第2章-一般血细胞学检验

第二章一般血细胞学检验南通大学第二附属医院检验医学中心陆永辉1第二章一般血液学检验主要内容第一节

外周血液血细胞形态学检验第二节

红细胞检验第三节白细胞检验

2第二章一般血液学检验外周血细胞由骨髓、淋巴器官造血产生，经生长发育成熟释放入外周血红细胞白细胞：中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞血小板3第二章一般血液学检验外周血正常白细胞形态4第二章一般血液学检验嗜酸细胞淋巴细胞单核细胞中性粒细胞血小板

嗜碱细胞外周血红细胞、血小板形态5第二章一般血液学检验血细胞生长发育成熟过程1.造血干细胞2.造血祖细胞3.原始细胞4.幼稚细胞5.成熟细胞6第二章一般血液学检验血细胞生长发育成熟阶段红细胞：原始→早幼→中幼→晚幼→网织→成熟红细胞白细胞--中性粒细胞：原始粒细胞→中性早幼粒→中幼粒→晚幼粒→杆状核→分叶核细胞

--嗜酸、嗜碱粒细胞：原始粒细胞→嗜酸（碱）早幼粒→中幼粒→晚幼粒→嗜酸（碱）粒细胞

--淋巴细胞：原始淋巴细胞→幼稚淋巴细胞→淋巴细胞

--单核细胞：原始单核细胞→幼稚单核细胞→单核细胞血小板：由巨核细胞产生7第二章一般血液学检验第一节外周血液血细胞形态学检验一、血细胞涂片的制作和染色1.血涂片的制作手工涂片法自动推片法8第二章一般血液学检验良好血涂片的质量标准血膜距片端1/3处始，长≥25mm，两侧边距≥5mm，由厚到薄连续均匀涂开，始端平直，末端舌状，边缘光滑，厚薄适宜无画线、裂隙、颗粒，头、体、尾分清。9第二章一般血液学检验2、血涂片的染色最经典、最常用主要成分：碱性美兰（亚甲蓝）与酸性伊红染色原理：物理吸附、化学亲和与电荷作用的共同结果。各种细胞成分的化学性质不同，对染料的亲和力各异，呈现粉红、紫色、蓝色、紫红等不同色彩。瑞氏染色10第二章一般血液学检验瑞氏染液氯化亚甲蓝（MCl）与伊红化钠（NaE）的甲醇溶液甲醇是Wright染料良好溶剂，固定细胞形态，将蛋白质沉淀为颗粒网状增加接触面提高染料吸附解离成M+（亚甲蓝）和E-（伊红）磷酸盐缓冲液（pH6.4-6.8）11第二章一般血液学检验瑞氏染色步骤1.血涂片平放于染色架2.瑞氏染液数滴覆盖血膜，固定1min3.加等量缓冲液与染液混匀，染5-10min4.自来水冲去染液，吸（吹）干镜检12第二章一般血液学检验不同化学物质的染色结果碱性蛋白质（血红蛋白、嗜酸颗粒）与酸性伊红结合，染成粉红色酸性蛋白质（核蛋白、淋巴胞质）与碱性美兰或天青（亚甲蓝氧化物）结合，染成紫色或蓝色中性颗粒与伊红和亚甲蓝均结合，染成淡紫红色13第二章一般血液学检验血片瑞氏染色结果红细胞呈粉红色，略有碟状感中性粒细胞核深紫红色，胞质淡红，颗粒细小紫红色嗜酸性粒细胞核紫红色，胞浆充满粗大橘红色颗粒嗜碱性粒细胞核淡紫红色，胞质淡红，大小不等黑紫色颗粒淋巴细胞核深紫红色，胞质淡蓝透明，偶见紫红色颗粒，单核细胞核淡紫红色，胞质淡蓝或灰蓝色，细小紫红色颗粒血小板染紫红色或蓝紫色偏酸偏碱、时间长短，染色有差异。14第二章一般血液学检验染色效果的影响因素染液浓度：浓度高，染色较深，浓度低，染色较淡染色时间：时间长，染色较深，时间短，染色较淡或未着色温度：温度高，细胞着色快，温度低，着色慢pH：pH低，H+增多，细胞成分与伊红亲和力占优，染色偏红，pH高，和美兰亲和力大，染色偏蓝细胞数量：细胞多则染液浓度略高，染色时间略长染液浓度略低，染色时间长些，染色效果好15第二章一般血液学检验瑞氏染色与吉姆萨染色

瑞氏染色：细胞质成分、中性颗粒等染色效果好，细胞核染色不如吉姆萨染色效果。吉姆萨染色：细胞核和寄生虫着色较好，胞质和中性颗粒着色较差。复合染色取长补短。16第二章一般血液学检验大小异常染色异常形态异常

结构异常2、异常红细胞形态17第二章一般血液学检验大小异常

aMicrocyte

小红细胞bMegalocyte巨红细胞

cMacrocyte大红细胞dAnisocytosis

红细胞大小不均18第二章一般血液学检验红细胞大小异常小红细胞：(d<6μm)缺铁性贫血、铁粒幼、珠蛋白生成障碍大红细胞：(d>10μm)溶血性贫血、巨幼贫巨红细胞：(d>15μm)巨幼细胞性贫血红细胞大小不均：巨幼贫、重度增生性贫血19第二章一般血液学检验染色异常A.Normochromaticerythrocyte

正常色素性红细胞B.Hypochromaticerythrocyte

低色素性红细胞C.Hyperchromaticerythrocyte高色素性红细胞D.Polychromaticerythrocyte嗜多色性红细胞20第二章一般血液学检验红细胞染色异常正常色素性红细胞：淡红色圆盘状，中央生理苍白区（Normal、AA）低色素性红细胞：中央浅染区扩大（IDA）高色素性红细胞：中央浅染区缩小或消失（巨幼贫、球形红细胞增多症）嗜多色性红细胞：灰蓝或灰红色，胞体较大（增生性贫血-溶贫）21第二章一般血液学检验形态异常类型很多，原因复杂。A.Spherocyte

球形B.Sicklecell

镰形

C.Rouleauxformation缗钱状D.Acanthocyte

棘形

E.Targetcell靶形

22第二章一般血液学检验A.Schistocyte裂片形B.Teardropcell泪滴形

C.Meniscocyte新月形

D.Stomatocyte

口形E.Elliptocyte

椭圆形23第二章一般血液学检验红细胞形态异常（一）球形红细胞：直径略小，厚度增加，球形，无中央浅染区（球形红细胞增多症）镰形红细胞：细胞膜变形如镰刀状（HbS病）缗钱状红细胞：铜钱串样（骨髓瘤）棘形红细胞：表面针尖状突起，间距不规则，长宽不一，不同于皱缩红细胞（β-脂蛋白缺乏症）靶形红细胞：直径增大，厚度变薄，中央、边缘深染，间苍白区，形如靶(珠蛋白生成障碍）24第二章一般血液学检验红细胞形态异常（二）裂片形红细胞：碎片，有刺形、盔形、三角形、扭转形等（DIC）泪滴形红细胞：泪滴状或梨形（骨纤）新月形红细胞：残缺如新月（疟疾）口形红细胞：中央苍白区扁平状，有裂缝，如嘴形或鱼口（口形红细胞增多症）椭圆形红细胞：红细胞膜缺陷，椭圆形或杆形（椭圆形红细胞增多症、巨幼贫）25第二章一般血液学检验结构异常

basophilicstipplingcell

Howell-Jolly’sbody

cabotring

nucleatederythrocyte

26第二章一般血液学检验A.Basophilicstippling

嗜碱点彩红细胞B.Howell-Jolly’sbody

豪-焦小体C.Cabotring

卡波环D.Nucleatederythrocyte

有核红细胞E.Haemoplasmodium

寄生虫27第二章一般血液学检验红细胞结构异常嗜碱点彩红细胞：胞质有蓝黑色颗粒，重金属（铅、汞等）中毒表现豪-焦小体：红细胞胞质中暗紫红圆形小体，核残余，巨幼贫、溶贫、脾切増多卡波氏环：红细胞胞质中紫红细线圈状或8字结构，见于溶贫、巨幼贫、铅中毒、白血病有核红细胞：幼稚红细胞，见于新生儿、溶贫、恶性造血疾患、骨纤等寄生虫：疟原虫、微丝蚴、利什曼原虫等。28第二章一般血液学检验三、白细胞形态检查29第二章一般血液学检验中性粒细胞核的变化核左移、核右移核变性Pelger-Huet畸形中毒性改变核棘突鼓槌小体30第二章一般血液学检验1、中性粒细胞核象变化成熟幼稚31第二章一般血液学检验核左移(shifttotheleft)核右移(shifttotheright)？32第二章一般血液学检验核左移定义：外周血杆状核粒细胞增多和幼稚细胞出现，常由急性感染、失血、中毒、免疫低下引起。再生性左移：伴WBC增多，机体反应性强，骨髓造血旺盛，常见于急性感染、失血、中毒退行性左移：WBC不增或降低，骨髓释放受抑，见于严重感染或抵抗力低下33第二章一般血液学检验核右移定义：外周血中性分叶核粒细胞增多，5叶核以上>3%，是造血功能衰退或造血物质缺乏表现。常伴WBC减少，见于恶性贫血、巨幼贫、使用抗代谢药炎症恢复期一过性出现，进行期出现示预后不良。34第二章一般血液学检验核变性核固缩：染色质凝集呈深紫色粗大块状核溶解：胞核膨胀，着色浅淡，常伴核膜碎裂，细胞衰老死亡表现核碎裂：核裂解成数块35第二章一般血液学检验空泡变性棒状小体中毒颗粒杜勒小体颗粒消失Chediak-Higashi畸形2、中性粒细胞胞质变化36第二章一般血液学检验A.Döhlebody杜勒小体B.toxicgranulation

中毒颗粒C.Vacuolation空泡变性D.Auerbody

棒状小体

37第二章一般血液学检验中性粒细胞胞质变化

空泡变性：胞质、核出现空泡（脂肪变性）

--（严重感染和中毒）中毒颗粒：比中性颗粒大，（紫）黑色杜勒小体（蓝斑）：圆（梨）形天蓝或蓝黑色，-（胞质毒性变化，核质发育失衡）棒状小体：红色细杆状，急粒、急单可见，M3明显-（急性白血病诊断及鉴别诊断）38第二章一般血液学检验淋巴细胞形态异常异型淋巴细胞：病毒感染或过敏性疾病等刺激淋巴细胞增生，出现形态变化

Ⅰ-空泡型

Ⅱ-不规则型

Ⅲ-幼稚型褪变型淋巴细胞：放射损伤，核变性（核固缩、核碎裂、双核、卫星核）39第二章一般血液学检验空泡型（浆细胞型）不规则型（单核细胞型）幼稚型（未成熟细胞型）异型淋巴细胞A异型淋巴细胞浆细胞型B异型淋巴细胞幼稚型C单核细胞型40第二章一般血液学检验异型淋巴细胞形态特征Ⅰ-空泡型：胞质丰富（核质1:1）深蓝泡沫样，有空泡，核偏固缩似浆细胞Ⅱ-不规则型：胞体较大花边状，胞质量多（核质1:2）浅蓝或蓝色透明感，核圆或不规则，较细致疏松，似单核细胞，

Ⅲ-幼稚型：胞体较大，胞质量多（核质2:3），蓝或深蓝，核大较规则，细致疏松，似幼稚细胞41第二章一般血液学检验第二节

红细胞检验42第二章一般血液学检验红细胞生理生长发育：造血干细胞→红系祖细胞→原红→早幼红→中幼红→晚幼红→网织红→成熟红细胞骨髓中原始红细胞→网织红细胞约72h网织红细胞→成熟红细胞约48h红细胞平均寿命120d在脾脏破坏，由单核巨噬细胞清除主要功能：作为呼吸载体（血红蛋白）,结合、运输O2和CO2，

进行气体交换43第二章一般血液学检验红细胞生成必需的元素铁叶酸维生素B12蛋白质、脂质、糖类、无机离子44第二章一般血液学检验淡红色双凹圆盘状，直径6.7-9.5μm，中央苍白区。表面积/体积比值大；增加气体透过面积有变形能力1、正常红细胞形态45第二章一般血液学检验嗜酸细胞淋巴细胞单核细胞中性粒细胞血小板

嗜碱细胞外周血瑞氏染色红细胞形态46第二章一般血液学检验1、方法显微镜计数法血细胞分析仪法一、红细胞计数47第二章一般血液学检验显微镜计数法48第二章一般血液学检验红细胞计数干扰因素冷凝集-RBC聚集导致计数假性减低溶血-假性减低白细胞显著增多-假性增高，须减去WBC数大血小板增多-假性增高49第二章一般血液学检验成年男性：（4.09~5.74）×1012/L成年女性：（3.68~5.13）×1012/L新

生

儿：（5.2~6.4）×1012/L婴

儿：（4.0~4.3）×1012/L儿

童：（4.0~4.5）×1012/L2、参考范围50第二章一般血液学检验红细胞医学决定水平医学决定水平：对疾病诊断、治疗、预后有决定意义的生物学指标>6.8×1012/L对症治疗<3.5×1012/L诊断贫血<1.5×1012/L考虑输血

51第二章一般血液学检验3、临床应用A、生理性增多新生儿、高原生活、剧烈运动、精神因素等。（1）增多52第二章一般血液学检验（B

）绝对性增多：继发性心、肺疾病代偿增异常血红蛋白病生

某些肿瘤等原发性真性红细胞增多症病理性增多（A）相对性增多：血浆水分丢失，血液浓缩，绝对数没有发生变化。53第二章一般血液学检验生理性减少

儿童、孕妇、老年人。病理性减少A、骨髓造血功能低下，如再障。B、造血原料缺乏，如缺铁贫、巨幼贫。C、红细胞破坏增加，如溶贫。D、红细胞丢失过多，如失血。（2）减少54第二章一般血液学检验二、血红蛋白测定（hemoglobin，Hb）55第二章一般血液学检验血红蛋白结构种类珠蛋白和亚铁血红素结合蛋白，4条珠蛋白肽链各包裹一个亚铁血红素，分子量64458HbA（α2β2）——占成人Hb90%以上HbA2（α2δ2）HbF（α2γ2）——占新生儿、婴儿Hb70%左右血红蛋白衍生物：Hi、HbCo、HbS56第二章一般血液学检验1、测定方法氰化高铁血红蛋白法（HiCN

）十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法（SDS-Hb）叠氮高铁血红蛋白法（HiN3）57第二章一般血液学检验氰化高铁血红蛋白法（HiCN

）原理：血红蛋白（除HbS）Fe2+被高铁氰化钾氧化成Fe3+,形成高铁血红蛋白（Hi），与氰根离子形成氰化高铁血红蛋白（HiCN），540nm有最大吸收峰，吸光度与血红蛋白浓度成正比。ICSH和WHO推荐标准参考方法58第二章一般血液学检验HiCN测定法干扰因素脂血-假性增高有核细胞大量增多-假性增高其它引起浊度升高的因素59第二章一般血液学检验2、参考范围新生儿：（180~190）g/L；儿

童：（120~140）g/L；成年男性：（131~172）g/L；成年女性：（113~151）g/L；老年人（70岁以上）：男性：（94~122）g/L；女性：（87~112）g/L；60第二章一般血液学检验血红蛋白临床应用血红蛋白增高：成男>170g/L，成女>160g/L血红蛋白减低（贫血）：成男<120g/L，成女<110g/L轻度贫血-90g/L<Hb<参考值下限中度贫血-60g/L<Hb≤90g/L重度贫血-30g/L<Hb≤60g/L极重度贫血-Hb≤30g/L61第二章一般血液学检验测定方法微量法（WHO推荐）温氏比容法血液分析仪法三、血细胞比容测定（hematocrit，Hct）红细胞比容（packedcellvolume，PCV）即红细胞压积（Hct）,指在一定条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。62第二章一般血液学检验离心法结果读取离心血液分五层：血浆层血小板层白细胞和有核红细胞层还原红细胞层带氧红细胞层读取还原红细胞层表面刻度/100或红细胞柱长/全层高63第二章一般血液学检验血液分析仪法PCV=MCV×RBC数（L/L）64第二章一般血液学检验【参考范围】男性：0.380~0.508L/L女性：0.335~0.450L/L【临床应用】●红细胞比容增高：相对性增多（血液浓缩）。绝对性增高（红细胞增多）。●红细胞比容降低：见于各种贫血。65第二章一般血液学检验四、红细胞相关参数1、红细胞平均容积（meancorpuscularvolume,MCV）。MCV=红细胞比容每升血液中红细胞数原理：血细胞通过分析仪电极小孔引起电阻改变，产生脉冲信号，振幅与体积成正比，脉冲数即细胞数。【参考范围】

80～92fl（1fl=10-15L）66第二章一般血液学检验２、红细胞平均血红蛋白量（meancorpuscular

hemoglobin,MCH）MCH=血红蛋白量每升血液中红细胞数【参考范围】

27～31pg（1pg=10-12g)67第二章一般血液学检验３.红细胞平均血红蛋白浓度（meancopuscularhemoglobinconcentration，MCHC）MCHC=红细胞比容【参考范围】

320～360g/L血红蛋白量68第二章一般血液学检验４.红细胞体积分布宽度（RDW）定义：是反映外周血红细胞体积差异的参数，通过变异系数或标准差定量表示红细胞体积分布的离散程度。【参考范围】

成人：≤15.0%

新生儿：男≤15.9%女≤16.2%69第二章一般血液学检验【临床应用】根据上述指标可进行贫血的形态学分类。四、红细胞相关参数70第二章一般血液学检验MCVMCHMCHC大细胞性贫血＞正常＞正常正常正常细胞性贫血正常正常正常单纯小细胞贫血＜正常＜正常正常小细胞低色素性贫血＜正常＜正常＜正常各种贫血时三项指数的变化71第二章一般血液学检验几种贫血类型的MCV和RDW变化72第二章一般血液学检验五、网织红细胞（reticulocyte，Ret）计数界于晚幼红细胞和成熟红细胞之间的过渡型细胞。因其胞质中残存的核糖核酸经碱性染料活体染色后，呈现点状或线网状结构，故名网织红细胞。73第二章一般血液学检验１.计数方法（1）显微镜计数法：染色后油镜计数1000个RBC中Ret数米勒(Miller)窥盘法该方法可明显提高计数的准确性。

A31B将Miller窥盘放在显微镜目镜中,通过窥盘中大小方格间的9比1比例关系计算RBC数和网织RBC。74第二章一般血液学检验网织红细胞类型Ⅰ型（丝球型）颗粒呈致密块状Ⅱ型（网型）颗粒呈疏松网状Ⅲ型（破网型）颗粒松散Ⅳ型（点粒型）颗粒点状散在颗粒越多越密越幼稚外周血Ⅳ型占60%以上75第二章一般血液学检验（２）血液分析仪法

新亚甲蓝-VCS检测法以超活染料新亚甲蓝（NMB）着色网织红细胞内残存的RNA漂去红细胞内血红蛋白（酸性漂洗液）在流式通道，运用VCS三维技术，将网织红细胞与成熟红细胞、白细胞、血小板、和有核红细胞区分开来76第二章一般血液学检验抗凝全血噻唑橙染色，用流式细胞仪分析样本中10000个细胞，报告网织红细胞百分比和平均荧光强度。荧光强度越强，细胞越幼稚。流式细胞仪分析简便，结果精确、灵敏，消除了取样带来的误差。（3）流式细胞仪法：77第二章一般血液学检验成人：0.005～0.015（0.5%～1.5%)新生儿：0.03～0.06儿童：0.005~0.075

绝对值：成人(24～84)×109/L２.参考范围78第二章一般血液学检验（1）评价骨髓增生能力，判断贫血类型

增多表示红细胞生成旺盛，降低是无效红细胞造血指征。再障时，明显降低。绝对值低于5×109/L可做为急性再障的辅助诊断指标。失血、多数溶血性贫血患者网织红细胞可明显增高，脾亢轻度增高。营养不良性贫血网织红细胞可正常、轻度升高或降低。３.网织红细胞临床应用79第二章一般血液学检验

（2）评价疗效

网织红细胞反应：IDA或巨幼细胞贫血分别给予铁剂、维生素B12或叶酸治疗2~3d后，网织红细胞计数值开始上升，7~10d达到最高(10%左右)；两周以后逐渐降至正常水平，红细胞、血红蛋白开始升高。 骨髓移植、EPO治疗后：若骨髓开始恢复造血功能，网织红细胞计数值上升。80第二章一般血液学检验（3）放、化疗监测

机体接受放、化疗后，如出现骨髓抑制，早期HFR和MFR降低，然后才检测到网织红细胞的降低。而停止放、化疗，骨髓功能恢复后，又见上述指标依次上升。可指导临床医师适时调整治疗方案，避免造成严重的骨髓抑制。81第二章一般血液学检验网织红细胞成熟指数（RMI）RMI=（HFR+MFR）/LFR×100%HFR、MFR、LFR-高、中、低荧光强度网织红细胞，荧光强度高，网织红细胞越幼稚RMI增高是RBC造血早期标志，较Ret计数敏感82第二章一般血液学检验网织红细胞类型Ⅰ型（丝球型）颗粒呈致密块状Ⅱ型（网型）颗粒呈疏松网状Ⅲ型（破网型）颗粒松散Ⅳ型（点粒型）颗粒点状散在颗粒越多越密越幼稚外周血Ⅳ型占60%以上83第二章一般血液学检验RPI=病人网织红细胞%/2×病人PCV/正常人PCV（男0.45，女0.40）临床应用：＞3提示溶血性贫血或急性失血性贫血；＜2提示为骨髓增生低下或红细胞系成熟障碍性贫血。网织红生成指数（Reticulocyteproductionindex,RPI）84第二章一般血液学检验嗜碱性点彩红细胞计数发育过程中因化学损伤，胞质残留RNA变性沉淀的未成熟红细胞。血涂片瑞氏染色后油镜下计数1000个RBC中点彩红细胞的百分数参考范围<=0.01%重金属（铅、汞等）中毒显著增高恶贫、溶贫、铁粒幼、白血病、恶性肿瘤、疟疾可增高85第二章一般血液学检验嗜碱性点彩红细胞与嗜多色性红细胞86第二章一般血液学检验概念红细胞在一定条件下单位时间内沉降的速度，简称血沉，是反映红细胞聚集性的指标。病理情况下血沉可明显加快。六、血细胞沉降率（erythrocytesedimentationrate,ESR）87第二章一般血液学检验魏氏法：取静脉血1.6ml，按4:1比例与柠檬酸钠溶液（0.4ml）混匀，吸入清洁、干燥的标准魏氏血沉管至“0”刻度处。血沉管在室温下（18～25℃）垂直放置于血沉架，避免阳光直照、振动和血液外溢。1h后，血浆凹液面底部至沉降红细胞柱顶部之间距离，即为血沉结果，以mm/h报告。

１.测定方法88第二章一般血液学检验动态监测法：根据红细胞界面随时间下降的原理，采用光电管每隔60s动态监测红细胞沉降的位置，得到沉降高度-时间曲线,动态分析血沉过程。光密度法：利用激光为光源，对毛细管中的微量抗凝全血照射，动态检测红细胞聚集和沉降的变化过程，而后通过光密度的变化换算成魏氏法的相关结果。89第二章一般血液学检验参考范围

魏氏法成年男性：0-15mm/h

成年女性：0-20mm/h许多疾病血沉加快缺乏特异性，用于筛查90第二章一般血液学检验２.影响血沉的因素

（１）血浆因素正电荷的大分子物质（凝血因子I、球蛋白）：血沉加快;负电荷的蛋白质（白蛋白）：血沉减慢;脂类：胆固醇，甘油三脂，利于红细胞聚集，血沉加快;卵磷脂使血沉减慢;分子多聚体药物：使红细胞聚集，如白明胶等。91第二章一般血液学检验（２）红细胞因素红细胞数量：一般数量减少，阻力减小，血沉加快，数量增多，血沉减慢;红细胞形态：直径大，厚度薄，红细胞易形成缗钱状，血沉加快，形态异常或大小不均，血沉减慢。红细胞表面电荷破坏：病毒、细菌感染，血沉加快。92第二章一般血液学检验（３）技术因素血沉管的位置：倾斜，血沉加快；

温度：室温越高，血沉加快；

时间：2h内测定抗凝剂的使用:稀释度大，血沉加快；

标本因素：脂血、凝块、溶血

93第二章一般血液学检验３.临床应用

（1）生理性加快

۩妇女月经期，妊娠1月以上；

۩儿童；

۩老年人，特别是70岁以上。94第二章一般血液学检验（2）病理性加快

◐各种炎症

◐组织损伤及坏死

◐恶性肿瘤

◐高球蛋白血症◐贫血◐高胆固醇血症95第二章一般血液学检验病理性加快感染是最常见原因，动态观察疾病活动性及变化；鉴别心梗、肺梗与心绞痛，肿瘤筛查与良恶鉴别贫血肝硬化肾炎免疫系统疾病96第二章一般血液学检验第三节白细胞检验白细胞为有核细胞，分为中性粒细胞，嗜酸性粒细胞，嗜碱性粒细胞，淋巴细胞和单核细胞五种。97第二章一般血液学检验外周血正常白细胞形态98第二章一般血液学检验白细胞成熟过程祖细胞释放入外周血液血循环血管壁

边缘池循环池原粒细胞早幼粒中幼粒晚幼粒杆状核分叶核成熟池(髓内)分裂池(髓内)贮备池(髓内)干细胞99第二章一般血液学检验白细胞生长发育成熟阶段中性粒细胞：原始粒细胞→中性早幼粒→中幼粒→晚幼粒→杆状核→分叶核细胞嗜酸、嗜碱粒细胞：原始粒细胞→嗜酸（碱）早幼粒→中幼粒→晚幼粒→嗜酸（碱）粒细胞淋巴细胞：原始淋巴细胞→幼稚淋巴细胞→淋巴细胞单核细胞：原始单核细胞→幼稚单核细胞→单核细胞100第二章一般血液学检验中性粒细胞生长发育成熟阶段101第二章一般血液学检验一、白细胞计数

是测定单位体积（每升）血液中各种白细胞的总数。计数方法：1.显微镜计数法2.血细胞分析仪法

102第二章一般血液学检验１.参考范围

成人：男（3.97~9.15）×109/L；

女（3.69~9.16）×109/L；

儿童：（8～10）×

109/L

婴儿：（11～12）×

109/L

新生儿：（15～20）×

109/L103第二章一般血液学检验２.显微镜计数法原理用白细胞稀释液将血液稀释一定倍数并破坏红细胞后充入计数池，在显微镜下计数一定容积中的白细胞数，换算成每升血液中的白细胞总数。

104第二章一般血液学检验计数板105第二章一般血液学检验显微镜计数法106第二章一般血液学检验107第二章一般血液学检验计数方法与原则采血顺利，血量准确，稀释液量正确充分混匀后点样充入计数池计数9大方格中四角4个方格，弓形移动压线细胞数左不数右，数上不数下，白细胞数=N/4×10×稀释倍数×106/L出现大量有核红细胞应校正108第二章一般血液学检验（1）经验控制

血涂片RBC:WBC=500:1

WBC(×109/L)WBC/HP4~72~47~104~610~136~1013~1810~20血涂片白细胞分布密度：109第二章一般血液学检验二、白细胞分类计数

（differentialcount，DC）显微镜分类计数法110第二章一般血液学检验外周血五种白细胞111第二章一般血液学检验白细胞形态特征（一）中性粒细胞：圆形，胞质丰富，颗粒较多，细小均匀紫红色，核分叶或杆状，染色质粗，紧密成团，深紫红色嗜酸粒细胞：圆形，颗粒橘红色，粗大整齐均匀，充满胞质，核多二叶眼镜状，染色质粗，染紫红色嗜碱粒细胞：圆形，胞质量少淡红色，颗粒紫黑色，大小不均，排列不齐，常覆于核，核分叶不明显，染色质粗，着色浅有模糊感112第二章一般血液学检验白细胞形态特征（二）淋巴细胞：圆形，有大小，胞质很少，蓝色透明，无颗粒，偶见少数粗大不均紫红色嗜天青颗粒，核圆或肾形，染色质粗，紧密成团排列均匀，深紫红色单核细胞：圆形或椭圆形，胞质丰富，淡蓝或灰蓝色，毛玻璃样半透明，弥散细小灰尘样紫红色嗜天青颗粒，核呈肾形、马蹄形折叠，染色质疏松网状，淡紫红色113第二章一般血液学检验瑞氏染液氯化亚甲蓝（MCl）与伊红化钠（NaE）的甲醇溶液甲醇是Wright染料良好溶剂，固定细胞形态，将蛋白质沉淀为颗粒网状增加接触面提高染料吸附解离成M+（亚甲蓝）和E-（伊红）磷酸盐缓冲液（pH6.4-6.8）114第二章一般血液学检验瑞氏染色步骤1.血涂片平放于染色架2.瑞氏染液数滴覆盖血膜，固定1min3.加等量缓冲液与染液混匀，染5-10min4.流水冲去染液，吸（吹）干镜检115第二章一般血液学检验1.显微镜分类计数法

将血液制成涂片，经染色后在油镜下计数100个白细胞进行分类，求得各种类型白细胞的比值（百分率）。

116第二章一般血液学检验2.参考范围

cellpercentageabsolutevalueneutrophilicgranulocytebandform1~6％(0.04~0.6)×109/Lneutrophilicgranulocytesegmentedform50~70％(2.0~7.0)×109/Leosinophil0.5~5%(0.02~0.5)×109/L

basophil0~1%(0~1.0))×109/Llymphocyte20~40%(0.8~4.0))×109/L

monocyte3~10%(0.12~1.0))×109/L117第二章一般血液学检验显微镜分类计数要点良好的涂片染色低倍镜查看细胞分布、染色质量，片尾边缘有无巨大细胞和寄生虫，体尾交界处油镜分类，城墙式移动根据细胞大小、胞质色量、颗粒色形、核形密度等形态染色特征辨别种类,分别计数幼稚、异常白细胞包括在总数内有核红细胞报计数100个白细胞同时所见个数118第二章一般血液学检验血细胞分析仪法三分类：检测溶血后的白细胞体积按大小分成3类细胞群五分类：运用VCS技术分析数千个白细胞，根据其体积、核形、胞质颗粒特征参数，分成5类细胞群119第二章一般血液学检验三.白细胞计数与分类计数的临床应用

1.中性粒细胞（Neutrophil，N）：具有黏附，趋化，吞噬及杀菌等功能，在机体防御和抵抗病原菌侵袭过程中起着重要作用。数量最多，对白细胞总数影响最大。120第二章一般血液学检验光镜结构电镜结构121第二章一般血液学检验(1)生理性变化

年龄新生儿WBC升高，一般在20×109/L；3～4天降至10×109/L左右；3月后接近成人水平。122第二章一般血液学检验

运动、疼痛和情绪影响

当剧烈运动、疼痛和激动时，WBC↑↑，以N为主，为循环池和边缘池细胞重新分布和骨髓释放增加的结果。123第二章一般血液学检验日间变化

在安静和休息时WBC较低。活动和进食后较高。下午高于上午。一日之内最高值约为最低值的2倍。124第二章一般血液学检验妊娠与分娩

妊娠>5个月，WBC↑。通常在

(12~17)×109/L

，分娩时疼痛和产伤可更高，如无并发症产后1周内恢复正常。125第二章一般血液学检验（２）中性粒细胞病理性变化急性感染：化脓性球菌严重的组织损伤急性溶血急性大出血急性中毒肿瘤性增多骨髓增殖性疾病病理性增多126第二章一般血液学检验某些感染（G-杆菌、病毒感染）某些血液病（AA、粒缺）慢性理化损伤（放射、化疗）自身免疫性疾病（SLE）脾功能亢进病理性减少127第二章一般血液学检验２.嗜酸性粒细胞（eosinophil，Ｅ）

光镜结构电镜结构128第二章一般血液学检验嗜酸粒细胞功能杀伤细菌和寄生虫抗过敏反应调节超敏反应促炎症反应129第二章一般血液学检验（1）病理性增多

过敏性疾病寄生虫病某些传染病及传染病恢复期某些皮肤病血液病某些恶性肿瘤130第二章一般血液学检验（2）病理性减少见于伤寒、副伤寒、手术后严重组织损伤以及应用肾上腺皮质激素或促肾上腺皮质激素后。131第二章一般血液学检验3.嗜碱性粒细胞（

basophil，B）

光镜结构电镜结构132第二章一般血液学检验嗜碱粒细胞功能参与超敏反应133第二章一般血液学检验（1）病理性增多

慢粒：嗜碱性粒细胞可>10％;骨髓增生性疾病：如真性红细胞增多症;其他：如嗜碱性粒细胞白血病、脾切除后和某些转移癌。

134第二章一般血液学检验4.淋巴细胞（Lymphocyte，L）

光镜结构电镜结构135第二章一般血液学检验淋巴细胞功能细胞免疫体液免疫免疫调节136第二章一般血液学检验某些传染病：如风疹、百日咳等。某些传染病恢复期和肾移植术后发生排斥反应时;急慢性淋巴细胞