微肠杆菌科,弧菌,螺旋菌属课件

第九章

肠杆菌科概述粪口途径传播的细菌粪便污染水、食物、手和器皿等引起感染肠杆菌科也包括：弧菌属、弯曲菌属及幽门螺杆菌肠杆菌科通过粪-口途径传播的（常寄局于肠道）一大群生物学性状相似的革兰阴性杆菌

包括：

致病菌：伤寒沙门菌、志贺菌

机会致病菌：大肠杆菌

带有致病基因的大肠杆菌：致病性大肠杆菌1.形态结构相似

中等大小G-杆菌无芽孢有菌毛、大多数有鞭毛少数有荚膜

生化反应：

常用SS培养基（选择培养基）分离细菌

乳糖发酵试验SS培养基

非致病菌(大肠）

+

红色大菌落(分解乳糖)

致病菌(伤寒、痢疾）

-

无色透明小菌落(不分解乳糖)乳糖发酵试验：初步鉴别肠道致病菌和肠道非致病菌Ｏ抗原：耐热性菌体抗原；细胞壁脂多糖，稳定，属特异性，刺激机体产生IgM抗体Ｈ抗原：鞭毛蛋白，不耐热，失去后运动消失，刺激机体产生IgG抗体荚膜抗原（Ｋ抗原）：多糖类物质，位于Ｏ抗原外围。

抗原结构复杂易变异溶原性转换生化反应变异通过引起耐药性变异毒力变异转导接合H-O抗原及S-R菌落变异等第一节埃希菌属有6个种，其中大肠埃希菌（E.coli）最常见，重要的一个菌种肠道中重要的正常菌群，出生后数小时就进入肠道，终生伴随，为宿主提供具有营养作用的合成代谢产物免疫力下降或侵入到肠道外组织器官，成为条件致病菌，引起肠道外感染有一些血清型大肠埃希菌具有致病性作为水源、食物粪便污染的指标培养特性与生化反应营养要求不高，普通平板，灰白色、圆形、光滑、中等大小的菌落；液体培养呈浑浊生长生化反应活波，IMViC实验结果＋、＋、－、－发酵葡萄糖等，产酸产气分解乳糖、硫化氢阴性、动力阳性，可与沙门菌、志贺菌区别主要有O、H、K抗原，血清型分型的基础Ｏ抗原血清学分型超过170种Ｈ抗原鞭毛抗原56种Ｋ抗原Ｏ抗原外层菌毛抗原／荚膜抗原

100种以上抗原结构抵抗力对热抵抗力比其他肠道杆菌强，水中存活较久。肠道外感染：化脓性感染和泌尿道感染最常见，属于内源性感染（1）泌尿道感染（2）败血症（3）新生儿脑膜炎胃肠炎：某些致病性血清型菌株引起，属外源性感染，食入污染的食物和水，主要有五种类型２、所致疾病：肠道感染

1）肠产毒型大肠杆菌（ETEC）

2）肠致病型大肠杆菌（EPEC）

3）肠侵袭型大肠杆菌（EIEC）

4）肠出血型大肠杆菌（EHEC）

5）肠聚集型大肠杆菌（EAEC）五种引起胃肠炎的大肠埃希菌1、肠产毒性大肠杆菌(enterotoxigenicE.coli,ETEC)

婴幼儿和旅游者腹泻的主要病原菌，症状从轻度腹泻到严重霍乱样腹泻致病物质肠毒素：不耐热肠毒素(LT)LT-Ⅰ主要致病物质耐热肠毒素(ST)STa致病定植因子(菌毛）：黏附作用，失去定植因子的菌株不引起腹泻3.肠致病型大肠埃希菌(enteropathogenicE.coli,EPEC)婴幼儿腹泻的主要病原菌致病机理不产生毒素，靠粘附于微绒毛，大量繁殖破坏肠粘膜微绒毛(A/E组织病理损伤)黏膜上皮细胞结构和功能受损，导致腹泻4、肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagicE.coli,EHEC)出血性结肠炎和溶血性尿毒综合征的病原污染食品是EHEC感染的重要传染源，如牛肉致病物质是菌毛和毒素毒素---细胞毒，破坏肠绒毛选择性破坏肾小球内皮细胞---急性肾衰临床表现:轻重不一10%为十岁以下患儿，有严重并发症(急性肾衰竭)，死亡率高重要血清型：O157：H75、肠集聚型大肠杆菌(enteroaggregativeE.coli,EAEC)引起婴儿和旅行者持续性腹泻、脱水、偶有血便致病物质：质粒编码的蛋白致病机制：介导细菌聚集性黏附于肠粘膜细胞，阻止液体的重吸收，导致腹泻在环境和食品卫生学上，常被用作粪便污染的检测指标≤3个大肠菌群/1L饮水≤5个大肠菌群/100ml瓶装汽水、果汁卫生学指标大肠菌群数我国的卫生标准：防治治疗：早期纠正体液平衡，抗生素治疗预防：防止粪便污染切断粪-口传播途径疫苗：ETEC（肠产毒型E.coli)的菌毛抗原是关键抗原，动物实验已获成功另：合成ST与LT非毒性Ｂ亚单位，疫苗正在研制中动力实验抗原与分类：有K、O抗原，无H抗原根据O抗原分类菌种群型亚型痢疾志贺菌A1－10福氏志贺菌B1－6，X，Y变种鲍氏志贺菌C1－18宋内志贺菌D1致病性

侵袭力：菌毛—粘附肠粘膜M细胞，波及临近细胞，生长繁殖---细胞坏死—脓血便加重局部和全身症状外毒素细胞毒，与内毒素协同作用致病物质内毒素作用于肠壁通透性增加粘膜炎症溃疡肠壁植物神经内毒素血症脓血便腹痛腹泻、里急后重所致疾病

特点：病灶局限于结肠粘膜，一般不入血病后免疫期短，也不巩固

所致疾病：细菌性痢疾传染源:患者和带菌者

传播途径：粪—口传播急性细菌性痢疾急性典型：发热、腹痛、脓血粘液便、里急后重急性非典型：易误诊，导致带菌和慢性中毒性痢疾：小儿，全身中毒症状（严重，死亡率高）慢性细菌性痢疾：病程迁移两个月以上，细菌定植在结肠，症状不明显，传染源中毒性细菌性痢疾：儿童急性细菌性痢疾，内毒素入血所致疾病免疫性

血液循环抗体,无保护性粘膜免疫,有一定保护力,短暂微生物学检查及时送/暂用30%甘油缓冲水保存SS平板（无色透明小菌落）血清学反应（玻片凝集）明确诊断分离培养新鲜脓血便/肛拭双糖培养基（生化反应）快速诊断荧光菌球试验协同凝集试验毒力试验预防：口服减毒活疫苗治疗：多种抗生素可选择但很易引起耐药性防治原则及时治疗患者，切断传播途径等加强卫生管理其中许多为人畜共患病第三节沙门菌属（Salmonella）一大群寄生在人与动物肠道中的G-杆菌菌群菌型甚多，仅少数对人致病引起肠热症的伤寒沙门菌、甲型副伤寒沙门菌等；引起食物中毒的鼠伤寒沙门菌、肠炎沙门菌、猪霍乱沙门菌生物学性状1、形态与染色G-杆菌有菌毛、周鞭毛;无芽胞、荚膜2、培养特性与生化反应普通平板无色半透明S型菌落，SS平板无色菌落生化反应：不发酵乳糖肠道致病菌分离鉴定依据

四类肠道杆菌的生化反应:

代表种动力葡萄糖乳糖靛基质H2S尿素酶埃希菌属大肠埃希菌++++--志贺菌属痢疾志贺菌-+-+/---沙门菌属伤寒沙门菌++---/+-变形杆菌属变形杆菌++-+++3、抗原构造（1）O抗原：1、脂多糖，耐热

2、可刺激机体产生IgM（2）H抗原：1、蛋白质，不耐热

2、可刺激机体产生IgG（3）Vi抗原（强毒株），表面抗原：抗吞噬

4、抵抗力不强，对热及一般消毒剂敏感对氯霉素极敏感对胆盐、煌绿等耐受水、有机物或低温耐受致病性侵袭力：Ａ.菌毛黏附并侵入吞噬细胞内生长繁殖Ｂ.耐胃酸

C.Vi抗原：抗吞噬内毒素：沙门菌重要的毒力因子----内毒素效应激活补体----产生炎症反应肠毒素：如鼠伤寒沙门菌可产生肠毒素1.致病物质2、所致疾病肠热症:由伤寒沙门菌引起的伤寒、甲型副伤寒沙门菌等引起的副伤寒胃肠炎(食物中毒)败血症无症状带菌者胆囊----肠道----粪排菌皮肤----血栓出血--玫瑰疹肾-----尿肝、脾-----肿大骨髓伤寒和副伤寒的致病过程伤寒和副伤寒杆菌小肠上部粘膜肠系膜淋巴结固有层淋巴结进入血液再次进入血液第一次菌血症第二次菌血症(发热、不适、全身酸痛)高热相对缓脉皮疹肝脾肿大白细胞减少消化道生长繁殖胆囊中排出体外（粪便）超敏反应:引起肠壁组织坏死

肠出血、穿孔（注意饮食）肾脏随尿排出

典型的伤寒病程3－4周，症状相对较重恢复期带菌者排菌3周－3月长期带菌者1年以上重要传染源（2）急性胃肠炎（食物中毒）最常见沙门菌感染，常为集体食物中毒食用由鼠伤寒沙门菌、猪霍乱沙门菌、肠炎沙门菌污染食物引起发热、恶心、呕吐、腹痛、水样腹泻血培养阴性，粪便培养阳性（3）沙门菌败血症多见于儿童和免疫功能低下者血培养阳性，粪便培养阴性高热、寒战、厌食、贫血，菌可随血流导致脑膜炎、骨髓炎、胆囊炎、心内膜炎（4）无症状带菌者

1％－５％的患者症状消失后１年仍可在粪便中检出沙门菌

细菌贮留在胆囊内3、免疫性依靠细胞免疫，增强了巨噬细胞杀灭细菌的功能；恢复机制靠细胞免疫体液免疫（sIgA、抗O、抗Vi）：只能对胞外细菌有杀死或溶菌作用可获一定免疫力，黏膜抗体形成局部免疫三、微生物学检查1、沙门菌的分离鉴定第1周血液第2周粪便第3周尿液第1～3周骨髓肠热症胃肠炎败血症粪便、呕吐物、可疑食物血液（1）标本（2）分离培养和鉴定血液、骨髓穿刺液肉汤基（增菌培养）粪便、尿液、呕吐物选择培养基双糖铁培养基

SS琼脂平板（分离培养）（纯分离及初步鉴定）

血清学鉴定系列生化反应动力试验微生物学检查血清学诊断肥达试验（Widal试验）原理：用已知伤寒沙门菌O、H抗原，以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌的H抗原与受检血清作凝集试验，测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。用途：辅助诊断伤寒、副伤寒肥达试验的结果判断考虑正常人群抗体水平正常值：伤寒Ｏ≥1：80Ｈ≥1：160有诊断价值副伤寒Ｈ≥1：80动态观察：恢复期效价增加≥4倍OIgM,出现早，维持时间短

HIgG,出现迟，维持时间长O高H高肠热症可能性大O低H低排除O高H低感染早期或有交叉反应的其它沙门菌感染O低H高预防接种或非特异性回忆反应玻片凝集实验1.结果解释必须结合临床表现、病程、病史、地区流行病学等

2.其他：例外，整个病程中肥达试验结果无变化使用抗生素免疫功能低下四、防治原则加强卫生管理早发现，及时治疗药物治疗：环丙沙星疫苗：伤寒Vi荚膜多糖疫苗第十章弧菌属（Vibrio）菌体短小、弯曲呈弧状或逗点状G-菌，单鞭毛分布广泛，水中居多，大多数是非致病菌致病菌主要是霍乱弧菌和副溶血弧菌

霍乱食物中毒历史上的霍乱恐惧1893年的一天,53岁的柴可夫斯基在彼得堡成功地演出<悲怆>第六交响曲酒馆去庆贺口渴一杯生水当天夜里,身体不适发病第四天与世长辞一代音乐大师倒在了小小的霍乱病菌下<悲怆>也就成为了一曲“绝唱”一、霍乱弧菌（V.cholerae）引起烈性传染病———霍乱曾发生过7次世界性霍乱大流行

19世纪初至今已引起7次世界性大流行。

1817～1923年的百余年间，在亚、非、欧、美、澳等发生的六次世界性霍乱大流行——皆由O1群的古典生物型引起。

1961年开始的第七次世界性霍乱大流行至今已波及五大洲140个以上的国家和地区，报告病例数在400万以上，目前尚无停息的迹象。它们由O1群的埃尔托(ElTor)生物型引起。流行病学概况

1992年10月印度和孟加拉相继发生一种新型霍乱暴发和较大流行，这型霍乱随后在亚洲传播，至今已有印度、巴基斯坦、孟加拉、中国、泰国、马来西亚、缅甸、尼泊尔、新加坡、斯里兰卡、香港等国家和地区报告发生O139霍乱病例。2003年，WHO报告45个国家111575例病例——O139群霍乱弧菌引起。流行病学概况Cholera一、生物学特性1.形态与染色液体中运动非常活泼呈穿梭样涂片中排列整齐呈鱼群状革兰染色阴性弧型或逗点状，单鞭毛2、培养特性与生化反应

营养要求不高，耐碱不耐酸在pH8.8－9.0的碱性蛋白胨水/碱性琼脂平板上生长良好无盐环境生长，其他致病性弧菌否3.抗原构造

Ｏ抗原:现已有155个血清群

O1群与O139群引起霍乱Ｈ抗原:特异性低O1群古典生物型ElTor生物型4.抵抗力

较弱，不耐热对酸敏感，耐碱耐低温对一般消毒剂都敏感对链霉素、氯霉素敏感在水中存活时间较长二、致病性与免疫性1、致病物质－－鞭毛、菌毛、霍乱肠毒素

鞭毛－－运动、穿透穿过肠粘膜粘液层接近肠黏膜细胞菌毛－－粘附、定居作用

霍乱肠毒素(CT)：致泻毒素中最强烈的毒素蛋白质,不耐热，甲醛脱毒成类毒素疫苗毒性部位A结合部位BＢ亚单位与受体结合Ａ亚单位作用于腺苷环化酶ATP转化成cAMP，cAMP水、电解质过度分泌，腹泻、呕吐霍乱肠毒素的作用机理12342.所致疾病烈性肠道传染病----霍乱，我国甲类法定传染病传染源------患者和带菌者通过污染食物或水源经口传染一般情况被胃酸杀灭，胃酸减少时可进入小肠临床表现：上吐下泻：剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物），大量水分和电解质丧失低容量性休克和肾衰竭（死亡率高达60%）3.免疫性可获得牢固免疫，再感染少见可出现保护性抗肠毒素抗体（抗B亚单位）、抗菌抗体（抗O抗原的Ab）肠腔中SIgA发挥重要作用三、微生物学检查法标本直接镜检分离培养涂片见G-性弧菌，鱼群状