黄酮类化合物的提取和分离课件

第11章黄酮类化合物(2)Flavonoids----黄酮类的提取和分离1第十一章黄酮类化合物概述1黄酮类化合物的结构和分类2黄酮类化合物的理化性质3黄酮类化合物的提取和分离4黄酮类化合物的检识和结构鉴定52黄酮类化合物的提取和分离原理：黄酮类化合物的溶解性和酸性

相似相溶与酸碱理论提取：苷元：极性小的溶剂，如氯仿、乙醚、乙酸乙酯等回流提取苷及极性大的苷元：

用丙酮、乙酸乙酯、乙醇、甲醇、醇-水加热提取极性稍大的甙元一般指：羟基黄酮、双黄酮、橙酮、查尔酮多糖苷类：一般用沸水提取

提取3黄酮类化合物的提取和分离药材水或醇-水，加热提取提取液浓缩，加3-4倍醇醇水液沉淀（水杂）浓缩，回收醇，加水水液依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取石油醚层氯仿层乙酸乙酯层正丁醇层水层叶绿素等脂溶性成分黄酮苷元大极性苷元小极性的苷黄酮苷多糖蛋白质原理：利用黄酮类与其它杂质极性不同，选不同溶剂进行萃取溶剂萃取法5黄酮类化合物的提取和分离原理：酚羟基与碱成盐，溶于水；加酸后析出碱：常用Ca(OH)2，即石灰乳(石灰水)优点

A：使含酚羟基化合物成盐溶解

B：使含羧基杂质（果胶、粘液质、蛋白质等）形成沉淀注意

a：提取时，碱液浓度不宜过高。

b：加酸酸化时，酸性也不宜过强。应用：芦丁和槲皮素的提取、分离和鉴定碱提酸沉法6黄酮类化合物的提取和分离原理：活性炭吸附黄酮苷类化合物用途：主要用于含量较高的黄酮苷类的精制操作：植物的甲醇提取物中，分次加入活性炭，搅拌，静置，定性检查上清液无黄酮反应时为止。过滤，收集活性炭，依次用沸水、沸甲醇、7%酚/水、

15%酚/醇溶剂进行梯度洗脱，对各部分洗脱液进行定性检查。大部分黄酮苷类可以用7%酚/水洗下。活性炭吸附法7黄酮类化合物的提取和分离硅胶是一种高活性吸附材料，其化学分子式为mSiO2·nH2O

应用范围：主要分离小极性和中等极性的化合物，应用最为广泛。异黄酮、二氢黄酮（醇）、高度甲基化（乙酰化）的黄、酮及黄酮醇多羟基黄酮、黄酮醇及其苷类：硅胶加水去活化吸附规律：

极性大吸附能力强eg：

A苷元B二糖苷C单糖苷

Rf：A>C>B硅胶柱色谱9黄酮类化合物的提取和分离原理：氢键吸附（作用）洗脱规律：（先—后）母核上羟基增加，洗脱顺序递减羟基数目相同时，有缔合羟基>无缔合羟基苷元相同：三糖苷>双糖苷>单糖苷>苷元

不同类型黄酮类化合物的洗脱先后顺序为：

异黄酮＞二氢黄酮醇＞黄酮＞黄酮醇。分子中芳香程度高、共轭双键多，则聚酰胺对其的吸附力强，故难于洗脱。应用范围：适合各种类型的黄酮类化合物，包括苷、苷元、查耳酮及二氢黄酮聚酰胺柱色谱10聚酰胺“双重色谱”原理

正相色谱反相色谱苷与苷元聚酰胺色谱聚酰胺：极性固定相（极性酰胺基团）非极性固定相（非极性脂肪链）洗脱剂：有机溶剂（氯仿-甲醇，极性小）含水溶剂（甲醇-水，极性大）先洗脱：游离黄酮（苷元，极性小）苷（极性大）（柱色谱分离）Rf值：苷元>苷苷元<苷（TLC色谱鉴别）11黄酮类化合物的提取和分离常用型号：Sephadex-G和Sephadex-LH20原理：吸附作用和分子筛对游离黄酮，主要是吸附作用,吸附程度取决于游离酚羟基的数目，苷元的羟基数目越多，越难洗脱。对黄酮苷，主要是分子筛原理,洗脱时按分子量由大到小先后洗脱下来。常用洗脱剂：碱性水溶液（0.1mol/LNH4OH），盐水溶液(0.05mol/LNaCl)

醇及含水醇，如甲醇，甲醇-水，乙醇等。其它溶剂：含水丙酮、甲醇-氯仿(凝胶会膨胀，体积变大)。葡聚糖凝胶柱色谱13黄酮类化合物在Sephadex-LH20(甲醇)上的Ve/Vo黄酮类化合物取代情况Ve/Vo芹菜素5,7,4’－三OH5.3木犀草素5,7,3’,4’－四OH6.3槲皮素3,5,7,3’,4’－五OH8.3杨梅素3,5,7,3’,4’,5’－六OH9.2山奈酚-3-半乳糖鼠李糖-7-鼠李糖苷三糖苷3.3槲皮素-3-芸香糖苷双糖苷4.0槲皮素-3-鼠李糖苷单糖苷4.914黄酮类化合物的提取和分离规律：苷元的羟基数越多，Ve/Vo越大，越难以洗脱。

吸附作用苷的分子量越大,其上联结糖的数目越多,Ve/Vo越小,容易洗脱。

分子筛原理苷比苷元先洗脱。葡聚糖凝胶柱色谱15黄酮类化合物的提取和分离乙醚液（脂杂）乙醚液乙醚液乙醚液乙醚液碱液(3或5-OH黄酮)碱液(一般酚OH黄酮)碱液(7,4’-二OH黄酮)碱液(7或4’-OH黄酮)5%NaHCO35%Na2CO30.2%NaOH4%NaOH梯度pH萃取法17黄酮类化合物的提取和分离原理：利用分子中某些特定官能团性质进行分离具有邻二酚羟基的成分，用醋酸铅沉淀不具有邻二酚羟基的成分，用碱式醋酸铅沉淀

具有邻二酚羟基的黄酮类化合物还可以与硼酸反应形成溶于水的硼酸络合物，可以与不具有邻二酚羟基的其它黄酮类化合物分离金属盐络合法18从柠檬果皮中分离