- 现行
- 正在执行有效
- 2003-07-30 颁布
- 2003-10-01 实施
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文档简介
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中华人民共和国农业行业标准
犖犢/犜684—2003
犬瘟热诊断技术
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20030730发布20031001实施
中华人民共和国农业部发布
书
犖犢/犜684—2003
前言
本标准的附录A为规范性附录。
本标准由农业部畜牧兽医局提出并归口。
本标准起草单位:农业部兽医诊断中心。
本标准主要起草人:田克恭、王宏伟、遇秀玲、陈西钊、王传彬。
Ⅰ
书
犖犢/犜684—2003
犬瘟热诊断技术
1范围
本标准规定了犬瘟热(CD)的临床诊断、犬瘟热病毒(CDV)的分离与鉴定、免疫酶试验和免疫酶组
织化学方法等诊断技术。
本标准适用于犬瘟热的诊断。
2临床诊断要点
2.1临床症状
CD的临床表现多种多样,与CDV的毒力,环境条件,宿主的年龄、品种及免疫状态有关。病犬体
温升高至40℃以上,鼻流清涕至脓性鼻汁,脓性眼屎,有咳嗽、呼吸急促等肺炎症状,腹下可见米粒大丘
疹。病程长的犬足枕角质层增生。病后期CDV侵害大脑时则出现神经症状,头、颈、四肢抽搐。
2.2病理变化
CDV为泛嗜性病毒,对上皮细胞有特殊的亲和力,因此病变分布非常广泛。新生幼犬感染CDV通
常表现胸腺萎缩。成年犬多表现结膜炎、鼻炎、气管支气管炎和卡他性肠炎。表现神经症状的犬通常可
见鼻和脚垫的皮肤角化病。中枢神经系统的大体病变包括脑膜充血,脑室扩张和因脑水肿所致的脑脊
液增加。
CDV的包涵体通常呈嗜酸性,位于胞浆内,直径1μm~5μm,可在粘膜上皮细胞、网状细胞、白细
胞、神经胶质细胞和神经元中发现。核内包涵体多位于被覆上皮细胞、腺上皮细胞和神经节细胞。
3病毒分离与鉴定
3.1材料准备
3.1.1试剂
3.1.1.1改良最低要素营养液(DMEM)培养基,配方见第A.1章。
3.1.1.2非洲绿猴肾细胞(Vero细胞)。
3.1.1.3标准阳性血清:CDV单克隆抗体,中和抗体效价1∶1024。
3.1.1.4标准阴性血清:无CDV感染的犬血清。
3.1.1.5新生牛血清处理:用无血清DMEM洗涤细胞两次,加入培养液二分之一量的新生牛血清,
37℃吸附1h。吸附后的新生牛血清分装,置-20℃备用。
3.1.1.6青霉素、链霉素。
3.1.2器材
a)细胞培养瓶;
b)吸
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