微生物的营养及消毒灭菌

微生物的营养及消毒灭菌第一页，共九十一页，2022年，8月28日一、微生物的营养要素二、培养基的配制三、消毒与灭菌四、防腐剂及消毒效力测定第二页，共九十一页，2022年，8月28日（一）微生物细胞的化学组成（二）微生物营养类型（三）微生物的营养要素及生理功能（四）营养物质进入细胞方式一、微生物的营养要素第三页，共九十一页，2022年，8月28日1.化学元素:大量元素：碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、镁、钙、铁（其中前六种占细菌细胞干重的97%）。微量元素:锌、锰、钠、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼。元素细菌酵母菌霉菌碳5049.847.9

氮1512.45.2

氢86.76.7

氧2031.140.2

磷3—

—

硫1—

—（一）微生物细胞的化学组成第四页，共九十一页，2022年，8月28日主要以水、有机物、无机盐的形式存在于细胞中：（1）有机物：蛋白质、糖、脂类、核酸、维生素及其降解产物（2）无机物：1)参与有机物组成。

2)单独存在于细胞质内以无机盐的形式存在。（3）水：约占细胞总重70%～90%，以游离水和结合水两种形式存在游离水：干重法可测得；结合水：不易蒸发、不冻结、也不能渗透,占水总量的17%—28%。2.元素在细胞内存在形式：第五页，共九十一页，2022年，8月28日由于微生物种类繁多，其营养类型比较复杂，根据碳源、能源及电子供体性质的不同，可将绝大部分微生物分为四种类型：1.光能无机自养型2.化能无机自养型3.光能有机异养型4.化能有机异养型（二）微生物的营养类型第六页，共九十一页，2022年，8月28日1.光能无机自养型以C02作为唯一碳源或主要碳源，并利用光能，以无机物如硫化氢、硫代硫酸钠或其他无机硫化物作为供氢体将CO2还原成细胞物质，同时产生元素硫

光能

CO2＋H2S[CH2O]+2S+H2O

光合色素

光能无机型微生物

:

包括蓝细菌（含叶绿素）、红硫细菌和绿硫细菌等少数微生物（含细菌叶绿素），由于含有光合色素，因而能使先能转变成化学能（ATP），供机体直接利用。第七页，共九十一页，2022年，8月28日2.化能无机自养型

以CO2或碳酸盐作为唯一或主要碳源，以无机物氧化释放的化学能为能源,，利用电子供体如氢气、硫化氢、二价铁离子或亚硝酸盐等使CO2还原成细胞物质。

这类微生物主要有硫化细菌、硝化细菌、氢细菌与铁细菌。它们在自然界物质转换过程中起着重要的作用。第八页，共九十一页，2022年，8月28日3.光能有机异养型以CO2为主要碳源或唯一碳源，以有机物（如异丙醇）作为供氢体，利用光能将CO2还原成细胞物质，红螺菌属中的一些细菌属于此种营养类型。

光能

2(H3C)2CHOH+CO22CH3COCH3+[CH2O]+H2O

光合色素光能异养型细菌在生长时大多数采要外源的生长因子第九页，共九十一页，2022年，8月28日4.化能有机异养型多数微生物属于化能异养型，其生长所需要能量和碳源通常来自同一种有机物。根据化能异养型微生物利用有机物的特性，又可以将其分为下列两种类型：腐生型微生物：利用无生命活性的有机物作为生长的碳源。寄生型微生物：寄生在生活的细胞内，从寄生体内获得生长所需要的营养物质。存在于寄生与腐生之间的中间过渡类型微生物，称为兼性腐生型或兼性寄生型。第十页，共九十一页，2022年，8月28日碳源 氮源 能源无机盐生长因子 水（三）微生物的营养要素及其生理功能第十一页，共九十一页，2022年，8月28日◆定义：凡可被用来构成细胞物质或代谢产物中碳素来源的营养物质。◆功能：提供合成细胞物质及代谢物的原料;并为整个生理活动提供所需要能源（异养微生物）。◆种类:无机含碳化合物：如CO2和碳酸盐等。有机含碳化合物：糖与糖的衍生物（多糖：如淀粉、麸皮、米糠等；饴糖；单糖）,脂类、醇类。有机酸、烃类、芳香族化合物以及各种含碳的化合物。1.碳源第十二页，共九十一页，2022年，8月28日类型元素水平化合物水平培养基原料水平有机碳C·H·O·N·X复杂蛋白质、核酸等牛肉膏、蛋白胨、花生饼粉等C·H·O·N多数氨基酸、简单蛋白质等一般氨基酸、明胶等C·H·O糖、有机酸、醇、脂类等葡萄糖、蔗糖、各种淀粉、糖蜜等C·H烃类天然气、石油及其不同馏份、石蜡油等无机碳C(?)——C·OCO2CO2C·O·XNaHCO3NaHCO3、CaCO3、等微生物的碳源谱第十三页，共九十一页，2022年，8月28日传统种类：糖类（单糖，饴糖） 淀粉（玉米粉、山芋粉、野生植物淀粉等） 麸皮、各种米糠等代粮发酵：纤维素、石油、CO2、H2异养微生物：必须利用有机碳源的微生物自养微生物：利用无机碳源作为主要碳源的微生物微生物工业发酵中用做碳源的原料第十四页，共九十一页，2022年，8月28日用来构成菌体物质或代谢产物中氮素来源的营养源。种类：无机氮：铵盐、硝酸盐、亚硝酸盐、尿素、氨、N2

有机氮：蛋白质及其降解产物（如胨、肽、氨基酸等）、牛肉膏、鱼粉、花生饼粉、黄豆饼粉、玉米浆等功能：

1）提供合成细胞中含氮物，如蛋白质、核酸，以及含氮代谢物等的原料；2）少数细菌可以铵盐、硝酸盐等氮源为能源。2.氮源第十五页，共九十一页，2022年，8月28日类型元素水平化合物水平培养基原料水平有机氮N·C·H·O·X复杂蛋白质、核酸等牛肉膏、酵母膏、饼粕粉、蚕蛹粉等N·C·H·O尿素、一般氨基酸、简单蛋白质等尿素、蛋白胨、明胶等无机氮N·HNH3、铵盐等(NH4)2SO4等N·O硝酸盐等KNO3等NN2空气微生物的氮源谱

第十六页，共九十一页，2022年，8月28日

实验室常用的氮源有碳酸铵、硝酸盐、硫酸铵、尿素、蛋白胨、牛肉膏、酵母膏等。生产上常用的氮源硝酸盐、铵盐、尿素、氨以及蛋白含量较高的鱼粉、蚕蛹粉、黄豆饼粉、花生饼份、玉米浆等。第十七页，共九十一页，2022年，8月28日能源谱：化学物质（化能营养型）辐射能（光能营养型）有机物无机物光能自养和光能异养3.能源定义：为微生物提供最初能量来源的营养物质或辐射能第十八页，共九十一页，2022年，8月28日定义：为微生物细胞生长提供碳、氮源以外的多种重要元素（包括大量元素和微量元素）的物质，多以无机盐的形式供给。大量元素：P、S、K、Mg、Ca、Na、Fe（微生物生长所需浓度在10-3~10-4mol/L）微量元素：Cu、Zn、Mn、Mo、Co（微生物生长所需浓度在10-6~10-8mol/L）一般微生物生长所需要的无机盐有：硫酸盐、磷酸盐、氯化物以及含有钠、钾、镁、铁等金属元素的化合物。4.无机盐第十九页，共九十一页，2022年，8月28日无机盐大量元素微量元素一般功能特殊功能酶的激活剂（Cu2+、Mn2+、Zn2+）特殊分子结构成分（Co、Mo等） 维持渗透压生理调节物质 酶的激活剂

pH的稳定化能自养菌的能源(S、Fe2+、NH4+、NO2-)无氧呼吸时的氢受体(NO3-、SO42-)细胞内一般分子成分(如P，S，Ca，Mg，Fe等)无机盐的生理功能：第二十页，共九十一页，2022年，8月28日定义:是一类对微生物正常生活所不可缺少而需要量又不大，但微生物自身不能用简单的碳源或氮源合成，或合成量不足以满足机体生长需要的有机营养物质。不同微生物需求的生长因子的种类和数量不同。5.生长因子生长因子主要类型：（1）维生素、（2）氨基酸（3）嘌呤与嘧啶第二十一页，共九十一页，2022年，8月28日水的生理功能：生命存在的必要条件◆水在细胞中有两种存在形式：结合水和游离水。◆不同细胞及不同细胞结构中游离水的含量有较大差别：几种生物的游离水含量人体：~60%海蛰：~96%微生物孢子营养体霉菌孢子：~39%细菌芽孢：皮层：~70%核心：极低细菌：~80%酵母：~75%霉菌：~85%6.水第二十二页，共九十一页，2022年，8月28日单纯扩散促进扩散主动运输基团移位（四）微生物吸收营养物质的方式第二十三页，共九十一页，2022年，8月28日被输送的物质，靠细胞内外浓度为动力，以透析或扩散的形式从高浓度区向低浓度区的扩散。1.单纯扩散特点：非特异性结构不变速率较慢无载体参与不需代谢能：物质不能进行逆浓度运输。可运送的养料有限：限于水、溶于水的气体，及分子量小，脂溶性、极性小的营养物质。第二十四页，共九十一页，2022年，8月28日单纯扩散模式图细胞膜外细胞膜内细胞膜第二十五页，共九十一页，2022年，8月28日营养物通过与细胞膜上载体蛋白（也称作透过酶）的可逆性结合来加快其传递速度2.促进扩散特点：在促进扩散过程中营养物质本身在分子结构上也不会发生变化不消耗代谢能量，故不能进行逆浓度运输运输的速率由胞内外该物质的浓度差决定需要细胞膜上的载体蛋白（透过酶）参与被运输的物质与载体蛋白有高度的特异性养料浓度过高时,与载体蛋白出现饱和效应促进扩散的运输方式多见于真核微生物中，例如通常在厌氧生活的酵母菌中，某些物质的吸收和代谢产物的分泌是通过这种方式完成的。第二十六页，共九十一页，2022年，8月28日促进扩散模式图细胞膜细胞膜外细胞膜内恢复原构象移位再循环结合结合构象改变第二十七页，共九十一页，2022年，8月28日在代谢能的推动下，通过膜上特殊载体蛋白逆养料浓度梯度吸收营养物质的过程。主动运送是微生物吸收营养物质的主要方式。3.主动运输需要消耗代谢能可以进行逆浓度运送的运输方式需要载体蛋白参与对被运送的物质有高度的立体专一性特点：微生物所需要的多数营养物质如氨基酸等都是这种运送方式第二十八页，共九十一页，2022年，8月28日主动运送模式图细胞膜细胞膜外细胞膜内恢复原构象移位再循环结合构象改变ADP+PiATP第二十九页，共九十一页，2022年，8月28日4.基团移位一种由复杂运输酶系统参与的既需要载体蛋白又需要消耗能量的一种特殊主动运送方式需要消耗代谢能可以进行逆浓度运输的运输方式需要载体蛋白参与对被运输的物质有高度的立体专一性底物在运送过程中发生化学变化与普通的主动运送相比，营养物质在运输的过程中发生了化学变化（糖在运输的过程中发生了磷酸化）特点：第三十页，共九十一页，2022年，8月28日基因移位主要存在于厌氧和兼性厌氧型细菌中，也主要是用于单（或双）糖与糖的衍生物，以及核苷与脂肪散的运送第三十一页，共九十一页，2022年，8月28日依靠磷酸转移酶系统,即磷酸烯醇式丙酮酸-己糖磷酸转移酶系统。包括3种不同蛋白参与：HPr、酶Ⅰ、酶Ⅱ运送步骤:1.热稳载体蛋白(HPr)的激活细胞内高能化合物磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）的磷酸基团把HPr激活。酶Ⅰ

PEP+HPr丙酮酸+P-HPrHPr是一种低分子量的可溶性蛋白，结合在细胞膜上，具有高能磷酸载体的作用。运送机制第三十二页，共九十一页，2022年，8月28日2、糖被磷酸化后运入膜内膜外环境中的糖先与外膜表面的酶Ⅱ结合，再被转运到内膜表面。这时，糖被P-HPr上的磷酸激活，并通过酶Ⅱ的作用将糖-磷酸释放到细胞内。酶Ⅱ

P-HPr+糖糖-P+HPr酶Ⅱ是一种结合于细胞膜上的蛋白，它对底物具有特异性选择作用，因此细胞膜上可诱导出一系列与底物分子相应的酶Ⅱ。第三十三页，共九十一页，2022年，8月28日比较项目单纯扩散促进扩散主动运送基团移位特异载体蛋白运输速度物质运输方向胞内外浓度运输分子能量消耗运输后物质的结构载体饱和效应与运输物质类似物例如无慢由浓至稀相等无特异性不需要不变无无竞争性水、氧、乙醇等小分子有快由浓至稀相等特异性不需要不变有有竞争性硫酸基团磷酸基团有快由稀至浓胞内浓度高特异性需要不变有有竞争性氨基酸、乳糖有快由稀至浓胞内浓度高有特异性需要改变有有竞争性葡萄糖、果糖、脂肪酸四种运输营养物质方式的比较第三十四页，共九十一页，2022年，8月28日培养基定义：人工配制的、适合于不同微生物生长繁殖或积累代谢产物用的混合养料。特点：任何培养基都应具备微生物所需要的五大营养要素，且应比例适当。所以一旦配成必须立即灭菌。用途：促使微生物生长；积累代谢产物；分离微生物菌种；鉴定微生物种类；微生物细胞计数；菌种保藏；制备微生物制品二、培养基的配制第三十五页，共九十一页，2022年，8月28日（一）培养基的类型及其应用第三十六页，共九十一页，2022年，8月28日1.根据对培养基成分的了解程度分

（1）天然培养基：利用化学成分还不完全清楚或不恒定的天然物质，（如肉汤、蛋白胨、麦芽汁、酵母汁、豆芽汁、玉米粉、牛奶、血清等制成的培养基），天然培养基比较经济，除实验室经常使用外，更适宜于在生产上用来大规模地培养微生物和生产微生物产品。（2）合成培养基：由化学成分完全了解的物质配制而成的培养基，该类培养基的组成成分精确、清楚，重复性强，但微生物生长较慢，且价格昂贵，故一般适于在实验室范围内他有关研生物营养需要、代谢、分类鉴定、生物测定以及菌种选育、遗传分析等方面的研究工作。如高氏培养基、察氏培养基等.

（3）半合成培养基：在合成培养基的基础上添加些天然成份，以更有效地满足微生物对营养物的需要.如PDA第三十七页，共九十一页，2022年，8月28日2.根据培养基的物理状态分（1）固体培养基：天然固体营养基质制成的培养基，或液体培养基中加入一定量凝固剂（琼脂)而呈固体状态的培养基。常用于微生物的分离、纯化、计数等方面的研究。有斜面、平板等形式。（2）半固体培养基：在液体培养基中加入％的琼脂构成的培养基。常用来观察细菌运动的特征及噬菌体效价滴定等实验。（3）液体培养基：不含任何凝固剂，菌体与培养基充分接触，常用于大规模的工业生产以及在实验室进行微生物生理代谢等研究工作。第三十八页，共九十一页，2022年，8月28日3.按用途划分（1）基础培养基:含一般微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基（2）加富培养基：在基础培养基中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基，这些特殊营养物质包括血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等。加富培养基主要用于培养某种或某类营养要求苛刻的异养型微生物，如培养百日咳博德氏菌需要含有血液的加富培养基。

（3）鉴别性培养基：用于鉴别不同类型微生物的培养基，常在普通培养基中加入能与某种代谢产物发生反应的指示剂或化学药品，从而产生某种明显的特征性变化，以区别不同的微生物，例：伊红美兰乳糖培养基（3）选择性培养基：根据某种或某一类群微生物的特殊营养需要，或对某种化合物的敏感性不同而设计出来的一类培养基。利用这种培养基可用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来.第三十九页，共九十一页，2022年，8月28日（二）培养基的制备1.培养基的制备过程一般配制培养基的步骤：称取药品→溶解→（加琼脂熔化）→调pH值→过滤分装→包扎标记→消毒或灭菌→摆斜面或倒平板等。第四十页，共九十一页，2022年，8月28日2．配制培养基的原则（1）选择适宜的营养物质（2）营养物质浓度及配比合适（3）物理化学条件适宜（4）经济节约（5）灭菌处理第四十一页，共九十一页，2022年，8月28日细菌：牛肉膏蛋白胨培养基

LB(Luria-Bertani)放线菌：高氏一号培养基真菌：查氏合成培养基

PDA(Potato-Dextrose-Agar)酵母菌；麦芽汁①培养基组分应适合微生物的营养特点即根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。不同营养类型的微生物，其对营养物的需求差异很大。如自养型微生物的培养基由简单的无机物质组成。异养做生物的培养基至少需要含有一种有机物质，有机物的种类需适应所培养菌的特点。按微生物的主要类群来说，它们所需要的培养基成分也不同：培养基制备需要注意：第四十二页，共九十一页，2022年，8月28日●浓度过高——微生物的生长起抑制作用，浓度过小——不能满足微生物生长的需要。●碳氮比（C/N）直接影响微生物生长与繁殖及代谢物的形成与积累，故常作为考察培养基组成时的一个重要指标；

●速效性氮（或碳）源与迟效性氮（或碳）源的比例

●各种金属离子间的比例碳源中的碳原子的mol数氮源中所含的氮原子的mol数C/N比值=②营养物的浓度与比例应恰当第四十三页，共九十一页，2022年，8月28日

◆pH:

各类微生物的最适生长pH值各不相同：细菌：7.0~8.0

放线菌：7.5~8.5

酵母菌：3.8~6.0

霉菌：4.0~5.8

在微生物的生长和代谢过程中，由于营养物质的利用和代谢产物的形成与积累，培养基的初始pH值会发生改变，为了维持培养基pH值的相对恒定，通常采用下列两种方式：内源调节：在培养基里加一些缓冲剂或不溶性的碳酸盐；调节培养基的碳氮比。外源调节：按实际需要不断向发酵液流加酸或碱液③物理化学条件适宜－pH、渗透压、水活度及氧化还原势等第四十四页，共九十一页，2022年，8月28日各种微生物对培养基的氧化还原电势的要求：好氧微生物：+0.3~+0.4V,(在>0.1V以上的环境中均能生长).厌氧微生物：只能在+0.1V以下生长兼性厌氧微生物：+0.1V以上呼吸、+0.1V以下发酵对微生物影响最大的是：分子氧和分子氢的浓度尤其是对厌氧微生物，除排除氧外，还应在培养基中加入还原剂：巯基乙酸、抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等。◆氧化还原电势第四十五页，共九十一页，2022年，8月28日该培养基的应用目的，即：是培养菌体还是积累代谢产物？是实验室种子培养还是大规模发酵？代谢产物是初级代谢产物还是次级代谢产物？☆用于培养菌体的培养基营养应丰富，氮源含量宜高（碳氮比低）；☆用于大量生产代谢产物的培养基其氮源一般应比种子培养基稍低；若代谢产物是次级代谢产物时要考虑是否加入特殊元素或特定的代谢产物；☆当所设计的是大规模发酵用的培养基时，应重视培养基中各成份的来源和价格，应选择来源广泛、价格低廉的原料，提倡以粗代精，以废代好。④根据培养基的应用目的选择原料及其来源第四十六页，共九十一页，2022年，8月28日1.高压蒸气灭菌一般培养基:

1.05Kg/cm2,121.3℃,15-30min

含糖培养基:

0.56Kg/cm2,112.6℃,15-30min

2.过滤灭菌、分别灭菌、间歇灭菌附：培养基的灭菌第四十七页，共九十一页，2022年，8月28日器皿的灭菌：

干热空气：160℃，2小时无菌室的消毒：

紫外光化学药物熏蒸（苯酚；高锰酸钾+甲醛）附：器皿的灭菌及无菌室的消毒第四十八页，共九十一页，2022年，8月28日三、消毒与灭菌（一）基本概念（二）物理消毒灭菌法（三）化学消毒灭菌法第四十九页，共九十一页，2022年，8月28日抑菌（防腐）：抑制体内或体外细菌的生长繁殖。常用的抑菌剂为各种抗生素。消毒：杀死物体上病原微生物的方法，并不一定能杀死含芽胞的细菌或非病原微生物。杀菌：杀灭物体上所有微生物的方法。灭菌比消毒要求高，包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物和非病原微生物。化疗：是指利用某些具有选择毒性的化学药物或抗生素对生物体的深部感染进行治疗，可以有效地消除宿主体内的病原体。（一）基本概念第五十页，共九十一页，2022年，8月28日（二）、物理消毒灭菌法1、干热灭菌法2、湿热灭菌法3、滤过除菌法4、辐射灭菌法第五十一页，共九十一页，2022年，8月28日1、干热灭菌法（1）灼烧法（2）烘箱热空气法第五十二页，共九十一页，2022年，8月28日（1）灼烧法这是最简单、最彻底的干热灭菌方法，它将被灭菌物品放在火焰中灼烧，使所有的生物质碳化。接种针、勺、试管或三角瓶口和棉塞的灭菌。第五十三页，共九十一页，2022年，8月28日（2）烘箱热空气法将物品放入烘箱内，然后升温至150~170℃，维持1~2小时。一般的营养体在100℃，维持1小时即会死亡，芽孢在160℃，维持2小时才会全部死亡。所以，经过烘箱热空气法可以达到彻底灭菌的目的。该法适用于玻璃、陶瓷和金属物品的灭菌。第五十四页，共九十一页，2022年，8月28日2、湿热灭菌法（1）巴氏消毒法（2）煮沸消毒法（3）间歇灭菌法（4）连续灭菌法（5）高压蒸汽灭菌法第五十五页，共九十一页，2022年，8月28日（1）巴氏消毒法61.1～62.8℃30min71.7℃

15～30秒杀死液体中的病原菌或某些特定微生物消毒牛奶、酒类等食品第五十六页，共九十一页，2022年，8月28日（2）煮沸消毒法煮沸100℃经5min可杀死一切细菌的繁殖体，一般消毒以煮沸10min为宜芽胞需1-2小时才能杀死用于一般外科器械、胶管和注射器、饮水和食具的消毒第五十七页，共九十一页，2022年，8月28日（3）间歇灭菌法利用蒸汽反复几次进行灭菌。100℃，维持30~60分钟，以杀死微生物的营养体，冷却后，于37℃培养一天，次日同法灭菌，如此反复3次，即可达到灭菌的目的。主要应用于一些不宜于高压灭菌的培养基，如糖类、明胶、牛奶等的灭菌。第五十八页，共九十一页，2022年，8月28日（4）连续灭菌法100℃，处理8小时，达到杀灭微生物及芽孢的目的。第五十九页，共九十一页，2022年，8月28日（5）高压蒸汽灭菌法压力：1.05kg/cm2温度：121.3℃时间：15～30min效果：杀死一切微生物，包括芽胞耐高热、不怕潮湿的物品第六十页，共九十一页，2022年，8月28日3、滤过除菌主要用于一些不耐热的血清、毒素、抗生素、药液以及空气等除菌。不能除去病毒、支原体和Ｌ型细菌常用的除菌滤器蔡氏滤器玻璃滤器薄膜滤器第六十一页，共九十一页，2022年，8月28日4、辐射灭菌法(1)紫外线灭菌

(2)射线灭菌(3)微波灭菌法第六十二页，共九十一页，2022年，8月28日（1）紫外线灭菌日光和紫外线杀菌波长：240～300nm，最适：260~266nm杀菌机制：紫外线能干扰DNA的复制，导致细菌死亡或变异。用于物体表面和空气消毒第六十三页，共九十一页，2022年，8月28日（2）射线灭菌γ射线、高能量的电子束（阴极射线）不升高温度且穿透力强适于忌热物品的灭菌或消毒第六十四页，共九十一页，2022年，8月28日(3)微波灭菌法频率在300兆赫到300千兆赫之间的电磁波可穿透介质较深，表里一致地均匀加热常用于消毒、灭菌包装好的物品第六十五页，共九十一页，2022年，8月28日

1、常用消毒剂的杀菌机制（1）使菌体蛋白变性或凝固（2）干扰微生物酶系统和影响其代谢（3）损伤细胞膜，提高其通透性(三)灭菌和消毒的化学方法第六十六页，共九十一页，2022年，8月28日酚类作用机制常用消毒剂用途蛋白质变性损伤细胞膜灭活酶类

3%—5%石炭酸

2%来苏

0.01%—0.05%洗必泰地面、器具表面消毒;皮肤消毒术前洗手2、常用消毒剂的种类、作用机制与用途第六十七页，共九十一页，2022年，8月28日醇类作用机制常用消毒剂用途蛋白质变性凝固干扰细胞代谢

70%—75%乙醇

50%—70%异丙醇皮肤消毒体温计消毒第六十八页，共九十一页，2022年，8月28日重金属盐类作用机制常用消毒剂用途氧化作用蛋白质变性凝固灭活酶类0.05%—0.1%升汞2%红汞0.1%硫柳汞1%硝酸银1%—5%蛋白银非金属器皿的消毒皮肤、粘膜、小创伤消毒皮肤消毒、手术部位消毒新生儿滴眼，预防淋球菌感染第六十九页，共九十一页，2022年，8月28日作用机制常用消毒剂用途氧化作用蛋白质沉淀0.1%高锰酸钾3%过氧化氢0.2%过氧乙酸2%碘伏0.5ppm氯10%—20%漂白粉皮肤、尿道消毒、水果消毒创口、皮肤、粘膜消毒器材消毒皮肤消毒饮用水消毒地面、厕所、排泄物消毒氧化剂第七十页，共九十一页，2022年，8月28日表面活性剂作用机制常用消毒剂用途损伤细胞膜灭活酶类蛋白质沉淀0.1%新洁尔灭0.1%杜灭芬外科手术洗手，皮肤粘膜消毒，浸泡手术器械皮肤创伤冲洗，金属器械、棉织品、塑料、橡皮类消毒第七十一页，共九十一页，2022年，8月28日烷化剂作用机制常用消毒剂用途菌体蛋白、核酸烷基化10%甲醛0.05%环氧乙烷2%戊二醛浸泡消毒，空气消毒手术器械、敷料消毒精密仪器、内窥镜消毒第七十二页，共九十一页，2022年，8月28日染料作用机制常用消毒剂用途对核酸有亲和力，影响繁殖以及干扰氧化过程2%龙胆紫浅表创伤消毒第七十三页，共九十一页，2022年，8月28日酸碱类作用机制常用消毒剂用途破化细胞膜、细胞壁和凝固蛋白醋酸熏蒸1:4生石灰空气消毒地面、排泄物消毒第七十四页，共九十一页，2022年，8月28日四、防腐剂及消毒剂效力测定（一）防腐剂的效力测定（二）消毒剂的效力测定第七十五页，共九十一页，2022年，8月28日（一）防腐剂的效力测定1．常用防腐剂种类⑴醇类：如苯甲醇、苯乙醇、苯氧乙醇等⑵酚类：如苯酚、甲酚、氯甲酚等⑶尼泊金类；如对羟基苯甲酸酯类，常用的有甲、乙、丙三种酯类。⑷有机酸：如苯甲酸、山梨酸、水杨酸等。⑸季铵盐类表面活性剂：如苯扎氯铵、苯扎溴铵等。⑹芳香油：如紫苏醛、桂皮醛等。(7)汞化合物：如氧氰化汞、苯汞盐、硫柳汞等(8)其他：如洗必泰及氯仿等。第七十六页，共九十一页，2022年，8月28日2．防腐剂效力的影响因素（1）防腐剂的溶解性和饱和度的影响（2）介质酸碱度的影响（3）添加剂的影响（4）微生物特性的影响第七十七页，共九十一页，2022年，8月28日3．防腐剂效力测定法（1）试验用的菌种和菌液①试验用的菌种常用于防腐剂效力测定的菌种有：黑曲霉、白色念珠菌、铜绿假单胞菌、金黄色葡萄球菌及大肠埃希菌等。第七十八页，共九十一页，2022年，8月28日②试验菌种的菌液制备选用纯菌种作为试验用菌株细菌：大豆酪胨斜面培养基，30~35℃，18~24h；霉菌:沙氏琼脂斜面培养基,20~25℃,7天；白色念珠菌:沙氏琼脂斜面培养基,20~25℃,48h。第七十九页，共九十一页，2022年，8月28日（2）培养基应选择最适于各试验菌株生长繁殖的培养基。如对细菌一般可用大豆酪胨消化物琼脂培养基(USP23)、营养琼脂培养基；对酵母菌和霉菌可用沙氏葡萄糖琼脂培养基(BP1998)、改良马丁培养基第八十页，共九十一页，2022年，8月28日（3）测定方法①取样：样品供试液20ml(g)5份，加入0.10ml试验菌液，使供试液染菌量最终浓度CFU／ml(g)②分别在