标准解读

《GB/T 31792-2015 向日葵茎溃疡病菌检疫鉴定方法》是一项国家标准，旨在为向日葵茎溃疡病菌的检测提供科学依据和技术指导。该标准适用于进出境植物及其产品中向日葵茎溃疡病菌（Sclerotinia sclerotiorum）的检疫鉴定工作。

根据标准内容，首先定义了向日葵茎溃疡病的症状特征，包括植株茎部出现水浸状斑点、随后发展成褐色或黑色溃疡斑块，并可能伴有白色棉絮状菌丝体覆盖于病变部位之上。此外，还描述了在适宜条件下，这些病变区域会产生小型黑色硬质颗粒——即病原菌的休眠结构：菌核。

标准详细规定了采样方法，要求从疑似感染植株上选取典型病斑样本进行采集；对于种子，则需按照一定比例随机抽取样品进行检查。同时，强调了保存与运输过程中应采取的措施以保证样品质量不受影响。

针对实验室内的具体操作流程，《GB/T 31792-2015》提供了多种鉴定技术指南，主要包括形态学观察法、分离培养法以及分子生物学检测手段等。其中，形态学观察主要依靠显微镜下对病原菌孢子囊、菌丝体及菌核等特征性结构进行识别；分离培养法则通过将病组织接种至特定培养基上来获得纯化的病原菌落；而分子生物学方法则利用PCR扩增目标基因片段并结合序列分析来确认病原身份。

此外，本标准还就如何撰写实验报告给出了规范性建议，指出每份报告都应当包含但不限于以下信息：样品来源、采集时间地点、所用鉴定方法及其结果、最终结论等关键要素。


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....

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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2015-07-03 颁布
  • 2015-11-27 实施
©正版授权
GB/T 31792-2015向日葵茎溃疡病菌检疫鉴定方法_第1页
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文档简介

ICS6502001

B16..

中华人民共和国国家标准

GB/T31792—2015

向日葵茎溃疡病菌检疫鉴定方法

DetectionandidentificationofDiaporthehelianthiMuntanola-Cvetkovic

MihaljcevicetPetrov

2015-07-03发布2015-11-27实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T31792—2015

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本标准起草单位中国检验检疫科学研究院中国合格评定国家认可中心中华人民共和国新疆出

:、、

入境检验检疫局

。

本标准主要起草人吴品珊杜洪忠蔡露敏张祥林严进

:、、、、。

Ⅰ

GB/T31792—2015

向日葵茎溃疡病菌检疫鉴定方法

1范围

本标准规定了向日葵茎溃疡病菌的检疫鉴定方法

。

本标准适用于向日葵植株和种子中向日葵茎溃疡病菌的检疫和鉴定

。

2仪器和用具

21仪器

.

体视显微镜生物显微镜超净工作台光照培养箱电子天平高压灭菌锅冰箱

、、、、(1/1000g)、、、PCR

扩增仪荧光扩增仪电泳仪凝胶成像仪高速冷冻离心机恒温水浴锅

、PCR、、、、。

22用具

.

烧杯三角瓶量筒试管培养皿酒精灯镊子剪刀解剖刀接种针载玻片盖玻片塑料研杵

、、、、、、、、、、、、、

移液器移液器吸头离心管液氮罐样品筛目ϕ

、、、、(10,1.7mm)。

3试剂和培养基

31试剂

.

葡萄糖链霉素乳酸琼脂次氯酸钠液氮

,,,,1.0%(NaClO),,Tris-HCl,MgCl2,HCl,EDTA,NaOH,

无水乙醇三氯甲烷异丙醇异

NaOAc,KCl,Tris,CTAB,TAE,(Ethanol),(Chloroform),(Isopropanol),

戊醇核酸染料蛋白酶Taq聚合酶通用引物

(Isoamylalcohol),SYBRGreenⅠ,K,DNA,dNTP,ITS5

和实时荧光特异性引物及探针

ITS4,PCRDH-F、DH-RDH-Pr。

32培养基

.

马铃薯葡萄糖琼脂培养基链霉素马铃薯葡萄糖琼脂培养基具体配方参见附

(PDA),(SPDA)。

录

A。

4检疫鉴定方法

41症状检查

.

采集田间疑似症状的茎杆病叶或葵盘剪取病健交界处的组织材料备用病害典型的症状是茎杆

、,。

和叶柄处有淡褐色溃疡病斑详见附录病害症状描述

,A。

在种子中挑选干瘪变色皱缩残缺或霉变的种子同时挑选其中夹带的向日葵残体如叶柄茎

、、、,,、

杆花盘碎片等

、。

42分离培养

.

将有疑似症状的叶片叶柄茎杆花盘碎片等样品在病健交界处剪取的小

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