标准解读

《GB/T 36843-2018 梨衰退植原体检疫鉴定方法》是一项国家标准，主要针对梨树上发生的由植原体引起的疾病进行检测和鉴定。该标准适用于进出口、国内调运以及产地检疫中对梨衰退病的检验与鉴定工作。它规定了从样品采集到最终结果判定的一系列技术要求，包括但不限于采样方法、样品处理方式、检测技术和结果分析等内容。

在样品采集方面，标准详细描述了不同生长阶段及发病程度下的梨树枝条、叶片等样本选取原则，确保所取样本能够代表整株植物或整个果园的情况。同时强调了避免交叉污染的重要性，并给出了具体的防护措施建议。

对于样品处理，文件明确了如何制备适合后续实验操作的形式，比如研磨液体制备等步骤的具体条件参数设定。此外还涉及到了DNA提取过程中的注意事项，保证获得高质量的遗传物质用于后续分子生物学测试。

该标准采用PCR扩增技术作为核心检测手段之一，通过设计特异性引物来扩增目标区域的DNA片段，从而实现对梨衰退植原体的快速准确识别。同时，也提供了基于限制性内切酶酶切分析的方法，进一步确认阳性结果的真实性与可靠性。

结果判定部分，则是根据实验所得数据对比已知标准图谱或者数据库信息来进行。只有当所有关键指标均符合预期时，才能最终确定样品中含有梨衰退植原体。

此标准为我国梨产业健康发展提供技术支持，有助于早期发现并控制该类病害传播，减少经济损失。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2018-09-17 颁布
  • 2019-04-01 实施
©正版授权
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文档简介

ICS6502001

B16..

中华人民共和国国家标准

GB/T36843—2018

梨衰退植原体检疫鉴定方法

DetectionandidentificationofCandidatusPhytoplasmapyri

2018-09-17发布2019-04-01实施

国家市场监督管理总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T36843—2018

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本标准起草单位中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局中华人民共和国福建出入境检验检

:、

疫局

。

本标准主要起草人王有福李鑫于文涛刘冉冯茜茜于爽王秀芬张寅寅黑多尔刘卉秋

:、、、、、、、、、、

胡强曹冬梅

、。

Ⅰ

GB/T36843—2018

梨衰退植原体检疫鉴定方法

1范围

本标准规定了梨衰退植原体Candidatus的检疫和鉴定方法

Phytoplasmapyri。

本标准适用于蔷薇科及夹竹桃科等植株及其繁殖材料和传播介体中梨衰退植原体的检疫和鉴定

。

2梨衰退植原体基本信息

中文名梨衰退植原体

:

学名Candidatus

:PhytoplasmapyriSeemüller&Schneider

英文名

:peardecline;ParryƳsdisease;peachyellowleafroll;pearleafcurl;pearmoria

分类地位细菌界硬壁菌门柔膜菌纲非固醇菌原体目

:(Bacteria),(Firmicutes),(Mollicutes),

非固醇菌原体科植原体属Phytoplasma植

(Acholeplasmatales),(Acholeplasmataceae),(),16SrⅩ-C

原体组

。

其他信息参见附录

A。

3方法原理

梨衰退植原体症状和基因特性作为本标准鉴定方法的依据

。

4仪器设备和主要试剂

41仪器设备

.

定性仪定量仪超净工作台高压灭菌锅高速冷冻离心机台式冷冻离心机纯水仪

PCR、PCR、、、、、、

台式小型离心机冰箱旋涡震荡器微量进样器电泳仪水浴锅凝胶成像系统等

、、、、、、。

42主要试剂

.

除非另有说明在分析中仅使用分析纯试剂和去离子水反应体系用双蒸水提取试

,。PCR。DNA

剂可参照附录准备其他试剂比如各种溶液缓冲液和培养基等检测方法特有的按附录附录

B,,、,C、D

和附录要求准备商品化试剂参见其使用说明

E。。

植物提取试剂盒预混液超纯水分子量标记及

DNA、PCR(PCRPremix)、、DNA(DNAMarker)

提取试剂等

DNA。

核酸提取研磨液三水合磷酸氢二钾磷酸二氢钾

(100mL):(K2HPO4·3H2O),2.17g;

蔗糖牛血清白蛋白聚乙烯吡咯烷酮

(KH2PO4),0.41g;,10g;(BSA),0.15g;(PVP-10),2g。pH7.6

高温灭菌保存

,4℃。

提取液调至

DNA:Tris-HCl,100mmol/L;EDTA,100mmol/L;NaCl,250mmol/L;pH8.0。

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