标准解读

《GB/T 28982-2012 番茄斑萎病毒PCR检测方法》是一项国家标准，旨在规范使用聚合酶链反应（PCR）技术对番茄斑萎病毒进行检测的过程。该标准适用于农业、植物检疫以及科学研究领域中对于番茄斑萎病毒感染情况的快速准确鉴定。

根据标准内容，首先明确了所需材料和试剂的具体要求，包括但不限于DNA提取试剂盒、特异性引物序列等，并详细说明了实验过程中使用的仪器设备及其性能指标，确保实验条件的一致性和可重复性。

接下来，标准描述了从样品采集到最终结果分析的完整流程。样品采集部分强调了选取具有典型症状植株作为样本的重要性；接着是核酸提取步骤，提供了多种可行的方法供选择；随后进入关键的PCR扩增阶段，给出了推荐使用的反应体系组成、循环参数设置等信息；最后，通过凝胶电泳或其他适当手段来观察并记录PCR产物，依据特定大小片段的存在与否判断是否感染了目标病毒。

此外，《GB/T 28982-2012》还特别关注到了实验室内质量控制措施，如设立阳性对照与阴性对照以验证整个操作过程的有效性和准确性，同时建议定期参加外部质控活动以保证实验室间数据的一致性。

此标准为从事相关工作的人员提供了一套科学合理的技术指南，有助于提高我国在植物病害诊断方面的技术水平和服务能力。


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  • 现行
  • 正在执行有效
  • 2012-12-31 颁布
  • 2013-06-01 实施
©正版授权
GB/T 28982-2012番茄斑萎病毒PCR检测方法_第1页
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文档简介

ICS6502001

B16..

中华人民共和国国家标准

GB/T28982—2012

番茄斑萎病毒PCR检测方法

DetectionoftomatospottedwiltvirusbyPCR

2012-12-31发布2013-06-01实施

中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

中国国家标准化管理委员会

GB/T28982—2012

前言

本标准按照给出的规则起草

GB/T1.1—2009。

本标准由全国植物检疫标准化技术委员会提出并归口

(SAC/TC271)。

本标准起草单位中华人民共和国上海出入境检验检疫局中华人民共和国厦门出入境检验检疫

:、

局中华人民共和国北京出入境检验检疫局

、。

本标准主要起草人于翠杨翠云廖富荣易建平邓丛良戚龙君

:、、、、、。

Ⅰ

GB/T28982—2012

番茄斑萎病毒PCR检测方法

1范围

本标准规定了番茄斑萎病毒的免疫磁珠和实时荧光检测方法

RT-PCR、RT-PCRRT-PCR。

本标准适用于包括种子苗木和无性繁殖材料的活体植物材料及传毒介体中携带的番茄斑萎病毒

、

的检测

。

2规范性引用文件

下列文件对于本文件的应用是必不可少的凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文

。,

件凡是不注日期的引用文件其最新版本包括所有的修改单适用于本文件

。,()。

进出境植物及植物产品检疫抽样

SN/T2122

3番茄斑萎病毒基本信息

中文名番茄斑萎病毒

:

英文名

:tomatospottedwiltvirus

缩写

:TSWV

分类地位布尼亚病毒科番茄斑萎病毒属Tospovirus

:(Bunyaviridae),()

番茄斑萎病毒其他信息参见附录

A。

4方法原理

用特异性抗体修饰的磁株吸附待测样品中的病毒粒子后经高温裂解释放出病毒或直接从待

RNA,

测样品材料中提取植物总然后在逆转录酶的作用下合成以为模板再通过普通

RNA,cDNA,cDNA

或实时荧光进行检测分析结果即可明确材料中是否含有病毒核酸成分

RT-PCRRT-PCR。PCR。

5仪器用具及试剂

、

51仪器设备

.

仪实时荧光仪旋转孵育器电泳仪凝胶分析成像系统水浴锅高速冷冻离心机高

PCR,PCR,,,,,,

压灭菌锅微波炉涡旋振荡器电子天平感量超低温冰箱等

,,,(0.001g),(-80℃)。

52用具

.

磁力架可调式微量移液器无吸头无离心管管研钵等

,,RNase,RNase,PCR,。

53试剂

.

除有特殊说明外所有实验用试剂均为分析纯或生化试剂试剂配制见附录

,。B。

番茄斑萎病毒抗体磁珠具有超顺磁性的聚苯乙烯珠子直径表面标记有甲

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