执行无菌操作第40页/共51页第四十页，共52页。项目二细菌性灭活疫苗制造第41页/共51页第四十一页，共52页。灭活细菌疫苗通用制造程序

菌种的选择菌液培养灭活

配苗浓缩

菌种的选择菌液培养灭活浓缩配苗细菌性灭活疫苗简称灭活菌苗，种类、苗型甚多，但制造的基本程序差别不大。

一、细菌性灭活疫苗制造第42页/共51页第四十二页，共52页。一、细菌性灭活疫苗制造（一）菌种与种子

1.菌种

制苗用菌种多数为毒力强、免疫原性优良的菌株，通常使用1-3个品系，均由中国药品生物制品检定所或中国兽药监察所传代、鉴定、冻干保存和供应。各种用于制造菌苗的菌种应按规定定期复壮，并进行形态、培养特性、菌型、抗原性和免疫原性鉴定，合格菌种准许用于制苗。2.种子培养将经鉴定符合标准的菌种接种于菌苗生产规程中所规定的培养基进行增殖培养，经纯粹检查、活菌计数达到标准后即为种子液，用于菌苗生产。种子液通常保存于2-8C冷暗处，不得超过规程规定的使用期限。菌种的选择菌液培养灭活浓缩配苗第43页/共51页第四十三页，共52页。（二）菌液培养

大量生产的细菌培养方法甚多，既有手工式的，也有机械化或自动化的培养方式。机械化或自动化的培养方式通称为反应缸培养法，可供选择的菌液培养法有：液体静置培养法、液体深层通气培养法、透析培养法及连续培养法等。

菌液培养也可采用固体培养法，该方法易获得高浓度的细菌悬液，易稀释成不同浓度，且含培养基的成分较少，所以比较适用于制备诊断用的抗原。一、细菌性灭活疫苗制造菌种的选择菌液培养灭活浓缩配苗第44页/共51页第四十四页，共52页。（三）灭活

灭活菌苗通常根据细菌的特性加入最有效的灭活剂，采取最适当的灭活条件进行，几种灭活菌苗的灭活方法如表所示。表几种灭活菌苗的灭活方法

一、细菌性灭活疫苗制造菌种的选择菌液培养灭活浓缩配苗第45页/共51页第四十五页，共52页。（四）浓缩

为提高某些灭活菌苗的免疫力，在培养过程中采取提高菌数的基础上，再通过浓缩方法达到目的。常用的浓缩方法：氧化铝胶吸附沉淀法离心沉降法羧甲基纤维沉淀法

以上方法可使菌液浓缩一倍以上。此外，有些细菌在生长过程中产生分子量小的可溶性抗原（如猪丹毒杆菌产生的糖蛋白）也可经氢氧化铝吸附浓缩；将破伤风脱毒液按盐酸—