第五节特殊杂质检查示例

第一节药物的杂质与限量第二节药物中杂质的检查方法第三节药物中一般杂质的检查第四节特殊杂质的检查与鉴定第五节特殊杂质检查示例特殊杂质：药物的生产和贮藏过程中可能引入的特有杂质,包括已鉴定的和未鉴定出的特殊杂质有关物质结构与待测物相似的特殊杂质特殊杂质的范围比有关物质的概念广一些章节药物名称杂质来源检查方法页码第六章阿司匹林双水杨酸酯游离水杨酸中间体/降解产物HPLC207对乙酰氨基酚对氨基酚对氯乙酰苯胺中间体/降解产物副产物离子对HPLCHPLC212212甲酚那酸2,3-二甲基苯胺中间体GC209二氟尼柳有关物质A有关物质B中间体/副产物正相TLC反相HPLC209萘普生6-甲氧基-2-奈乙酮中间体HPLC211第七章苯乙胺类药物酮体中间体UV226第八章盐酸普鲁卡因对氨基苯甲酸降解产物离子对HPLC245第九章硝苯地平杂质I，II氧化/光降解物HPLC杂质对照品259第十章苯巴比妥司可巴比妥钠酸度乙醇溶液的澄清度中心或碱性物质中间体中间体中间体/副产物272第十一章盐酸氯丙嗪杂质I、II、III、IV、V、VI中间体/副产物/降解产物离子对HPLC302章节药物名称杂质来源检查方法页码第十二章硫酸奎宁其他金鸡钠碱三氯甲烷-乙醇中不容物提取物HPLC/TLC318第十三章氢溴酸东莨菪碱易氧化物脱水降解产物高锰酸钾338第十四章维生素D前维生素D光照产物维生素E生育酚中间体硫酸铈滴定376第十五章硒的检查游离磷酸盐催化剂残留试剂比色法磷钼蓝比色396396第十六章青霉素类聚合物副产物分子排阻色谱法418/440庆大霉素组分多组分药物HPLC-ELSD431四环素差向异构体/脱水物降解产物HPLC438第十七章左氧氟沙星右氧氟沙星HPLC/苯丙氨酸453谷胱甘肽CE肝素离子色谱1阿司匹林中游离水杨酸p207水杨酸检查方法

对照法

反应原理三氯化铁反应

阿司匹林原料：0.1%；

硫酸铁铵

阿司匹林片：0.3%；先萃取阿司匹林肠溶片：1.5%；无水乙醇提取

阿司匹林胶囊：3.0%（HPLC法）阿司匹林泡腾片：3.0%（HPLC法）阿司匹林栓：1.0%（HPLC法）限量2对乙酰氨基酚中氨基酚和对氯苯乙胺p211对氨基酚的检查色谱柱：C8流动相：磷酸盐缓冲液（含四丁基氢氧化铵）/甲醇（90:10）检测波长：254nm检查方法：外标法限量：对氨基酚0.005%；其他0.1%；杂质总量：0.5%离子对色谱法离子对色谱法是在色谱系统中加入适当的离子对试剂，对离子性和中性化合物进行分离的色谱技术对于碱性药物的分析，所用的离子对试剂为烷基磺酸盐，如丁烷磺酸钠、戊烷磺酸钠、己烷磺酸钠、庚烷磺酸钠、辛烷磺酸钠、癸烷磺酸钠等流动相的pH值一般调至3－5酸性药物的分析，离子对试剂为季铵盐，如各种四丁基铵盐，以及三乙胺离子对试剂的含量一般为5－10mmol/L，随着离子对试剂浓度的增加，主成分保留时间延长。流动相的pH值一般调至弱碱性注意离子对试剂的纯度要高，如有杂质会干扰有关物质的检测离子对色谱法测定肾上腺素流动相：0.1M磷酸盐缓冲液/甲醇（9：1含0.02%SOSA）离子对色谱法测定Vc0.1M醋酸盐缓冲液pH4.2/乙腈（95：5）含0.03Mcetrimide中国药典中使用离子对色谱法进行有关物质检查的品种阿替洛尔辛烷磺酸钠盐酸噻氯吡啶及其制剂戊烷磺酸钠盐酸氯米帕明注射液庚烷磺酸钠酒石酸长春瑞宾及其制剂癸烷磺酸钠茶苯海明三乙胺盐酸维纳帕米三乙胺3、二氟尼柳中有关物质的检查p209二氟尼柳存在多条合成路线，产品中可能存在多种苯或联苯类合成中间体及副产物，它们的结构和性质差异较大。采用TLC（正相）和HPLC（反相）4、甲酚那酸中2,3二氨基苯胺p209检查方法：GC法问题：1：限量？2：为何用气相法？3：只用气相法是否就可以满足甲酚那酸中有关物质的检查？（二）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查p245酯降解成对氨基苯甲酸检查方法：2005TLC2010离子对HPLC色谱柱：C18流动相：磷酸盐缓冲液（含0.1%庚烷磺酸钠）：甲醇（68:32）检测波长：279nm系统适用性：盐酸普鲁卡因和对氨基苯甲酸分离度>2，理论板数按对氨基苯甲酸计>2000方法：对照品外标法限量：原料药、注射用灭菌粉末0.5%

注射液：1.2%5盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查p2456苯乙胺类药物中酮体的检查p226儿茶酚胺（去甲肾上腺素）化合物结构见p222表7-17苯乙胺类药物中酮体的检查p226苯乙胺类药物大多由其酮体（USP和JP称为Ketone,BP称为Phenones）氢化还原制得，若氢化不完全，则引入酮体杂质。去甲肾上腺素去甲肾上腺酮310nm酸度溶液的澄清度、中性或碱性物质8巴比妥类有关物质：P272酸度：主要控制药物中酸性杂质，用pH计测定pH5.7~6.6。氯仿-乙醇中不容物：主要控制不溶性杂质和无机盐类。其他金鸡纳碱：主要控制硫酸奎宁中的其他生物碱。Ch.P10版采用TLC法，BP采用HPLC法检查。硫酸奎宁中有关物质检查p318名称R1R2相对活性α-生育酚β-生育酚γ-生育酚δ-生育酚CH3CH3HHCH3HCH3H1.00.50.20.1***维生素E中生育酚的检查p376ChP收载的VEEP收载的VEUSP收载的VE维生素E中生育酚的检查p376维生素E的水解产物游离生育酚，在有氧或存在时，会进一步氧化成醌型化合物。因此游离生育酚暴露于空气和日光中，极易被氧化变色，顾应避光保存因此要维生素E要进行游离生育酚的检查维生素E中生育酚的检查p376游离生育酚具有还原性，采用氧化还原滴定法，用硫酸铈滴定游离生育酚被氧化生成生育醌后失去两个电子，滴定反应的物质的量比为1∶2，生育酚的分子量为430.7，即1mol的硫酸铈相当于1/2mol的生育酚。供试品溶液：2.5mg/ml(正己烷)对照溶液：25μg/ml(正己烷)色谱柱：填充柱或毛细管柱，内标：正三十二烷分流比：25：1，进样量：1μl，限量：α生育酚1.0%

其他单个杂质1.5%

各杂质的和2.5％维生素E中有关物质的检查p376维生素E中生育酚的检查p376ChP规定维生素E中所含游离生育酚不得超过2.15%，每1ml硫酸铈滴定液（0.01mol/L）相当于0.002154g的游离生育酚。

β–内酰胺类抗生素中聚合物的检查p417440青霉素类头孢类β–内酰胺类抗生素中聚合物的检查p417440n=0，二聚体；n=1，三聚体青霉素V聚合物照分子排阻色谱法测定色普条件与系统适用性试验用葡萄糖凝胶G－10（40~120mm）为填充剂，玻璃柱内径1.3~1.6cm，柱高度30~40cm。以pH7.0磷酸盐缓冲液为流动相A，以水为流动相B；流速为每分钟1.5ml；检测波长为254nm。分别以流动相A、B为流动相，取0.1mg/ml蓝色葡萄糖2000溶液200ml注入色谱仪，理论塔板数按蓝色葡萄糖2000峰计均不低于700。拖尾因子均应小于2.0。在两种流动相系统中蓝色葡萄糖2000峰保留时间的比之应在0.93~1.07之间，对照溶液主峰和供试品溶液中聚合物峰与相应色谱系统中蓝色葡萄糖2000保留时间的比值均应在0.93~1.07之间。另以流动相B为流动相，精密量取对照溶液200ml，连续进样5次，峰面积的相对标准偏差应不大于5％。对照溶液的制备取青霉素V对照品20mg，精密称定，加水溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.2mg的溶液。测定法取本品约0.4g，精密称定，置10ml量瓶中，加水使溶解并稀释至刻度，摇匀，立即精密量取200ml，注入液相色谱仪，以流动相A为流动相进行测定，记录色普图；另精密量取对照溶液200ml，注入色谱仪，以流动相B为流动相，同时测定。按外标法以峰面积计算，含青霉素V聚合物以青霉素V计，不得过0.6%。庆大霉素中组分的检查p430P424庆大霉素结构药物名称取代基R1取代基R2取代基R3其他基团庆大霉素C1CH3CH3H—庆大霉素C2HCH3H—庆大霉素C1aHHH—庆大霉素C2aHHCH3—庆大霉素C及其衍生物的结构庆大霉素（GM）中各活性组分，C1、C1a、C2及C2a的抗菌活性无明显差异，但其毒副作用和耐药性各不相同，进而导致因各组分的比例不同影响产品的效价和临床疗效。因此，各国药典均规定控制其各组分的相对百分含量。色谱条件：C18柱（pH0.8-8.0)；流动相：0.2M三氟乙酸－甲醇（92：8）；流速：0.6ml/min；检测器ELSD。系统适用性试验：测试液：庆大霉素＋小诺霉素（0.2mg/ml）分离符合要求，小诺霉素峰面积RSD≯2％含量测定标准品：小诺霉素0.2mg/ml,0.5mg/ml,1.2mg/ml标准曲线法，r>0.99计算庆大霉素中组分的检查p430替代对照品四环素（TC）tetracycline四环素中差向异构体和脱水物的检查p438差向四环素脱水四环素“梅花K”胶囊中毒案告破新华网湖南频道2002-4-4

新华网长沙９月１２日电（张振中

胡忠民）湖南株洲“梅花Ｋ”黄柏胶囊中毒案原因已经查明，广西厂方法人代表等５名有关责任人和３名株洲销售人员被警方抓获。

半个月来，服用“梅花Ｋ”中毒的人数已增加到６１人，４人病危。

据湖南省药检所检测表明：该厂添加了过期的、不宜制成胶囊的四环素，其含有的四环素降解产物远远超过国家允许的安全范围，特别是差向脱水四环素，服用后临床上表现为多发性肾小管功能障碍综合症，引起肾小管性酸中毒，产生乏力、恶心、呕吐等症状。四环素中差向异构体和脱水物的检查p438四环素中差向四环素、脱水四环素是临床上引起性反应的主要物质。因此需对其含量进行控制方法：HPLC左氧氟沙星中右氧氟沙星的检查p453左氧氟沙星左氧氟沙星为第四代氟喹诺酮类抗菌药物，是氧氟沙星的左旋光学异构体，其抗菌活性是外消旋体的数倍。Ch2010规定了有氧氟沙星异构体的检查药品名称销售额生产厂1左克左氧氟沙星11.05亿扬子江2凯洛欣脑苷肌肽注射液4.6亿吉林威威药业3凯时前列地尔4.5亿北京泰德4拜糖平阿卡波糖4.2亿拜尔5新天欣头孢他啶4.2亿广州天欣6泰能亚胺培南西司他丁钠4.0亿杭州默沙东7洛赛克奥美拉唑3.9亿阿斯利康8骁悉吗替麦考酚酯3.8亿罗氏上海9菌必治头孢曲松钠3.7亿罗氏上海10达力新头孢呋辛3.7亿深圳制药左氧氟沙星中右氧氟沙星的检查p453色谱柱：C18流动相：硫酸铜-D-苯丙氨酸溶液：甲醇（82:18）检测波长：294nm左氧氟沙星中右氧氟沙星的检查p453谷胱甘肽中有关物质的检查p453谷胱甘肽中有关物质的检查p453谷胱甘肽中有关物质的检查p453检查方法：毛细管电泳法CE电泳液：磷酸盐缓冲液pH1.8温度：25ͦͦC检测波长：200nm电压：20KV运行时间：45min章节药物名称杂质来源检查方法页码第六章阿司匹林双水杨酸酯游离水杨酸中间体/降解产物HPLC207对乙酰氨基酚对氨基酚对氯乙酰苯胺中间体/降解产物副产物离子对HPLCHPLC212212甲酚那酸2,3-二甲基苯胺中间体GC209二氟尼柳有关物质A有关物质B中间体/副产物正相TLC反相HPLC209萘普生6-甲氧基-2-奈乙酮中间体HPLC211第七章苯乙胺类药物酮体中间体UV226第八章盐酸普鲁卡因对氨基苯甲酸降解产物离子对HPLC245第九章硝苯地平杂质I，II氧化/光降解物HPLC杂质对照品259第十章苯巴比妥司可巴比妥钠酸度乙醇溶液的澄清度中心或碱性物质中间体中间体中间体/副产物272第十一章盐酸氯丙嗪杂质I、II、III、IV、V、VI中间体/副产物/降解产物离子对HPLC302章节药物名称杂质来源检查方法页码第十二章硫酸奎宁其他金鸡钠碱三氯甲烷-乙醇中不容物提取物HPLC/TLC318第十三章氢溴酸动莨菪碱易氧化物脱水降解产物高锰酸钾338第十四章维生素D前维生素D光照产物维生素E生育酚中间体硫酸铈滴定376第十五章硒的检查游离磷酸盐催化剂残留试剂比色法磷钼蓝比色396396第十六章青霉素类聚合物副产物分子排阻色谱法418/440庆大霉素组分多组分药物HPLC-ELSD431四环素差向异构体/脱水物降解产物HPLC438第十七章左氧氟沙星右氧氟沙星HPLC/苯丙氨酸453谷胱甘肽CE肝素离子色谱1.杂质来源

原料引入、降解产生

（一）异烟肼中游离肼的检查

2.检查方法：

薄层色谱法（TLC）杂质对照品法59【检查】游离肼照薄层色谱法（附录VB）测定。系统适用性试验取本品与硫酸肼各适量，加丙酮-水（1:1）溶解并制成每1ml中分别含异烟肼100mg及硫酸肼0.08mg的混合对照品溶液，吸取5µl，点于硅胶G薄层板上，以异丙醇-丙酮（3:2）为展开剂，展开，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液，15分钟后检视。游离肼与异烟肼的斑点应清晰分离。游离肼的Rf值约为0.75，异烟肼的Rf值约为0.56。硫酸肼检测限为0.2µg。ChP201060测定法取本品，加丙酮-水（1:1）溶解并制成每1ml中约含100mg的溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼加丙酮-水（1:1）制成每1ml中约含0.080mg（相当于游离肼20µg）的溶液，作为对照品溶液。吸取上述两种溶液各5µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇-丙酮（3:2）为展开剂，展开，晾干，喷以乙醇制对二甲氨基苯甲醛试液，15分钟后检视。在供试品溶液主斑点前方与对照品溶液主斑点相应的位置上，不得显黄色斑点。（计算限量）ChP20106162（二）尼可刹米中有关物质的检查

2.检查方法

HPLC

高低浓度对比法配制两种不同浓度的对照溶液1.杂质来源

原料引入、降解产生

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