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文档简介
1呼吸道标本的微生物检查21.鼻咽拭子采集时,患者用清水漱口,对光而坐,头向上仰张大口,用压舌板轻压舌根,取无菌鼻咽拭子绕过悬雍垂,在鼻咽腔、悬雍垂后侧反复涂抹数次小心取出,避免接触口腔部其他组织。2.咽拭子将拭子用无菌生理盐水湿润,用压舌板轻压舌根,暴露整个口咽部。先用拭子轻擦扁桃体表面后弃去,再取1支湿润的拭子轻压扁桃体,擦取挤压出的分泌物,或擦取伪膜等病变部位。标本的采集33.痰液标本自然咳痰法:受检者用清水溯口数次后,用力咳嗽自气管深部将痰咳出吐至无菌容器中。对痰量少或无痰等咳痰困难者,可雾化吸入45℃左右的10%氯化钠水溶液,使痰容易排出。对于幼儿,可轻轻压迫胸骨上部气管,使其咳嗽而取之。标本的采集4血平板巧克力平板中国蓝平板
鼻咽拭子
直接涂片染色检查革兰染色异染颗粒初步报告
白喉棒状杆菌培养菌落形态、涂片染色初步报告
生化反应、血清学鉴定检验程序常规培养
百日咳杆菌培养
血清斜面培养基鸡蛋培养基鲍-金培养基亚碲酸钾血平板纯培养菌落形态、涂片染色5血平板巧克力平板中国蓝平板
普通培养普通培养普通培养
35℃、18~24h35℃、18~24h35℃、18~24h痰液标本
肉眼观察
涂片染色观察
初步报告
培养前处理
菌落形态和涂片染色
生化反应、血清学鉴定报告
检验程序61、肉眼观察:下呼吸道标本为痰液,选取脓血性的痰液用于细菌学检验。异常恶臭的脓性痰,常见于肺脓疡患者,而且可能与厌氧菌有关。痰液中有颗粒状、菌块和干酪样物质可能与放线菌病和曲霉菌感染有关。痰液标本检验操作流程72、涂片检查:挑选痰液中脓、血性部分涂片,干燥固定后,进行革兰染色镜检。如发现形态典型、有特殊结构,初步可以确定所属菌属或种的细菌,可直接报告。如查见革兰阳性葡萄状排列的球菌,可报告“痰液涂片查见革兰阳性球菌,形似葡萄状”;痰液标本检验操作流程8
如查见革兰阳性双球菌、矛头状、有明显荚膜时,可报告“痰液涂片查见革兰阳性双球菌,形似肺炎球菌”。如不能直接确定菌属或种的细菌,可报告“痰液涂片查见革兰×性×菌”。如果痰片中均为鳞状上皮细胞,则应视为不合格标本。
痰液标本检验操作流程93.分离培养取经过前处理的痰液标本分别接种血平板、巧克力平板和中国蓝平板。巧克力平板置5%—10%CO2
环境培养,其他平板于普通环境35℃孵育18—24h。根据菌落形态,细菌染色观察,进一步进行鉴定。痰液标本检验操作流程10特殊菌的培养1.结核分枝杆菌培养:无菌吸管加前处理标本2-3滴于罗-琴培养基35℃孵育至8周,每周观察一次;2.嗜肺军团菌培养:取气管分泌物接种于活性炭酵母琼脂(CYE)或费-高(F-G)平板,35℃、2.5%CO2培养,每天用肉眼观察,直至第14天;3.百日咳鲍特菌的培养:将标本直接接种在鲍-金培养基上,置有盖的玻璃缸(缸内加少量的水,并在水中加少许硫酸铜,防止细菌及霉菌生长)中,35℃
孵育3—5天。114.白喉棒状杆菌培养:将标本接种于血清斜面或鸡蛋培养基,35℃
孵育8-10h观察;5.流感嗜血杆菌培养:将标本接种于血平板和巧克力平板,并在平板中央接种一直线金黄色葡萄球菌(或四角点种),35℃、5%-10%CO2环境孵育18-24h。6.脑膜炎奈瑟菌培养:将鼻烟拭子接种于已保温在350C的卵黄双抗平板上,35℃、5%-10%CO2环境孵育18—24h。特殊菌的培养12结果报告1.如发现可疑致病菌落,则进行涂片染色观察、生化反应及血清学鉴定得出报告“检出xx细菌,并报告该菌在培养基中的大慨比例”;2.如无致病菌落生长,则继续培养至48h,平板上均为咽部正常菌群生长,无可疑致病菌落生长,则报告“正常菌群生长”;3.如虽在平板上未发现特定的致病菌,但某种常居菌比正常情况明显增多或近似纯培养,考虑可能菌群失调或菌群交替症,也可进行鉴定后报告“xx菌纯培养”或“xx菌生长旺盛”。13注意事项1.上呼吸道标本要及时送检,防止干燥。采集时尽量避免正常菌群的污染
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