第6章 蛋白质的生物合成-2

蛋白质的生物合成第6章1Proteinsynthesis第三节蛋白质合成后的折叠和修饰刚从核糖体上释放出来的多肽链是没有生物活性的，要经过氨基酸修饰、蛋白质的折叠等“成熟加工”的过程才具备生物活性。2Proteinsynthesis一、蛋白质的折叠1蛋白质的正确折叠是蛋白质行使功能的基础3Proteinsynthesis具有一定空间构象的蛋白质才具有生物学活性4Proteinsynthesis蛋白质的不正确折叠会导致蛋白质功能的丧失，甚至引发严重的疾病。“蛋白质折叠异常疾病”“蛋白质构象病”5Proteinsynthesis研究蛋白质折叠不仅具有理论意义，对疾病的预防和治疗都具有重要的意义。6Proteinsynthesis7Proteinsynthesis朊病毒老年痴呆Kuru病Creutzfeldt–JakobDiseaseMadCowDisease…………8Proteinsynthesis9Proteinsynthesis朊病毒*朊病毒(prion)由Prusiner首先提出意思是proteinaceousinfectiveagent，他获得1997年诺贝尔奖。10Proteinsynthesis2蛋白质正确折叠的保障机制蛋白质的正确折叠是如此重要，细胞内必定有一套机制，保证蛋白质的正确折叠，以及将错误折叠的蛋白质及时改正或予以降解。11ProteinsynthesisRNaseA只是特例能够自发折叠的RNaseA只是细胞中的特例，大多数蛋白质的正确折叠都需要其它蛋白质分子(分子伴侣)的协助。12Proteinsynthesis分子伴侣(molecualrchaperone)最早在大肠杆菌中发现，称为热激蛋白或热休克蛋白(heatshockprotein)，现在发现广泛存在于各种动植物细胞中。13Proteinsynthesis分子伴侣的成员很多，可以分为2大类第1类与核糖体结合，如触发因子、新生链结合复合物等。第2类不与核糖体结合，如热激蛋白hsp40、hsp70、hsp60以及二硫键异构酶、脯氨酰-顺反异构酶等。14Proteinsynthesis现在发现，细胞为了保证有功能的蛋白质的形成，从多肽链合成开始，一直到正确折叠完成，输送到发挥功能的场所，蛋白质分子一直都有分子伴侣协助。15Proteinsynthesis分子伴侣主要起以下作用√封闭多肽链暴露出来的疏水片段，保护片段不与其它蛋白质错误的发生作用。√在蛋白质合成开始时，防止先合成出来的多肽链错误聚合。√识别错误折叠的蛋白质，帮助其恢复正确构象或将其降解。16Proteinsynthesis这些任务的完成，需要2种不同功能的分子伴侣一类是hsp70家族，包括hsp70,hsp40,GrpE等，广泛存在于细胞质、内质网、叶绿体和线粒体中，可以在蛋白质刚开始合成时与目标蛋白结合发挥功能。17Proteinsynthesis第2类是以大寡聚体形式存在的伴侣蛋白系统。这个系统形成一种具有空腔结构的复合物，待折叠或错误折叠的蛋白质进入空腔折叠为正确构象的蛋白质，再释放出来。18Proteinsynthesis例如内质网中就存在这两种形式的分子伴侣Bip蛋白与刚离开核糖体的新生链结合，防止其错误折叠；hsp60具有桶状结构，协助未完成折叠或错误折叠的蛋白质进行正确折叠。蛋白质的分子伴侣作用机制*19Proteinsynthesis分子伴侣在细胞中具有多种生理功能，在蛋白质的运输过程中也有重要作用，将在后面再叙述。20Proteinsynthesis二、蛋白质的加工修饰从核糖体中释放出来的多肽链不一定具有生物学活性，只有经过细胞内各种修饰处理后，才能成为有活性的成熟蛋白质，这个过程称为“蛋白质的翻译后加工”。21Proteinsynthesis（1）从结构方面来看，蛋白质的加工修饰可以分为3种：a:氨基酸侧链的小改变；b:特定氨基酸残基上连接上体积较大的基团，例如辅酶、辅基、胆固醇、糖、脂类等；c:肽链的剪切。22Proteinsynthesis（2）从结果来看，蛋白质的修饰可以是可逆的(如磷酸化)，也可以是永久不可逆的(如二硫键的形成)等。23Proteinsynthesis一般来说，原核细胞中的蛋白质没有复杂的翻译后加工修饰系统，多肽链合成后就具备生物学活性，可以直接使用；但真核细胞却具有复杂的翻译后修饰加工系统；没有这些修饰加工，多肽链就不具备生物学活性。24Proteinsynthesis这也是原核与真核细胞在蛋白质合成方面的重要区别之一。在原核系统中表达真核细胞基因时，往往产物由于无法进行修饰加工而没有活性；或活性很低；或虽有活性，但当作为药物进入人体后会引发严重的免疫反应。25Proteinsynthesis2特定氨基酸残基上连接上体积较大的基团，例如辅酶、辅基、胆固醇、糖、脂类等；1氨基酸侧链的微小修饰；3肽链的剪切。蛋白质的加工修饰的常见形式26Proteinsynthesis（一）侧链氨基酸的微小修饰1二硫键的形成27Proteinsynthesis二硫键在维持蛋白质的高级结构中起非常重要作用二硫键可以在相邻或不相邻的巯基(－SH)之间形成，细胞中的谷胱甘肽在二硫键的形成中起重要作用，还原型与氧化型谷胱甘肽的比例对二硫键的形成起重要作用。细胞内质网中有二硫键异构酶，可以促使正确的二硫键的形成。大肠杆菌细胞质中的蛋白质没有二硫键。28Proteinsynthesis真核和原核中二硫键的形成29Proteinsynthesis在蛋白质的分离纯化过程中，为了使含-SH的氨基酸不被氧化，常常加入一些含有巯基的化合物来起保护作用。巯基乙醇30Proteinsynthesis2氨基酸的甲基化、磷酸化、乙酰化等磷酸化蛋白质的磷酸化是调节活性的重要方式31Proteinsynthesis羧化32Proteinsynthesis甲基化33Proteinsynthesis蛋白质的磷酸化、乙酰化、甲基化、羟基化等等属于比较简单的修饰，但是对于蛋白质的活性调节起着非常主要的作用。尤其是磷酸化；组蛋白的乙酰化对于基因的转录是必需的。这些修饰一般发生在含有巯基、羟基等的氨基酸上，如丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸等。34Proteinsynthesis参与蛋白质合成的基本氨基酸只有20种，但是在成熟蛋白质分子中发现的氨基酸却不止20种，它们均是氨基酸在翻译后的修饰过程中形成的，如羟脯氨酸、羟赖氨酸等。35Proteinsynthesis36Proteinsynthesis37Proteinsynthesis38Proteinsynthesis39Proteinsynthesis（二）肽链的剪切和剪接加工1新生肽起始氨基酸的去除起始氨基酸－甲酰甲硫氨酸或甲硫氨酸仅仅是个多肽合成的信号，多肽合成结束后一般被切除。细胞内活性蛋白质的第一个氨基酸往往不是甲硫氨酸。真核细胞中50％的蛋白的第1个氨基酸都被乙酰化。40Proteinsynthesis2剪切常见的几种剪切方式（1）分泌型蛋白质信号肽的切除41Proteinsynthesis（2）前体蛋白的加工刚合成出来的多肽链是没有活性的前体，要经过加工才能变成有活性的蛋白质。如参与食物中蛋白质消化的多种蛋白酶，肽类激素、神经肽类、生长激素、跨膜水解酶等。42Proteinsynthesis前体蛋白质的剪切加工有多钟形式，有的是切除一端的部分肽链，余下的就是具有活性形式，如胰蛋白酶的激活。胰蛋白酶原胰蛋白酶43Proteinsynthesis胰凝乳蛋白酶原胰凝乳蛋白酶44Proteinsynthesis有些则是切除多肽中间的部分氨基酸，即多肽的内部切除，余下的部分才具有活性，如胰岛素的激活，实验表明胰岛素刚合成出来时是一条肽链，没有活性，在运输的过程中被加工切割，形成活性形式的。45Proteinsynthesis前胰岛素原胰岛素原胰岛素46Proteinsynthesis参与加工的酶类氨肽酶羧肽酶内肽酶如Furin,PC2,PC3等47Proteinsynthesis(3)活性肽的剪切释放刚合成的多肽链含有多个蛋白质前体，经剪切后，形成多种有活性的蛋白质或多肽分子。如265个氨基酸组成的鸦片促黑皮质原(POMC)，经加工后形成促肾上腺皮质激素(39肽)、β-促黑素(18肽)、β-内啡肽(11肽)、β-脂解释放激素(91肽)等。48Proteinsynthesis3肽链的剪接加工这里的剪接加工是指蛋白质前体通过多肽的剪辑，除去多肽中间的某些氨基酸片段，再将余下的氨基酸片段按照一定的顺序结合起来，最终形成成熟的，有活性的蛋白质的现象。49Proteinsynthesis这个过程与mRNA前体的加工过程类似，被剪掉的氨基酸序列称为“蛋白质的内含子”、“肽间插入序列”、“间隙蛋白”等。50Proteinsynthesis这些现象提示我们，不仅DNA与mRNA之间不是简单的线性关系，而且连模板mRNA的序列与最终形成的蛋白质的氨基酸序列之间也不是简单的对应关系。51Proteinsynthesis（三）添加化学基团(化学编辑)化学编辑－就是指蛋白质翻译后添加化学基团的这种加工修饰方式，包括一级结构的修饰和高级结构的修饰。52Proteinsynthesis细胞中单纯由氨基酸组成的蛋白质(简单蛋白质)较少，多数蛋白质都是属于结合蛋白质——糖蛋白、脂蛋白、色蛋白以及带各种辅基的蛋白质。这些都是在蛋白质翻译后的加工修饰过程完成的，属于一级结构的修饰。53Proteinsynthesis最简单的一级结构的修饰是指个别氨基酸的修饰。成熟蛋白质中出现的、20种基本氨基酸之外的蛋白质氨基酸都是经过修饰的。54Proteinsynthesis高级结构的修饰主要是指亚基的聚合55Proteinsynthesis下面介绍2种重要的化学修饰脂酰化糖基化56Proteinsynthesis在蛋白质的转运过程中，酰基转移酶催化脂肪酸与丝氨酸或苏氨酸中的－OH结合，产生脂蛋白。常见的脂酰化有棕榈酰化、豆蔻酰化、异戊二酰化以及胆固醇化等。脂酰化57Proteinsynthesis蛋白质的糖基化(glycosylation)细胞内许多重要的蛋白质都是糖蛋白。外源蛋白基因在大肠杆菌内表达，常常产生没有糖基化的蛋白，结果导致蛋白没有活性，或虽然有活性，但活性降低；或产生免疫原性。糖蛋白的糖基化是一种非常重要的修饰方式。58Proteinsynthesis蛋白质的糖基化过程是在内质网和高尔基体内进行的。一般来说，寡糖与蛋白质连接的方式主要有2类：N-连接和O-连接。59ProteinsynthesisN-连接是指寡糖分子通过N-糖苷键与天冬酰胺的-NH3侧链相连。N-连接识别的靶序列为Asn-X-Ser/Thr，其中X不能是脯氨酸(Pro)或门冬氨酸(Asp)。一般N-连接中的糖分子数目在5个以上。N-连接过程是起始于内质网，完成于高尔基体中。60ProteinsynthesisN-连接61ProteinsynthesisO-连接是指寡糖通过O-糖苷键与蛋白质中的带有-OH的氨基酸如丝氨酸、苏氨酸或羟赖氨酸中的－OH连接。O-连接的一般寡糖数目较少，1－4个左右。O-连接的过程全部在高尔基体中完成。62ProteinsynthesisO-连接63ProteinsynthesisO-连接的寡糖合成是由当新合成的蛋白质通过高尔基体时，依次加入单糖单位而形成。首先由内质网腔或顺面高尔基体中的N-乙酰半乳糖氨(GalNAc)转移酶将GDP-GalNAc前体中的GalNAc转移到蛋白质的-OH上。64Proteinsynthesis然后，蛋白质进入高尔基体的反面后，其他的单糖，如半乳糖、N-乙酰葡萄糖胺、唾液酸和果糖等均可从他们的糖基核苷酸前体上转移到GalNAc上。不同的蛋白质糖基化时加入形成的寡糖数目不等。65ProteinsynthesisO-连接糖链的形成66ProteinsynthesisN-连接的寡糖结构和形成比O-连接的要复杂的多。可以分为高甘露糖型寡糖和复合型寡糖。但N-连接的糖链都具有1个5糖核心结构，由3个甘露糖和2个N-乙酰葡萄糖胺组成。其他单糖再连接在这个5糖核心结构上，从而构成更加复杂的糖链结构。67ProteinsynthesisN-连接糖链的形成68ProteinsynthesisN-连接糖链的形成69ProteinsynthesisN-连接的糖基化过程比O-连接的糖基化要复杂的多。但总要在先完成5糖核心后再续续下去。而且如果蛋白质没有折叠成功，则N-连接的糖基化也不能完成，只能进行初级的糖基化过程。70Proteinsynthesis蛋白质的糖基化的2种主要形成71Proteinsynthesis糖基化还有2种形式，称为糖基磷脂酰肌醇(GPI)锚定(glycosylphosphatidylinositol(GPI)-anchor)以及C-甘露糖化(C-mannosylation)。在此不再介绍。72Proteinsynthesis细胞表面糖蛋白上的糖链可以充当“天线”，在细胞识别、信号传导中具有重要意义。而这些糖蛋白不同程度和不同种类的糖基化也与细胞内的生理活动、外界的环境变化密切相关。73Proteinsynthesis例如，科学家发现，某些后生动物体内的分解蛋白质的复合体的活性可以因为其中一个亚基中的氨基酸被β-N-乙酰葡萄糖胺化(O-GlcNAc)而降低活性，而糖基化的水平则与细胞的营养状态有关。74Proteinsynthesis75Proteinsynthesis细胞内还有许多蛋白质活性受到这种糖基化调节，类似蛋白质的磷酸化调解。76Proteinsynthesis蛋白质的糖基化对于蛋白质来说是如此的重要，目前已经形成一种专门的糖基化研究方向，叫做糖基化工程。77第四节蛋白质的运转Proteinsynthesis--------targetting蛋白质的合成发生在细胞质的核糖体中，那么合成出来的蛋白质将被运送到什么地方去？是如何运输的呢？78Proteinsynthesis一、新合成的蛋白质分选和运输的一般细胞学过程一般来说，蛋白质在细胞质的核糖体中合成后，有几个去向：留在细胞质中；运往各种细胞器中；运往细胞外(分泌蛋白)。蛋白质的去向是由本身带有的分选运输信号决定的。79Proteinsynthesis核糖体中合成的蛋白质去处8081Proteinsynthesis蛋白质运往细胞器时都要穿越细胞器的膜，蛋白质的跨膜途经一般有3种方法：一是通过核孔，这是运往细胞核的蛋白使用的方法。二是利用膜上的运转蛋白将蛋白质运进细胞器，如进入内质网、叶绿体、线粒体、过氧化物体等的运输。三是利用囊泡运输，囊泡包裹蛋白，与第1细胞器分离，运输后与第2细胞器的膜融和，将蛋白质释放到第2细胞器中。82Proteinsynthesis利用遗传学或生物化学的方法已经查明细胞内分泌蛋白的运输路线是细胞质粗糙型内质网运输小泡高尔基体分泌小泡胞外83分泌蛋白从内质网运到高尔基体的过程就是通过“囊泡”进行的。84分泌蛋白的分泌途经*高尔基体是蛋白质运输途中的分拣中心1

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蛋白质的运输*85Proteinsynthesis二、蛋白质跨膜运转的相关理论合成蛋白质的核糖体有的游离在细胞质中，称为游离核糖体，或与内质网结合，称为膜结合核糖体。游离核糖体上合成的蛋白质一般保留在细胞质中，或重新定位于其它地方。膜结合的核糖体合成的蛋白质主要是膜蛋白、分泌蛋白以及溶酶体、内质网、高尔基体中的蛋白。8687Proteinsynthesis真核细胞的蛋白质运输主要采取2种方式一是边合成边运输的“共运输”途经经过内质网的分泌蛋白运输就是采用“共运输”途经二是翻译结束后才运输的“翻译后运输”途经包括线粒体、叶绿体、过氧化物体、乙醛酸体等细胞器中蛋白质的运输采用这种形式。88Proteinsynthesis--------targetting1、“共运输”途经－信号肽假说信号肽假说是解释分泌蛋白运输的理论，目前可用于解释动植物及微生物中的分泌蛋白质运输。1975年由Blobel和Dobberstein提出89Proteinsynthesis--------targetting分泌蛋白与细胞质的胞浆蛋白主要区别是在多肽链的N端，分泌蛋白含有一段13－35氨基酸长度的信号肽或称为信号序列。不同分泌蛋白的信号肽序列不完全相同，但都有以下共同特征：90Proteinsynthesis--------targetting一般信号肽位于多肽的N端，长度13－35氨基酸；可以分为3个区段，N端是带有正电荷的氨基酸；中间是10－15个氨基酸长度的疏水区，可以形成α螺旋；最后一段氨基酸也可以形成α螺旋。2个α螺旋形成发卡结构，使蛋白质易于嵌入膜中。后来发现也有的信号肽位于多肽链中间91Proteinsynthesis--------targetting一些分泌蛋白的信号肽序列92Proteinsynthesis--------targetting信号肽假说的基本内容蛋白质开始是在细胞质中的游离核糖体上进行合成的,首先合成出来的是N端的信号肽。信号肽出来之后就被细胞质中的信号识别体(signalrecognitionparticle,SRP)识别并结合,使蛋白的合成暂时中止,形成一个核糖体-SRP-mRNA的复合物。93Proteinsynthesis--------targetting复合物中的SRP和核糖体分别与内质网表面的SRP受体和核糖体受体结合,并同时与内质网上的一个蛋白质转位复合物结合。94Proteinsynthesis--------targetting经过一系列的反应之后，核糖体与ER结合在一起,SRP从信号肽上被释放出去，循环利用。蛋白的合成在内质网的表面重新开始。95Proteinsynthesis--------targettingER膜上由蛋白质转位复合物形成一个孔，新生的肽链就由此进入核糖体的内腔,通过孔时,信号肽被ER腔内表面的信号肽酶切除。余下合成的肽链合成后就直接释放在ER内腔中。之后被运输到高尔基体,再被分泌到细胞外。96*信号肽假说97Proteinsynthesis--------targetting2“翻译后运输”途经－导肽假说导肽位于多肽链的N端，含有20－80个氨基酸；带正电荷的氨基酸比较多，分散在不带电荷的氨基酸中间；不含有带负电荷的酸性氨基酸；羟基氨基酸含量较高；有形成两亲α螺旋的能力。98Proteinsynthesis--------targetting导肽理论是解释蛋白质进入线粒体、叶绿体等细胞器的理论。蛋白在游离的核糖体上合成后，以前体的形式释放在细胞质中；由导肽牵引这些蛋白质跨膜进入各种细胞器中。99Proteinsynthesis--------targetting不同细胞器需要的导肽性质是不同的。线粒体中蛋白质可以定位于不同场所，需要的导肽性质也是不同的，或还需要其它的信号。100Proteinsynthesis--------targetting3分子伴侣参与蛋白质的跨膜运输蛋白质的折叠也是在运输的过程中进行的。一般来说，蛋白质在跨膜前保持未折叠状态，进入细胞器内部，才开始进行折叠。101Proteinsynthesis--------targetting分子伴侣的作用是在蛋白质运输到指定部位前，延迟蛋白质的折叠，保持蛋白质的不折叠状态，防止其错误折叠；而当蛋白质运输到目的地后，迅速协助蛋白质折叠成正确构象。102Proteinsynthesis--------targetting分子伴侣是指能与其它构象不稳定的蛋白质结合并使之稳定的一类蛋白质，它们通过与多肽的结合来帮助被结合的多肽在体内的折叠、组装。转运或降解等。完成任务后又从多肽山释放下来，分子伴侣是细胞内蛋白质折叠组装的重要调解者。103Proteinsynthesis--------targetting4蛋白质的正向运输和逆向运输正向运输是指在蛋白质的内质网-高尔基体运输体系中，运载蛋白的小泡连续不断的从内质网向高尔基体的移动方向称为蛋白质的正向运输。104Proteinsynthesis--------targetting蛋白质的逆向运输是指某些在内质网中滞留的蛋白质进入高尔基体后通过特殊的信号，再从高尔基体返回内质网的小泡运输过程。逆向运输对于维持内质网系统的稳定十分重要。105Proteinsynthesis--------targetting蛋白质的正向运输和逆向运输106Proteinsynthesis--------targetting三、蛋白质的跨膜运输1分泌蛋白质的运输2细胞质膜上蛋白的运输3内质网膜中蛋白的运输4溶酶体中的蛋白的运输5叶绿体和线粒体中蛋白的运输6细胞核内的蛋白运输107Proteinsynthesis--------targetting1分泌蛋白质的运输蛋白质合成后被信号肽牵引，进入核糖体内腔，而后进入高尔基体，分泌到胞外。108Proteinsynthesis--------targetting2质膜蛋白质的运输质膜蛋白质可以分为若干类别，它们的跨膜次数不同。但它们都是在内质网表面的核糖体上合成的，与分泌蛋白的合成类似。109Proteinsynthesis--------targetting质膜蛋白质可以分为若干类别110Proteinsynthesis--------targetting只是合成后立即插入内质网膜内，随后这些蛋白在运输到高尔基体以及过程中以及质膜表面以前，就一直在膜中不动，直到与质膜融和成为质膜的组成部分。111Proteinsynthesis--------targetting需要注意的是，新合成的膜蛋白插入内质网膜时朝向内质网腔的部分，将来等膜蛋白插到质膜时，时指向膜外的。这与膜蛋白的运输的特点有关。同时也正是指向内质网内腔的部分接受了糖基化等修饰，等这些蛋白安装在膜表面后，这些蛋白的修饰侧链就如同天线伸展在膜的外表面。112Proteinsynthesis--------targettingI型膜蛋白的形成113Proteinsynthesis--------targettingII型膜蛋白的形成114Proteinsynthesis--------targetting跨膜蛋白的信号存在于蛋白序列中115Proteinsynthesis--------targetting3内质网膜中蛋白质的运输内质网中的蛋白是在内质网上的核糖体中合成的，随后进入ER内腔,再传到高尔基体,但是这些蛋白的C端有特殊的滞留信号Lys-Asp-Glu-Leu,(KDEL)，所以他们又被送回到ER中。116Proteinsynthesis--------targetting4溶酶体中的蛋白的运输这类蛋白也是在内质网上的核糖体中合成，送到高尔基复合体顺面部分,被糖基化加上6-磷酸甘露糖.6-磷酸甘露糖是蛋白前往溶酶体的信号。117Proteinsynthesis--------targetting在高尔基体的反面,有6-磷酸甘露糖受体识别蛋白,两者结合形成小泡从高尔基体中释放出来,与分类小泡结合。分类小泡的低pH环境使蛋白与受体解离,同时磷酸酶除去6-磷酸甘露糖的磷酸,防止它再与受体结合。118接着小泡从分类小泡中以出芽的方式将受体还回高尔基体,溶酶体蛋白被送往溶酶体中。Proteinsynthesis--------targetting如果蛋白被误排除细胞外，细胞的表面有6-磷酸甘露糖受体，蛋白与之结合后被以内吞的方式产生一个内吞小泡,再运到溶酶体中。119Proteinsynthesis--------targetting5叶绿体和线粒体中蛋白的运输线粒体中蛋白的存在部位:内膜外膜内膜空间内膜基质叶绿体中还要加上类囊体膜和类囊体空间120Proteinsynthesis--------targetting线粒体结构121Proteinsynthesis--------targetting这类蛋白是在细胞质中游离的核糖体上进行合成的，合成完后才运输到各自器官中,故属于翻译后运输这类蛋白的运输信号是导肽（leaderpeptide）122Proteinsynthesis--------targetting线粒体导肽位于蛋白的N端,是将蛋白带往内膜基质的信号,15-35aa,富含有SerThr和带正电荷的氨基酸等。蛋白合成完成后就被释放到细胞质中,但是没有折叠,这是由于有hsp70和多肽链结合,因为折叠的蛋白不能进入线粒体。多肽-hsp70复合物到达线粒体外膜的进入受体上,沿着外膜滑动,找到内外膜的接触点，从这儿进入内膜基质。123Proteinsynthesis--------targetting到达基质之后，hsp70被释放，信号肽被切除,蛋白与线粒体中的hsp70结合,hsp70又被hsp60取代,并协助蛋白正确折叠。124运输的过程需要消耗能量。送往线粒体内膜和内膜空间的蛋白还需要另外一个信号，能使蛋白从基质再到达内膜和内膜空间。Proteinsynthesis--------targetting125Proteinsynthesis--------targetting126叶绿体中蛋白的运输Proteinsynthesis--------targetting127Proteinsynthesis6细胞核内的蛋白运输核孔3000-4000小分子可以扩散进入核内，大分子必须有“通行证”------核定位信号。128核定位信号，特征为:4-8aa,富含正电荷的氨基酸,Lys,Ary,常常还有Pro蛋白质利用GTP通过核孔，进入细胞核后核定位信号不被切除。核定位信号的位置可以在肽链的任何位置,不局限在N端。129第五节蛋白质的降解大多数蛋白质更新很快（少数例外，如血红蛋白），对于代谢调控有积极意义。一般来说，真核蛋白半衰期为30秒到N天。Proteinsynthesis--------degradation130Proteinsynthesis--------targetting细胞中有2种蛋白质降解系统（1）选择性降解，消耗ATP（2）在溶酶体中降解，无选择性，将膜蛋白、外来蛋白等蛋白降解之后，重新利用。131细菌中大多利用蛋白酶Lon降解蛋白质，需消耗ATP。Proteinsynthesis--------degradation蛋白酶Lon在细胞内有缺陷的蛋白出现时被激活，每降解一个肽键消耗2ATP，待降解成较小的无活性的多肽时再由其他系统继续分解。132真核细胞利用泛素降解体系降解蛋白质Proteinsynthesis--------degradation泛素（ubiquitin）是真核细胞中最保守的蛋白之一，由76个氨基酸组成，酵母和人的泛素在氨基酸序列上完全一致。133经过3步反应，泛素被共价连接到待降解的蛋白上，相当于做了“标记”。134Proteinsynthesis--------degradation135Proteinsynthesis--------degradation但是泛素开始时是如何找到待降解的蛋白的，目前仍不清楚。136Proteinsynth