植物根围促生细菌防治土传病害的研究与新产品开发

植物根围促生细菌防治土传病害的研究与新产品开发第十二届全国土壤微生物学术研讨会暨第五届全国微生物肥料生产技术研讨会一、PGPR(植物根围促生细菌)功能？如何发挥？

二、国内外微生物菌剂产业发展现状

三、PGPR研究及防治土传病害的新产品开发。注：同一种微生物活体制剂，可以申报成为微生物肥料、微生物农药、微生物植物调节剂、微生物土壤调理剂。同一内容，不同名称。一、根围促生细菌（PGPR)可以具备哪些功能？防治病虫害，提高植物抗逆性。——生物农药，植物诱抗剂2.

促进生长、增产增收；提高农产品品质。——生物肥料3.

改良土壤，改善环境，达成新的生态平衡。——土壤调理剂PGPR：PlantGrowthPromotionRhizobacteria1.生防菌趋向根围游动3.形成生物膜屏障6.改良微生态4.诱导抗病微生物菌剂如何实现上述功能？2.抗生作用通过微生物之间的互作、微生物与肥料、微生物与植物的互作实现上述功能。5.根系分泌物与PGPR互作突变体研究发现，PGPR菌株的游动能力与小麦根腐病和小麦赤霉病防病效果呈正相关。（一）防病机理

1.细菌游动性与生防效果正相关（一）防病机理

2.抗生作用phzF基因

的聚类分析处理Treatment实验一Exp1实验二Exp2实验三Exp3病级Rating株高Shootlength病级Rating株高Shootlength病级Rating株高ShootlengthCK6.4A13.9D5.1A16.6C6.1AB14.0BCCK+MC6.0A14.2CD5.1A16.8C6.3A13.6C2-793.8CD15.7B------------HC9-07rif3.4D15.8A3.2C19.9A4.8C15.2ABHC9M74.1BC15.4B4.6AB18.4BC------HC9M6------4.5AB18.6AB------HC9M84.4BC14.9BCD4.5AB18.9AB------HC9M94.1BC15.1BC4.4B19.0AB5.3BC15.0ABHC9M5------4.3B18.9AB------HC9M104.8B14.8BCD4.3B18.5ABC------HC9M9comp------4.7C15.7AP.fluorecence在小麦根围产生PCA并对生防效果有重要贡献。

菌株

防治青枯病效果(%)WT增强突变体组减弱突变体组∆abrB∆ywcC∆sinR∆sinI∆tasA∆epsA-O361065.8±0.83b*75.6±3.38a74.8±2.75a81.5±0.53a31.4±2.37d48.1±2.89c28.7±1.31dCYBS-554.9±1.13c59.3±0.63b70.1±1.13a70.5±1.48a28.9±1.42e37.5±0.55d15.2±0.86fCYBS-673.9±0.12c74.8±2.75bc87.6±1.38a81.7±1.67ab60.6±0.63d65.8±0.83d44.4±4.41eCYBS-1255.5±0.50c71.6±0.38a57.4±1.38c67.3±0.67b38.8±1.25d42.0±2.03d15.2±0.86eCYBS-1351.0±1.01c56.3±1.25b71.3±1.25a67.9±0.07a25.4±2.09e31.7±1.67d11.9±1.15fCYBS-1464.6±1.62c66.8±0.75c81.0±1.00a76.8±1.79b27.7±1.04e36.4±0.65d15.2±0.85fCYBS-1964.0±1.01b76.5±1.50a74.4±4.37a72.8±0.20a46.3±1.25d53.7±1.31c31.7±1.67eepsA-OSpo0A~PSinRtapA-sipW-tasAYwcCSlrASinIAbrBWT∆abrB∆ywcC

∆sinR∆sinI∆epsA-O∆tasA增强突变体减弱突变体（一）防病机理

3.生物膜的形成与防病效果正相关枯草芽孢杆菌生物膜形成能力与生防效果正相关AR156：WTBC42：earlybiofilmformationBC52：delayedbiofilmformationBC50：nobiofilm72h,30℃48h,30℃

蜡质芽孢杆菌生物膜研究也得到同样的结论蜡质芽孢杆菌插入突变改变生物膜AR156能直接诱导叶部防卫相关基因的表达，而在根部却不能；AR156预处理后接种病原菌能加速并增强防卫相关基因的表达、活性氧的爆发和胼胝质的沉积。A:AR156处理植物后，根部和叶部防卫相关基因表达情况；B：AR156处理并接种病原菌后防卫基因表达（0-48小时）及活性氧、胼胝质沉积（12小时）情况。微生物菌剂可激活植物体内抗病信号途径，并潜伏抗性，一旦病原物侵染则唤起“免疫记忆”，从而以最低能耗提高作物免疫力。（一）防病机理

4.诱导抗病5.1RootexudatesregulatetheinteractionbetweenplantandPGPRspecificallythroughsiderophoreandchitinaseproducinggenesandleadtovariousgrowthpromotioneffectsonplants（一）防病机理

5.根系分泌物与PGPR的互作同一个PGPR菌株对不同植物产生不同影响是由于根系分泌物的不同；PGPR菌株分泌物的作用是植物专化性的。VolatilecompoundsofAR156enhancetheshootfreshweightofAtabcg30SecretionsofAR156increasetheshootfreshweightofAtabcg30andCol-0ThecolonizationofPGPRismodulatedbyrootexudatesTheexpressionofgenesinvolvedinplantbeneficialtraitsaremediatedbyrootexudates.PGPR菌体的定殖是受根系分泌物调节的；与植物生长相关特性的基因表达受植物根系分泌物调节。Zhouetal.2014-1，inpreparation（促生长）Zhouetal.2014-2，inpreparation（抗旱）1015202530(min)010204030(mAU)0100002000030000020000400001000006000080000Luciferaseactivities(AU,X10000)Time(hours)D04812162024ABC(TIC)(TIC)00.250.512.55(mM)E17.2min17.2min根系分泌物中的L-苹果酸能促进KinD激酶活性，从而促进生物膜的形成L-苹果酸鉴定图谱L-苹果酸诱导KinD激酶报道基因Psdp-lux

活性L-苹果酸诱导生物膜形成（最小培养基）Chenetal.2013.EM.15(3):848-864.DNA序列测定，分析微生物种群的变化（一）防病机理

6.对微生态的影响微生物菌剂可逐渐改变土壤微生态组成，减少病原物，增加植物根围微生物种群多样性。1、生防菌本身具有固氮、解磷、解钾的作用，刺激植物产生适量生长素；2、降解大分子有机物，提高有机肥利用率；3、保护细胞膜的完整性、维持较高水平的根系活力和叶绿素含量。（二）微生物菌剂的促生机理王春娟等。农业生物技术学报，2012,20(10):1097~1105.1、诱导植物体内多种抗逆基因更为持续的表达；2、显著提高植物体的抗氧化酶活性。3、抗旱过程中诱导气孔关闭。（三）抗逆机理（四）农产品使用微生物菌剂后自然保鲜的机理1.防治作物收获后病害；2.诱导抗逆基因表达；3.诱导SOD等多种保鲜相关物质的产生。Wangetal.2012.FoodChemistry.136:400-406.（与本校食品院的合作成果）细菌类：芽孢杆菌、假单胞菌、根瘤菌。真菌类：木霉、淡紫拟青霉、菌根真菌。病毒类：核型多角体病毒（杀虫剂）。主要的防病、促生微生物菌剂国内外PGPR菌剂产业发展现状世界农资巨头对微生物菌剂企业的收购热潮2012.6，瑞士生物农药公司Andermatt收购了德国生物农药公司24.95%的股权。Andermatt主要从事土壤内生细菌的生产，用于农业和园艺生产中。2012.7，农化巨头德国拜耳公司收购美国AgraQuest公司，价格4.25亿美元。拜耳公司（化工）2011年收入18亿欧元；

AgraQuest（微生物农药、微生物肥料）2011年收入4000万美元（连续三年获得最佳增长率奖）。2012.10，日本CBC集团收购意大利生物农药公司IntrachemBio，旨在拓宽生物技术产品范围。2012.12，农化巨头巴斯夫收购美国BeckerUnderwood（微生物种子处理剂）公司，价格10.2亿欧元。

BeckerUnderwood公司2012年的销售额为2.4亿美元（专营生物肥料）。公司利润率一般为40%以上。2013-2014，巴斯夫和拜耳分别收购了几家生物种业公司。发达国家微生物菌剂产业发展现状及前景技术较为成熟，企业具备强大的专业研发团队，其研发力量超过大多数高校和科研单位；已经完成初步的规模化市场开拓，市场接受程度较高；应用于绿色或有机农产品种植，具有较高的诚信度，农产品优质优价带来环保型农资产品的优价；随着收购热潮，微生物菌剂生产企业正从中小型快速走向大型或巨型。微生物菌剂融入植物全程耕作体系，以期与种业、肥业获得同步高速发展。中国微生物菌剂产业发展现状劣势：产品技术成熟的团队较少，企业基本不具备微生物菌剂专业研发团队；市场还处于初步的规模化开拓阶段，农民接受程度较低；应用于绿色或有机农产品种植，诚信度低，农产品优质不优价。一旦优价就是特优的价格。优势：1.国内有部分微生物制剂已经成熟，效果优良；2.中国市场巨大，各国农资公司均虎视眈眈。中国农资产业如何应对？鼓励有实力的农资企业部分转型从事微生物菌剂生产；鼓励高校、科研单位的科研团队直接为企业研发服务；鼓励跨行业合作（微生物可以与肥料配合使用、亦可混合制剂）。——依赖有效的合作机制。2.依靠政策进行快速规模化市场开拓；依靠终端市场质量控制，强制性增强市场接受程度。——依赖政府。3.中国市场巨大，充分把握地理优势，先占者先赢。——依赖企业销售团队。建议：二、防治土传病害的PGPR菌剂新产品设计开发及应用筛选体系的建立一依据对病原物的拮抗作用。徐刘平等。2008。江苏农业学报24(6):896-900。分析了田间辣椒的外生和内生相关细菌的种群结构,为探明蔬菜微生态细菌分布情况提供了数据；比较了不同生境的拮抗和防病效果。筛选体系的建立二（酶活性的作用）Weietal.2009.Anovelscreeningstrategytoidentifybiocontrolfungiusingproteaseproductionorchitinaseactivity（蛋白酶、几丁质酶）againstMeloidogyneroot-knotnematodes.BST.19(8):859-870.Weietal.2010.ScreeningofantagonisticbacterialstrainsagainstMeloidogyneincognitausingproteaseactivity（蛋白酶）.BST.20(7):739-750.筛选体系的建立三（真菌病害）Zhengetal.2011.AscreeningstrategyoffungalbiocontrolagentstowardsVerticilliumwiltofcotton.BC.56(2011)209–216.（373strains12)生防赋值-生防效果：92.6%相关性拮抗作用赋值-生防效果：51.2%细胞降解酶酶活-生防效果：38.8%……促生长赋值-促生效果：无相关性。筛选体系的建立三（病毒病）柯红娇等.2013.TY病毒病的生物防治菌株的筛选（857菌株60）生防赋值-生防效果：85%相关性如何同时防治具有不同特性的同一种病害？——根据病原物多样性来筛选。筛选体系的建立四：解决问题：微生物制剂防病功能的稳定性基于病原物多样性的功能菌株筛选

——以茄科植物青枯病为例Heueretal.2007.AEM.73(13):4379-4384.Xueetal.2011.FEMSMicrobiologyEcology.75(3):507-519.Xueetal.2012.AMB.97:1361–1371.筛选体系的建立五PGPR单菌筛选体系小结分离、纯化（出发菌株500-2000个）；实验室检测各项防病、促生相关性状（抑菌圈、各种酶活、IAA、噬铁素等）并赋值；ARDRA-PCR、BOX-PCR聚类分析，剔除重复菌株；（步骤1-3：6个月）温室试验初筛（3个月）；大田试验复筛（3个月）；针对不同地区、不同作物寻找合适的田间施用方法。我们的思路是：利用BCA库中多种生防因子不同的特性，做组合菌剂利用含多种病原的田间土温室内筛选有效组合菌剂大田实验检验组合菌剂的实际效果实际面对的问题是田间多种病害混合发生筛选复合菌剂用于防治辣椒混合土传病害田间混合发生的病害主要有：青枯病辣椒疫病根结线虫病筛选体系的建立（六）利用田间病土筛选抗病组合菌剂CK1CK1CK1CK1TreatmentTreatmentTreatmentLiS.M.,LiuH.X.,LiJ.Q.,XueQ.Y.,ChenL.F.,LuoY.M.,GuoJ.H.,2008.Selectionandevaluationofbacterialadmixturestobiocontrolmixedsoil-borndiseasesofRalstoniawilt,Phytophthorablight,andMeloidogyneroot-knotonbell.Submittedto

BioresourceTechnology

.PGPR复合菌剂筛选小结各菌在培养条件下的相容性检测，设计菌株组合（1个月）；针对混合型病害、促生效果进行温室筛选（3个月）；针对各种不同病害进行温室防效验证，针对不同作物进行促生、增产效果温室试验验证（3个月）；大田试验验证并开展田间施用方法研究。3（已获登记、通过有机评估，处于初步销售阶段）15

（产业化过程中）200（田间试验后）2700(生防菌种库)100,000(出发菌株)不同地区：土壤水植物（根围、叶围、体内）不同季节取样构建了病害生防菌株的筛选体系；

累积了2700多个有效菌株的种质资源库。微生物菌剂的产品中试剂型：1.水剂2.粉剂江苏省生物源农药工程中心已有产品三个系列（18项产品）细菌系列菌根真菌系列抗病蛋白类土传病害叶部病害、病毒病一、防治黄瓜根结线虫病害的蜡质芽孢杆菌AT31菌剂（使命/线灭，LS20120060）南京农业大学生防产品系列二、宁盾系列产品（）已获生物肥料正式登记，获得有机认证；24项中国发明专利，获得欧洲发明专利，12个生效国，完成主要菌株全基因组序列测定，正在申请特殊基因的国内外专利。获得3项省部级奖励（1/7，1/13，4/10）微生物菌剂的用法用量及田间使用要点——以“宁盾”为例施用时机（防病、促生）（1）播种时水剂稀释液浇灌，或用粉剂拌种；（2）移栽当天稀释液作为定根水浇灌；（3）避免使用毒性化学农药，避免与其他菌剂、毒性或高浓度化学制剂、生粪等混合使用。移栽时用量（水剂，防病）（1）重病田重茬地移栽时要使用上限用量（稀释300倍灌根，2毫升原液/株，番茄大棚5升/棚）。（2）轻病田可使用较低剂量（稀释600-900倍灌根，1毫升原液/株）。移栽时用量（水剂，无病田增产）（1）与腐熟的有机肥混合使用（0.5-1.0升/亩）；（2）可减少基肥用量；（3）正常施用基肥+微生物菌剂，如需收获果实，则开花前不再使用肥料。三、有机作物的病虫综合防治方案及效果水稻俞仪阳小麦王路遥番茄谢越盛西瓜李咏梅黄瓜张丽娜6.草莓管文芳7.芹菜李可8.青菜李可9.葡萄管文芳10.栝楼谢平11.半夏王超水稻病虫害绿色/有机防治方案生育期时期病、虫害名称绿色植保方案有机植保方案苗期6月中旬至7月下旬恶苗病、苗瘟、干尖线虫、稻飞虱、稻瘿蚊咪鲜胺拌种吡蚜酮、醚菊酯喷雾枯草芽孢杆菌菌剂（云南星耀）或“宁盾”A型（南京农大生物源农药创制）拌种移栽到返青期7月下旬至8月上旬纹枯病、稻瘟病如果发病轻则不防治。井冈·腊芽菌防治纹枯病枯草芽孢杆菌、“宁盾”B型喷雾，每隔10-15天一次。放鸭除草。分蘖拔节期8月中旬至9月上旬纹枯病、稻纵卷叶螟、稻瘟病、水稻胡麻斑病嘧菌酯、井冈霉素喷雾阿维菌素喷雾丙森锌喷雾“宁盾”B型喷雾；黄板/杀虫灯防虫孕穗抽穗期9月上旬至9月下旬稻飞虱、三化螟、二化螟、穗颈瘟、纹枯病使用噻嗪酮防治稻飞虱；吡蚜酮、醚菊酯喷雾，丙森锌喷雾微生物菌剂“宁盾”防治病害植物源农药除虫菊素防治虫害；黄板、定时使用杀虫灯防虫；建议养蛙除虫。灌浆成熟期10月上旬至10月下旬稻瘟病、稻曲病、穗颈瘟、纹枯病、二化螟、稻纵卷叶螟、飞虱多菌灵、阿维菌素，使用乙基多杀菌素防治稻纵卷叶螟，兼治大螟。井冈·腊芽菌防治纹枯病同上宁盾三号对水稻纹枯病的防治效果(安徽庐江，收获时)处理病害严重度（%）平均值防效（%）ⅠⅡⅢ宁盾三号35.5535.3233.6734.05±1.03c61.22井岗霉素（20%）27.4326.5225.6026.51±0.91b69.81清水对照89.2088.9485.3087.81±2.18a---对照宁盾对照宁盾宁盾处理30天后防病效果收获时的生防促生效果处理病害严重度(%)防效（%）地上鲜重（g）根重（g）生物量增加（%）其他生物制剂7.12±2.10a83.33±4.21a39.89±5.21a41.99±5.10a14.45宁盾10.25±1.25a75.06±2.33a50.27±4.70b49.97±5.56b61.86空白对照42.70±3.78b—31.32±6.12c30.61±2.98c—两种微生物菌剂防治水稻纹枯病及促生长温室试验宁盾对照其他生物制剂宁盾对照其他生物制剂有机质(g/kg)速效N（g/kg)有效P(mg/kg)速效K(mg/kg)PH值16.51.113.71008.2两种微生物菌剂防治水稻纹枯病的大田试验水稻品种：武育粳3号（高感纹枯病）防治对象：RhizoctoniasolaniAG1-IA地理位置：120.27378E,33.67546N;海拔:9m前茬作物：大麦

表2试验田土壤养分检测结果处理病害严重度(%)防效(%)其他生物制剂14.50±2.00a62.27±4.29a宁盾8.00±5.07a73.70±5.97a对照30.33±5.20b-武育粳3号（高感纹枯病），使用后70天的效果对照宁盾

其他生物制剂两种微生物菌剂防治水稻纹枯病的大田试验

两种生物制剂的促生效果统计（使用后100d）处理穴穗数（穗/穴）穗粒数（粒/穗）千粒重（g）亩产量（kg）产量增加（%）其他生物制剂17.40±1.10a96.20±7.50a28.29±0.91a730.506.00宁盾18.87±2.32b102.00±8.20a28.36±0.27a792.5014.50对照15.30±1.27c87.40±3.20b28.02±0.93a692.00-处理有机防治绿色防治空白对照防治日期调查日期百穴虫量百穴虫量百穴虫量成虫若虫成虫若虫成虫若虫7月21日7月29日0700051508月9日55850045508月16日12492820801007808月19日8月22日0140428286848月28日12136452522809月3日4517525251807859月6日9月11日885616868340

9月18日6420481122369月27日44122040696168169510月12日1540065105315稻飞虱药剂防治效果调查记载表

多菌合剂“宁盾”系列产品处理有机防治绿色防治空白对照防治日期调查日期束叶率（%）活虫（百穴）白叶率（%）束叶率（%）活虫（百穴）白叶率（%）束叶率（%）活虫（百穴）白叶率（%）7月21日7月29日0.051.250.110000.0600.07

8月9日00.800.2800001.250.38

8月16日000.37000.210.103.750.558月19日8月22日0.092.080.200.132.910.110.5815.200.54

8月28日0.850.330.670.561.810.321.561.920.89

9月3日1.5027.502.601.905.808.867.40116.6016.209月6日9月11日0.250.171.080.0618.300.395.79119.105.33

9月18日0.0900.070.0500.080.2700.12

9月27日0.0900.080.0600.080.1600.22稻纵卷叶螟药剂防治效果调查记载表

处理病害防效（收获前2周%）千粒重（g）稻谷亩产（kg）有机防治57.23±5.21b25.89±0.21b534.47±32.77a绿色防治60.54±3.15a25.57±0.62b550.76±38.50a空白对照--23.38±0.25c403.36±45.83b水稻病虫害全程有机防治田间示范水稻病虫害全程绿色防治田间示范2012年太仓南郊1600亩水稻全程绿色及有机病虫害防治试验

（南粳46）生育期时期病害名称绿色植保方案有机植保方案播种期10月下旬，11月上旬散黑穗病、腥黑穗病药剂拌种提前浇水，长草，翻地除草用微生物菌剂“宁盾”拌种冬前苗期、分蘖期11月中旬至12月20日杂草（达到防治指标时方须防治）、纹枯病如果发病轻则不防治。防治阔叶草（低毒农药“使它隆”），防治禾本科杂草（低毒农药“骠马”）。人工拔除返青、分蘖末期2月中旬拔节至孕穗期3月上旬至4月上旬杂草（若前期未除草）纹枯病、病毒病、锈病、根腐病、蚜虫。红蜘蛛、吸浆虫、麦茎蜂、黏虫等在扬州地区较少发生。除草剂同上微生物菌剂“宁盾”或低毒杀菌剂。低毒杀虫剂同上。红蜘蛛等不防治。微生物菌剂“宁盾”灌根（或大量喷施以至土壤）。阿维菌素防治红蜘蛛。抽穗至灌浆期4月下旬至5月上旬赤霉病、白粉病、纹枯病；蚜虫。微生物菌剂“宁盾”，低毒杀菌剂多菌灵、粉锈宁；低毒杀虫剂吡虫啉微生物菌剂喷施，植物源农药除虫菊素（蚜虫）成熟期5月上中旬蚜虫（如果穗部蚜虫严重）低毒杀虫剂同上。植物源农药除虫菊素小麦病虫害绿色/有机防治方案（扬州广陵区，2014.10）小麦根腐病小麦赤霉病有机防控体系对小麦赤霉病的田间防治效果（2013年）江苏淮安西瓜田间试验(2008)小麦根腐病小麦赤霉病处理病害严重度（%）生防效果（%）病害严重度（%）生防效果（%）有机防控22.12±0.07b61.56±1.836±0.87a58.31±1.5清水对照57.55±0.21a---77±0.41b---对照有机宁盾（小麦专用型）对小麦根腐病和小麦赤霉病的防治效果（江苏省农科院）对照有机番茄病虫害有机/绿色防治方案（江苏、广东、山东、新疆）生育期时期病害名称绿色植保方案有机植保方案播种期春播11月至翌年1月，秋播6-7月份可携带病毒病、疫病、叶霉病、斑点病等多种病害的病原菌药剂消毒,如50%多菌灵可湿性粉剂500倍液浸种50—55℃温水浸种15-30分钟，后移入凉水中散去余热，再浸泡4—5小时；或用“宁盾”一号A型粉剂拌种/水剂稀释液浸种幼苗期春季2月份至3月份，秋季7-8月份病害：猝倒病、立枯病、沤根病；虫害：蚜虫、地老虎等病害：用50%多菌灵拌土；喷恶霉灵、20％病毒A可温性粉剂500倍液、1.5％植病灵乳剂1000倍液；虫害：除虫菊素，乳油鱼藤酮

移栽当天用微生物菌剂“宁盾”灌根；及时拔除病株并补种，200－250倍波尔多液，虫害：昆虫性信息素，黄板、天敌生长期春季3月-5月份，秋季8-9月份病害：青枯病、早疫病、灰霉病、病毒病、叶霉病、病毒病、根结线虫病等；虫害：蚜虫、地老虎、红蜘蛛等。病害：用50%多菌灵拌土；喷恶霉灵、20％病毒A可温性粉剂500倍液、1.5％植病灵乳剂1000倍液；虫害：除虫菊素，乳油鱼藤酮

前茬重病田用微生物菌剂“宁盾”一号A型灌根；虫害：昆虫性信息素，黄板、天敌，诱虫灯、除虫菊素等成熟期春季5月下旬至7月上旬，秋季9-10月上旬病害：根结线虫病、早疫病、灰霉病、病毒病、叶霉病、病毒病等；虫害：蚜虫、地老虎、红蜘蛛等。病害：用50%多菌灵拌土；喷恶霉灵、20％病毒A可温性粉剂500倍液、1.5％植病灵乳剂1000倍液；虫害：除虫菊素，乳油鱼藤酮、吡虫啉等，红蜘蛛不防治。“宁盾”一号B型喷雾；虫害：昆虫性信息素，黄板、天敌，诱虫灯、除虫菊素等东海番茄青枯病田间试验(2013)处理病害严重度（%）生防效果（%）产量（Kg/亩）增产效果（%）宁盾1.20±0.42b98.6化学对照83.7±3.49a------对照处理宁盾一号对番茄混合型病害的效果番茄青枯病的防效（江苏东海试验地，2013）番茄青枯病的防效（福建试验地，2005）处理组对照西瓜病虫害有机防治方案（江苏、安徽、湖北）生育期时期病虫害名称绿色植保方案有机植保方案（甜度增加2-3）发芽期、幼苗期3月中、下旬枯萎病小地老虎、瓜蛆漂白粉浸种（枯萎病）多菌灵、农抗120（枯萎病）糖醋诱蛾消灭成虫（小地老虎）使用微生物菌剂“宁盾”粉剂拌种（枯萎病）或水剂稀释液浸种+嫁接苗（葫芦为砧木）；移栽当天“宁盾”一号A型稀释灌根（枯萎病）。早春多耕消灭虫卵（瓜蛆）用莴苣叶诱捕幼虫，于每日清晨到田间捕捉（小地老虎）抽蔓期4月下旬枯萎病、病毒病蚜虫多菌灵（枯萎病）吡虫啉（蚜虫）前茬重病田：第二次用“宁盾”稀释灌根（枯萎病和病毒病），植物源农药除虫菊素（蚜虫），“黄板”诱捕（蚜虫）结果期5月上旬到6月下枯萎病、病毒病蚜虫多菌灵（枯萎病）吡虫啉（蚜虫）

“宁盾”一号B型喷雾（防治病毒病，延长采收后自然保鲜期）植物源农药除虫菊素（蚜虫）“黄板”诱捕（蚜虫）有机西瓜种植方案之效果江苏淮安（2010）江苏高邮（2011）空白对照全程有机植保全程有机植保（前茬枯萎病发病率100%）宁盾两次宁盾一次江苏淮安（2014）草莓病虫害有机防治方案（江苏、安徽、湖北）生育期时期病虫害名称绿色植保方案有机植保方案幼苗阶段8月份育苗，9月初定植灰霉病75%百菌清可湿性粉剂800倍液、一薰灵烟薰剂进行熏蒸；用微生物菌剂“宁盾”浇灌苗床花芽分化阶段定植后一个月左右，即10月初枯萎病、黄萎病、杂草、蚜虫、温室粉虱虫害用10%吡虫啉可湿性粉剂2000倍液、或15%锐劲特悬乳剂2500倍液防治，病害可用75%百菌清可湿性粉剂600倍液、77%可杀得可湿性粉剂700倍液防治；杂草人工拔除、病害用微生物菌剂“宁盾”浇灌处理；植物源农药除虫菊素、苦参碱等防治虫害或黄斑诱杀。饲养林蛙或青蛙。矮化阶段

10月中下旬枯萎病、黄萎病、炭疽病、灰霉病32.5%丰收纯可湿性粉剂1000倍液、25%使百克乳油1000倍液防治；“宁盾”稀释液B型喷雾。现蕾开花阶段11月初枯萎病、黄萎病、炭疽病、灰霉病、畸形果除草剂同上微生物菌剂“宁盾”或低毒杀菌剂。低毒杀虫剂同上。红蜘蛛等不防治。“宁盾”稀释液B型喷雾防治病害。植物源农药除虫菊素防治虫害。南京八卦洲红杜鹃草莓病虫害有机防治效果2014.9.18日移栽当天准备处理空白对照有机防治移栽22天移栽43天

处理株高/cm茎粗/mm叶片数/片

叶绿素/spad花朵数/朵叶面积mm2有机防治16.85±1.35a3.35±0.49a6.80±0.92a35.03±1.31a4.80±1.23a206.73±14.27a对照12.75±1.65b3.00±0.34a5.20±0.79b30.33±1.86b1.50±1.08b135.35±15.21b

处理病害严重度（%）生防效果（%）对照42.50±1.17a——宁盾10.84±1.18b74.46±2.46表1宁盾对草莓黄萎病害的生防效果

处理病害严重度（%）生防效果（%）对照33.33±1.05a——宁盾9.26±0.52b72.18±2.44表2宁盾对草莓炭疽病害的生防效果表1-3有机防治效果（移栽43天）栝楼病虫害绿色/有机防治方案（新洋农场）生育期时期病虫害名称绿色植保方案有机植保方案播种期3月下旬至4月上旬杂草药剂拌种；低毒除草剂：“使它隆”、“骠马”灌水封闭，杀灭虫卵；翻地除草；微生物菌剂“宁盾”五号A型拌种出苗期4月下旬至5月上旬病毒病、蚜虫、飞虱菇类蛋白多糖水剂；低毒杀虫剂“吡虫啉”微生物菌剂“宁盾”五号A型灌根；植物源农药“除虫菊素”；杀虫灯（飞虱）藤蔓生长期5月中旬至6月上旬蔓枯病、蚜虫、飞虱低毒杀菌剂福星”；低毒杀虫剂“吡虫啉”同上现蕾期6月中下旬根结线虫病、杂草低毒农药“辛硫磷”；低毒除草剂：“使它隆”、“骠马”微生物菌剂“宁盾”五号A型灌根；中耕除草坐果期7月上旬至8月上旬炭疽病、根结线虫病、瓜绢螟低毒杀菌剂“咪鲜胺”低毒农药“辛硫磷”微生物菌剂“宁盾”五号A型灌根、B型叶面喷施采收期10月中旬-11月中旬杂草低毒除草剂：“使它隆”、“骠马”人工拔除对照处理对照处理宁盾对栝楼出苗率的影响宁盾对栝楼生长的影响两年中，宁盾对栝楼根结线虫的防治效果为56.6%,增产27.9%，使农户每亩增收3000多元。宁盾对栝楼生长的影响对照处理栝楼有机植保示范效果（射阳，新洋农场）生育期时期病虫害名称绿色植保方案（扬州广陵区）有机植保方案（常州，一号农场）播种期3月下旬至4月下旬韭蛆、杂草低毒农药“辛硫磷”低毒除草剂：“使它隆”、“骠马”灌水封闭，杀灭虫卵；翻地除草；微生物菌剂“宁盾”二号A型拌种育苗期5月上旬至6月中旬韭蛆、杂草低毒农药“敌百虫”；杂草防治同上微生物菌剂“宁盾”二号A型灌根；土壤控湿、中耕除草移栽期6月下旬至7月上旬韭蛆、灰霉病、杂草低毒农药“甲基阿维菌素”；低毒杀菌剂“科博”杂草防治同上微生物菌剂“宁盾”二号A型灌根、B型喷施及时排水，去除老叶病苗；中耕除草旺盛生长期8月下旬至10月中旬韭蛆、灰霉病、疫病、杂草低毒农药“|辛硫磷”；杂草防治同上微生物菌剂“宁盾”二号B型叶面喷施（技术员老朱说，宁盾对韭菜灰霉病有特效）；中耕除草生长缓慢期11月中旬至2月中旬韭蛆低毒农药“甲基阿维菌素”保持地面干燥、压沙处理韭菜病虫害绿色/有机防治方案芹菜病虫害有机防治方案（江苏、安徽）生育期时期病害名称绿色植保方案有机植保方案播种期7月上旬杂草视田间病害轻重而定。轻则不防治，重则可使用低毒除草剂“恶阔净”或者48%氟乐灵乳油。播种前旋耕除草；采用“宁盾”三号A型水剂浸种，或粉剂拌种。苗期7月中旬至九月中旬芹菜早疫病、病毒病、菌核病；蚜虫、美洲斑潜蝇等。发病初期开始喷洒70%甲基托布津可湿性粉剂600倍液防治菌核病病。20％病毒灵1000倍液防治病毒病。5%百菌清粉尘或5%扑海因粉尘防治早疫病。20%的速灭杀丁防治蚜虫，40%的绿菜保防治美洲斑潜蝇。杀虫灯、悬挂黄板或者使用其天敌防治虫害。或者植物源农药“苦参碱”等。定植期9月下旬软腐病