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文档简介
显微镜类型光学显微镜以可见光作光源显微镜电子显微镜(分辨率达0.2纳米,放大80-120万倍)以电子束作光源复式光学显微镜(分辨率达0.2微米,放大1250倍):单目或双目的光学复式显微镜。另外还有暗视野显微镜、相差显微镜及荧光显微镜等单式光学显微镜:如扩大镜(10倍以下)、解剖显微镜(200倍以下)。解剖显微镜实体显微镜由双筒目镜和物镜构成。它是利用侧上方或下方显微镜灯照明。在目镜内形成一个直立的放大虚像,可以观察未经加工的物体的立体形状、颜色及表面微细结构,并能进行显微解剖操作,也可以观察生物机体的组织切片。解剖显微镜又称“体视显微镜”、“实体显微镜”或“立体显微镜”。是一种具有正像立体感的显微镜,被广泛应用于生物学、医学、农林、工业及海洋生物等领域。解剖显微镜操作方法步骤2:调整目镜的观察瞳距,并调整目镜上的屈光度以找到2X下最佳的焦平面。步骤1:将显微镜置于一个对操作员舒适的工作台平台,然后打开反射光(表面光),在显微镜底座上放上一个式样,比如硬币,将显微镜的变倍旋钮旋到最低倍数2X,通过调节升降组找到2X下的大致焦平面(最佳成像面)。步骤3:利用以上方法,逐渐旋大变倍旋钮的倍数,适当调节显微镜的升降组,逐渐找到最大倍数4X下的焦平面。调节过程中,请利用硬币上比较明显的参照点比对成像的清晰度。解剖显微镜操作方法步骤4:将变倍旋钮旋到最低倍数2X,也许像会有一些失焦,此时请不要再调节升降组进行对焦,只需调节两只目镜上面的屈光度已适应眼睛的观察(屈光度因人而异)。此时,显微镜已经齐焦,即显微镜从高倍变倍到低倍,整个像都在焦距上。现在,同样的试样,我们不需要再调节显微镜的其他部件,只需要旋动变倍旋钮就可以轻松对试样进行变倍观察了。放大率、镜口率及视野宽度显微镜的总放大率等于:目镜原有放大倍数*物镜原有放大倍数如目镜16X,物镜40X,则:总放大率=16*40=640倍。物镜倍数数值孔径(镜口率N.A)工作距离(mm)10X0.257.6340X0.650.53100X(油镜)1.250.198物镜放大倍数越大,它的长度越长;物镜放大倍数越大,它的工作距离越小;镜口率越大,分辨能力越高。因此,被检物体细微结构的分辨力,并不完全取决于放大倍数,而主要是由镜口率决定的。放大率、镜口率及视野宽度所谓分辨力,是指分辨被检物体细微结构的能力,也就是判别标本两点之间的最短距离的本领。物镜的有效镜口率=物镜镜口率+聚光器镜口率
2放大率、镜口率及视野宽度视野宽度:目镜光栏所围绕的圆。视野宽度愈大,玻片标本的面积愈大,放大倍数愈小。所以,视野宽度与放大率成反比。孔径光阑(虹彩光圈)、聚光器调节螺旋及灯泡调节旋钮的使用低倍镜:视野大,必须开大光圈,保证大面积通光、聚光器调到最上、调节合适灯光亮度;高倍镜:视野小,光圈影响不大,但会变暗,所以聚光器调到最上,适当提高灯光亮度。实验二植物细胞的结构一、实验目的1.观察植物细胞在光学显微镜下的构造;2.掌握临时装片制作技术;3.观察认识植物细胞有丝分裂各个时期的主要特征。二、实验重难点1.掌握临时装片的制作技术;2.掌握植物细胞在光学显微镜下的构造。三、内容和方法1.制作临时装片2.观察植物细胞基本构造3.观察有丝分裂的各个时期1.制作临时装片取少量新鲜的植物材料,放在载玻片上的水滴中,再盖上盖玻片做成的玻片标本称为临时装片。制作临时装片操作流程:一清二滴三取四展五盖六吸七检实验器材:显微镜、载玻片、盖玻片、刀片、镊子、解剖针、培养皿、吸水纸、滴管、纱布等(染液)。1)清洁:左手的拇指和食指拿住载玻片的边缘,右手将纱布包住载玻片,沿一方向稍用力擦拭,重复数次将载玻片擦干净。要沿着一方向擦,不能来回擦。用同样的方法将盖玻片擦干净,擦盖玻片时要注意动作要更轻,力量要均匀。否则容易压碎。
一清二滴三取四展五盖六吸七检2)滴水:在载玻片的中央滴一小滴水(蒸馏水或凉开水)。其目的是使材料吸水膨胀,结构更明显,另外还可以调节折光率。
一清二滴三取四展五盖六吸七检3)取材:先用刀片在洋葱内表皮上切划出一个“井”字,“井”字中间部分约3-5平方毫米;再用镊子从“井”字中间部分的一角撕出一块方形透明的薄膜状的内表皮,迅速将其置于载玻片上预备好的水滴中。4)展平:如果放入材料发生卷曲,用解剖针及镊子小心把它展平。一清二滴三取四展五盖六吸七检5)盖盖玻片:盖盖玻片时要以盖玻片一侧的边缘与材料左边水滴的边缘相接触,然后慢慢放下,直到放平为止。盖玻片要尽量把空气赶跑,不能有太多气泡,以免影响观察效果。一清二滴三取四展五盖六吸七检6)盖盖玻片:盖好后要用吸水纸把周围的水吸干。7)镜检:先低倍后高倍一定在低倍镜下找到材料后中倍镜高倍镜一清二滴三取四展五盖六吸七检制作临时装片操作流程:一清二滴三取四展五盖六吸七检一清二滴三取四展五盖六染七吸八检方法:1、取下盖玻片,吸掉水份,滴染液,加盖玻片;2、不用取下盖玻片,在盖玻片一侧滴染液,在另一侧用吸水纸吸,将染液引上材料中,使材料着色。染色是为了更好地观察细胞的基本结构,是在装片制作过程中,用相应染液对材料进行染色,使细胞中各部分结构形态更为清晰。染色后细胞将变成死细胞!观察结束后1、从显微镜上取下玻片,按规定关闭显微镜并套上袋子;2、将永久装片放回装片盒中,临时装片拿到水池冲洗干净并放回原来器皿中;3、收拾好其他相关用具并放回原处;4、清洁台面并将垃圾倒入垃圾桶。三、内容和方法2.观察植物细胞基本构造
1)洋葱鳞片上表皮细胞:细胞壁细胞质细胞核液泡
2)番茄果肉离散细胞:有色体
3)黑藻叶细胞:叶绿体和胞质环流
4)柿胚乳细胞(永久装片):胞间连丝
5)洋葱根尖纵切片(永久装片):有丝分裂低倍观察1)镜检洋葱鳞片上表皮细胞细胞壁高倍观察液泡细胞核细胞质
1)镜检洋葱鳞片上表皮细胞其他结构??2)番茄果肉离散细胞用解剖针挑取果肉(取临近果皮的部分),涂放在载玻片上的水滴中,并用解剖针拨匀、拨散。番茄果肉细胞:有色体
细胞壁、细胞质、细胞核、液泡橙红色的圆形小颗粒---有色体,太成熟有色体变成不规则色素结晶。一条条的细胞壁皱褶---挑取时揉皱了细胞。3)黑藻叶细胞叶绿体和胞质环流
黑藻“叶片”只有1
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