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文档简介
教学目标学会检测生物组织中的糖类、脂质、蛋白质自学指导二:利用5分钟阅读13—14页的实验部分,回答以下问题,看谁回答得又快又好。1.检测还原性糖时,可以选用糖含量高的甘蔗吗?2.双缩脲试剂的成分是什么?如何使用?3.还原性糖、脂肪、蛋白质的颜色反应现象分别是什么?4.课本15页巩固提高3(4)。一、实验原理可溶性还原糖+蛋白质+脂肪+斐林试剂双缩脲试剂砖红色沉淀苏丹Ⅲ染液苏丹Ⅳ染液橘黄色红色紫色颜色反应班氏试剂二、几种重要的试剂双缩脲试剂A液(0.1g/mL的NaOH溶液)B液(0.01g/mL的CuSO4溶液)现配现用先加A液再加B液班氏试剂:也可用于鉴定可溶性还原糖。苏丹Ⅲ(Ⅳ)染液:用来鉴定脂肪的存在三、实验材料(实验成功的关键)1、可溶性还原糖的鉴定选择含糖量较高、颜色为白色或近于白色的植物组织(苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜)或葡萄糖溶液2、脂肪的鉴定:选择花生种子或食用植物油3、蛋白质的鉴定一般选用浸泡1~2d的富含蛋白质的大豆种子(豆浆)或用鸡蛋清或蛋白质悬液四、实验方法与步骤1、可溶性还原糖的鉴定(1)分别向甲、乙两个试管中加入葡萄糖和水各2ml。(2)两个试管滴入等量的班氏试剂4—5滴,水浴加热1—2分钟。甲试管产生砖红色沉定。2、脂肪的鉴定(1)分别向甲、乙两个试管中加入食用油和水各2ml(2)向两只试管滴入苏丹Ⅲ染液4—5滴,染色2—3分钟。观察颜色变化。2、蛋白质的鉴定(1)
分别向甲、乙两个试管中加入蛋白质悬浮液和水各2ml(2)鉴定样液:取2mL样液于试管甲中→加入
2mL双缩脲试剂A液摇匀(造成一个碱性环境)→加入双缩脲试剂B液3~4滴,摇匀,注意颜色变化(溶液变为紫色)。另取
清水于试管Ⅱ中→加入
摇匀→
颜色变化,作为
。2mL(A液、B液)无对照课堂练习1、用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液颜色的变化过程是()A、无色→砖红色(沉淀)。B、浅蓝色→砖红色(沉淀)。C、浅蓝色→蓝色→砖红色(沉淀)。D浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。D2、在用双缩尿试剂鉴定蛋白质实验时,正确的操作是()
A、2ml蛋白质稀释液先加0、1g/ml的NaOH,再加3—4滴0、01g/mlCuSO4溶液。
B、2ml蛋白质稀释液先加3—4滴0、01g/mlCuSO4溶液,再加0、1g/ml的NaOH
C、2ml蛋白质稀释液,同时加3—4滴0、01g/mlCuSO4和0、1g/ml的NaOH
混合液。
D、在NaOH和CuSO4混合液中加入蛋白质稀释液。A3、下列哪种试剂在使用过程中,必须经过加热()
A、斐林试剂鉴定可溶性还原糖的过程中;B、苏丹Ⅲ在鉴定动物组织中的脂肪时;
C、双缩尿试剂鉴定蛋白质时;
D、碘化钾溶液鉴定淀粉时。4、下列糖中能与斐林试剂反应产生砖红色沉淀的是()A、淀粉;B、果糖;C、蔗糖;D、纤维素。AB在蛋白质鉴定实验中,必须先加A液再加B液的原因是:
为什么加入3—4滴B液而不能过量?在碱性溶液中,蛋白质容易与Cu2+
发生紫色反应,否则就容易生成蓝色Cu(OH)2沉淀对实验现象有遮蔽作用加入过量的双缩尿试剂B液,CuSO4在碱性溶液中生成大量的蓝色Cu(OH)2沉淀会遮蔽所产生的紫色。补充脂肪的鉴定:所用材料一要脂肪含量高,二要有一定的大小才能做徒手切片。以花生种子为最好。将花生种子浸泡3~4h使其变软,有利于切成薄片,但浸泡时间不宜过长,否则组织太软,切下的薄片不易成形。2、脂肪的鉴定(1)切片制作(2)染色:在花生子叶切片上滴2~3滴苏丹Ⅲ染液→2~3min中后,吸去染液→滴体积分数为50%的酒精洗去浮色→吸去多余的酒精,再滴1~2滴蒸馏水,盖上盖玻片(3)镜检鉴定:在低倍物镜下观察,找到花生子叶切片的最薄处,移至视野中央→转动转换器,换用高倍物镜观察(脂肪滴:橘黄色的圆形小颗粒)制备实验材料去种皮、削平面、切片染色滴2—3滴苏丹Ⅲ染液染色2—3分钟去浮色在玻片上滴1—2滴体积分数为50%酒精溶液,洗去浮色制作临时装片放在显微镜下观察(先低倍后高倍)补充斐林试剂甲液(0.1g/mL的NaOH溶液)乙液(
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