GB/T 36806-2018甘蔗杆状病毒实时荧光PCR检测方法

ICS6502001

B16..

中华人民共和国国家标准

GB/T36806—2018

甘蔗杆状病毒实时荧光

PCR检测方法

DetectionofSugarcanebacilliformvirusbyreal-timePCR

2018-09-17发布2019-04-01实施

国家市场监督管理总局发布

中国国家标准化管理委员会

中华人民共和国

国家标准

甘蔗杆状病毒实时荧光

PCR检测方法

GB/T36806—2018

*

中国标准出版社出版发行

北京市朝阳区和平里西街甲号

2(100029)

北京市西城区三里河北街号

16(100045)

网址

:

服务热线

:400-168-0010

年月第一版

20189

*

书号

:155066·1-61159

版权专有侵权必究

GB/T36806—2018

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本标准起草单位福建农林大学国家甘蔗工程技术研究中心农业部甘蔗及制品质量监督检验测试

:、

中心农业部福建甘蔗生物学与遗传育种重点实验室

、。

本标准主要起草人高三基孙生仁吴小斌黄美婷傅华英王锦达张慧丽陈如凯

:、、、、、、、。

Ⅰ

GB/T36806—2018

甘蔗杆状病毒实时荧光

PCR检测方法

1范围

本标准规定了甘蔗杆状病毒SugarcanebacilliformIMvirus和甘蔗杆状病

IM(,SCBIMV)MO

毒SugarcanebacilliformMOvirus实时荧光检测方法的仪器与设备试剂与材料

(,SCBMOV)PCR、、

样品的采集与前处理检测以及结果判断与表述等

、。

本标准适用于可能带有和病毒的活体寄主植物的快速检测诊断

SCBIMVSCBMOV、。

2缩略语

下列缩略语适用于本文件

。

十六烷基三甲基溴化铵

CTAB:(cetyltrimethylammoniumbromide)

值实时荧光反应中每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值时所经历的循环数

Ct:PCR,(cycle

threshold)

脱氧核糖核酸酶

DNase:(deoxyribonuclease)

乙二胺四乙酸二钠

EDTA-Na2:(edetatedisodium)

羧基荧光素

FAM:6-(6-carboxy-fluorescein)

聚合酶链式反应

PCR:(polymerasechainreaction)

核糖核酸酶

RNase:(ribonuclease)

逆转录酶核糖核酸酶

RT/RNaseH:/H(reversetranscriptase/RNaseH)

甘蔗杆状病毒SugarcanebacilliformIMvirus

SCBIMV:IM()

甘蔗杆状病毒SugarcanebacilliformMOvirus

SCBMOV:MO()

甘蔗杆状病毒Sugarcanebacilliformvirus

SCBV:()

羧基四甲基罗丹明

TAMRA:6-(6-carboxytetramethylrhodamine)

三羟甲基氨基甲烷盐酸盐

Tris-HCl:[Tris(hydroxymethyl)aminomethanehydrochloride]

3甘蔗杆状病毒基本信息

甘蔗杆状病毒属于花椰菜花叶病毒科Caulimiviridae杆状病毒属Badnavirus英文名

()DNA(),

称为Sugarcanebacilliformvirus缩写为国际病毒分类委员会于年将的

,SCBV。(ICTV)2012SCBV

个分离物正式定为甘蔗杆状病毒SugarcanebacilliformIMvirus和甘蔗杆状病

2IM(,SCBIMV)MO

毒SugarcanebacilliformMOvirus两个不同的种甘蔗杆状病毒其他信息参见附录

(,SCBMOV)。A。

4方法原理

在比对甘蔗杆状病毒基因组序列的基础上设计一对仅在该病毒基因间保守的特异

,RT/RNaseH

性引物和一条特异性的荧光双标记探针在实时荧光扩增反应中探针的荧光

TaqMan。PCR,TaqMan

信号强度伴随着目标序列