高中生物浙科版生物技术实践微生物的利用 省一等奖

第2课时分离以尿素为氮源的微生物(时间：30分钟满分：50分)一、选择题(共8小题，每小题2分，共16分)1．土壤中分解尿素的微生物所需氮源为()A．硝酸B．氨C．尿素D．蛋白胨解析只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素为氮源，缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源使其生长、发育及繁殖受到抑制，所以，能够选择出分解尿素的微生物。答案C2．土壤中的细菌能分解尿素，是因为它们能合成一种()A．尿素酶B．脲酶C．蛋白酶D．肽酶解析能够分解利用尿素的细菌，其细胞内含有脲酶，可以把尿素分解成氨，然后进一步利用。答案B3．产生标准形态菌落的细菌的最初数目和培养基分别是()A．一个细菌、液体培养基 B．许多细菌、液体培养基C．一个细菌、固体培养基 D．许多细菌、固体培养基解析在液体培养基中生活的细菌，无论是一个还是许多，肉眼都是看不见的。在固体培养基上的细菌，当数目较少时也是看不见的。当固体培养基上有许多细菌并且集中在较小范围内时，肉眼可见。而菌落是一个细菌或几个细菌的子细胞群体，形成于固体培养基上，有一定的形态结构，所以肉眼可见。同种细菌形成的菌落，形态结构是相同的。如果有许多细菌形成的菌落，就不可能有比较标准的形态，因为这许多细菌第一不可能是同一种细菌，第二不可能在培养基的同一个点上。答案C4．在分离土壤中的分解尿素的细菌实验中，关于土壤取样的叙述错误的是()A．土壤取样，应选取肥沃、湿润的土壤B．先铲去表层土3cm左右，再取样C．取样用的小铁铲和信封在使用前不用灭菌D．应在火焰旁称取土壤解析在土壤中的分解尿素的细菌分离、计数中，必须在含微生物丰富的湿润、肥沃土壤中取样，所用小铲和信封必须灭菌，应取表层土3cm以下的样土，在装信封和稀释以及称量时必须在酒精灯火焰旁进行。答案C5．平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是()A．接种时再拿起来方便B．在皿底上标记日期等方便C．正着放置容易破碎D．防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染解析平板倒置主要是防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。答案D6．在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂的目的是()A．筛选出能分解尿素的细菌B．对分离的菌种作进一步鉴定C．作细菌的营养成分D．如指示剂变蓝就能准确地认定该菌能分解尿素解析筛选出能分解尿素的细菌用选择培养基即可，不需要加指示剂。加入指示剂的培养基，目的都是对要分离的菌种作进一步的鉴定。答案B7．想要把土壤中分解尿素的细菌进行分离与计数，下列操作需要在火焰旁进行的是()①土壤取样②称取土壤③稀释土壤溶液④涂布平板⑤微生物的培养A．①②③④⑤ B．②③④⑤C．③④⑤ D．②③④解析对分解尿素的细菌进行分离与计数时，注意在火焰旁称取土壤，稀释土壤溶液和接种也都在火焰旁进行。答案D8．在培养基中加入尿素(唯一氮源)，以分离出能分解尿素的细菌，这种加入尿素的培养基在功能上属于()A．选择培养基 B．固体培养基C．液体培养基 D．半固体培养基答案A二、非选择题(共4小题，共34分)9．(6分)下表为本实验中尿素固体培养基的配方，请分析回答下面的问题。成分含量葡萄糖0.025gNaCl0.12gK2HPO40.12g酚红mg尿素2g水25mL琼脂糖0.5g(1)在该培养基的配方中，为微生物提供碳源和氮源的分别是________________________________________________________________。(2)按物理性质划分，该培养基属于________培养基，理由是培养基中含有________；按功能划分，该培养基为________培养基和________培养基。(3)该培养基上分离出的细菌一定都是以尿素为氮源的细菌吗？若不是，如何从中确定以尿素为氮源的细菌？______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。答案(1)葡萄糖、尿素(2)固体琼脂糖选择鉴别(3)不一定都是以尿素为氮源的细菌，也有可能含有固氮细菌。因为尿素分解菌能够将培养基中的尿素分解为氨，造成周围的培养基呈碱性而使酚红指示剂变红，所以菌落周围有红色环带的为尿素分解菌10．(9分)幽门螺杆菌(Hp)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如下：eq\x(配制培养基)→eq\x(灭菌、倒平板)→eq\x(X)→eq\x(培养)→eq\x(观察)请回答：(1)在配制培养基时，要加入尿素和酚红指示剂，这是因为Hp含有________，它能以尿素作为氮源；若有Hp，则菌落周围会出现________色环带。(2)下列对尿素溶液进行灭菌的最适方法是________灭菌。A．高压蒸汽 B．紫外灯照射C．70%酒精浸泡 D．过滤(3)步骤X表示________。在无菌条件下操作时，先将菌液稀释，然后将菌液________到培养基平面上。菌液稀释的目的是为了获得________菌落。(4)在培养时，需将培养皿倒置并放在________中。若不倒置培养，将导致________。(5)临床上用14C呼气试验检测人体是否感染Hp，其基本原理是Hp能将14C标记的________分解为NH3和14CO解析(1)脲酶能特异性地催化尿素水解释放出NH3和CO2。所以加入尿素作为氮源，加入酚红指示剂(高pH时呈现红色)能指示以尿素为氮源的细菌的存在。(2)由于尿素在高温下会分解，因此对尿素溶液的灭菌要采用玻璃漏斗过滤的方法。(3)本题运用的是涂布分离法，该方法能更容易获得单菌落，但操作较复杂。(4)在倒平板和培养过程中，会产生水蒸气，如果正置，那么水蒸气在皿盖上凝结成水珠后滴在培养基上，会污染细菌，导致不能分离出单菌落。(5)该题中Hp含有脲酶，能把尿素分解成NH3和CO2。患者通过服用被14C标记的尿素并检测呼气中的被14C标记的CO答案(1)脲酶红(2)D(3)接种涂布单(4)恒温培养箱无法形成单菌落(5)尿素11．(10分)富集培养是微生物学中最强有力的技术手段之一，主要是指利用不同微生物间生命活动的特点不同，仅适应该条件的微生物生长旺盛，从而使其在群落中的数量大大增加，人们能够更容易地从自然界中分离得到所需的特定微生物。富集条件可根据所需分离的微生物的特点，从物理、化学、生物等综合多个方面进行选择，如温度、pH、紫外线、高压、光照、氧气、营养等许多方面。如图描述了采用富集方法从土壤中分离能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物的实验过程。请分析回答下面的问题。(1)本实验所需要的培养基为________，碳源为________________________________________________________________。(2)实验原理是____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。(3)①→③重复培养的目的是________________________________________________________________。(4)⑤的菌落中大部分是降解____________________的微生物。(5)⑥为________组，⑦为________组，设置⑥的目的是_________________________________________________________________。(6)⑤→⑥采用________________________法，接种到⑥的培养基中，在操作过程中为防止污染应注意的事项是____________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________________。解析本题考查了微生物培养的相关知识。先用含有对羟基苯甲酸为唯一碳源的液体培养基，经过富集培养之后，将其涂布到固体平板培养基中分离培养，然后将单菌落接种到液体培养基中，才能得到纯度较高的微生物。答案(1)选择培养基对羟基苯甲酸(2)利用以对羟基苯甲酸为唯一碳源的选择培养基，经富集培养，选择出能降解酚类化合物对羟基苯甲酸的微生物(3)增大分解对羟基苯甲酸微生物的比例(4)对羟基苯甲酸(5)对照实验说明通过富集培养的确得到了欲分离的目标微生物(6)单菌落挑取接种环在火焰上灼烧灭菌，烧红的接种环应在空气中冷却，同时，打开皿盖挑取菌落接种到试管中，并塞好棉塞，接种环在火焰上灼烧，杀灭残留物12．(9分)高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了能高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图所示。(1)从用途上来说，Ⅰ号培养基属于________培养基，仅以淀粉作为________源；从物理状态上来说，Ⅱ号培养基属于固体培养基，配制时一般加入________作为凝固剂。(2)进行①过程的目的是________；②过程所使用的接种方法是________法。(3)Ⅰ、Ⅱ号培养基配制和灭菌时，灭菌与调pH的先后顺序是______________________；一般对配制的培养基采用________法灭菌。(4)部分嗜热菌在Ⅰ号培养基上生长时可释放淀粉酶分解培养基中的淀粉，在菌落周围形成透明圈，应挑出透明圈________(填“大”或“小”)的菌落，接种到Ⅱ号培养基上。解析(1)筛选特定微生物的培养基属于选择培养