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文档简介
startTheitemofmustbeselectedFunctionType:DNAorprotein其他项目选不选都行。但FunctionType一定要选。Autochemi:暗箱灯光控件调整相机辅助光圈、变焦和焦距控制各种滤光片的选择。控制各种照明光源。灯光类型选择:反射照明光:白光及二种波段紫外光透射照明光:白光及三种波段紫外光。但紫外光波段需在紫外灯箱上手动选择。安全选项:开门时关闭紫外光源。箱门上有安全窗口可以即时观察荧光效果。AutoChemi的必选项:Aperture:光圈。可调整亮度。Zoom:变焦。可调整画面的放大倍数。Focus:辅助对焦。Filter:选择滤光片。Lighting:选择透射光源。CoolSNAP-pro:相机控件设置相机选择图片保存方式选择图像预览参数选择拍摄曝光参数积分方式拍摄极弱荧光自动拍摄程序设定OpentheCoolSNAP-pro
对正凝胶块位置按前述方法,在自然光下对正,避免频繁开关紫外光源。然后再打开紫外光源。一般用透射光源,用反射光源亦可。再次强调应调整相机变焦,使凝胶块图象尽量充满整个画面。这样有利于图象拍摄的清晰EnlargetheZoom,lettheimageofthegelaslargeaspossible.ThesettingofCoolSNAP-pro
setup:currentdriver-8-bitgrayscale…这是拍摄照片的格式。作为平时使用的普通单色黑白照片都是八位灰度。但在本程序里用的是12位灰度。对光密度的测量更准确。所以在拍摄时不要使用8位图片格式。12位灰度的图片很多常用的程序都不能识别所以需要转换。只选这一项保存图片方式:Newimage:每次拍摄都保存成一个新文件Sequence:连续多幅拍摄并保存系列图片,用于拍摄动态画面,需设定拍摄间隔时间,拍摄画面数量等参数,但不能象摄相机那样拍摄录相。选中这两项,可使拍摄画面与预览画面一致不选择任何自动曝光的功能Acquire:点击Auto-Exposureoptions,才能看到自动曝光的设置窗口,确认未选择任何自动曝光功能。否则照下的画面与预览画面不会一致的。另外不要调整Area,一般都需要拍摄满画幅的图片。Intergration:NointergrationIntergration的特殊用处这是专业拍摄亮度特别弱的荧光时采用的一种特殊拍照方法。对于平时肉眼可见的荧光样品是不必使用的。实际上使用积分拍摄是很麻烦的。重要的是要作一个正确的空白样品,这非常困难。Macros:宏操作就是编程序执行一系列重复的操作。太高级了,还是别玩它吧。记住设置完成后要点击minimaldialog回到小窗口,不要点击close。否则前面全都白干了。SetpreviewandacquireexposetimePreviewtime
=acquireexposetime必须把两个时间设为同样的值,才能使拍摄的效果与预览的效果一样。在正确设置时,两者会联动的。曝光时间与光圈结合使用来调整曝光使画面亮度合适。紫外照明光源是50Hz频闪光源,因此曝光时间不能太短,至少要大于0.1秒。Acquireimageandsave点此处拍照拍摄后要点此处调出预览画面拍摄照片点击acquire即可拍摄当前画面。拍摄一张照片后屏幕上的窗口就是拍摄的图片了,要想重新回到预览窗口,得点击一下preview。保存照片时存为TIFF格式较好。然后再另存一张jpeg格式的用于其他用途。分析电泳条带先关闭相机控件窗口和灯箱控制窗口SelectainterestedareaandsaveasanewfileRotatetheimage加样孔必须在图片上方Sortthelanes整理泳道Add:加上未选中的泳道Delete:删除错选中的泳道Lanewidth:调整泳道宽度Uniformlanewidth:勾上此选项,可保证各泳道宽度一致。记得点OK后再进行下一步操作。泳道跑歪了怎么办?去掉Forcestraightlane前面的对勾,就可以调整泳道选择的方向了。不过这种难看的样品还是重作为好。Findthebands一条一条地整理带程序自动识别的带数量很多,一般都要删除掉错误识别的带,只留下需要的带。也可以先删掉全部带,然后手动添加所需的带。点击deleteband,在错误识别的band上点一下就删掉它了,也可以在光密度曲线窗口上点,效果一样。Addband的操作也一样。对每个band的宽度要逐个调整。特别是相同分子量的条带,要尽量让它们的选择宽度一致。较正背景正规的背景较正需要拍摄一张空白样品作为背景,然后扣减其光密度。这种方法麻烦且实用价值不大,难以操作。直接从光密度曲线上扣除基线背景较易实现,但要根据实例选择是否需要扣除基线背景。在background窗口中选择joiningvalleys即可实现扣除基线背景。扣除基线背景对光密度测量值的改变会非常大,是否应该扣除还需要根据样品情况来选择。IndicatetheMarklaneanditsvalue这里有常用的Mark数据系列当Mark条不在左边时,一定要重新手动指定Mark条的位置指定了Mark位置后,还要选取Mark类型,并检查各个标准点的分子量值是否正确。可以手动修改各点分子量的值。注意各标准点的顺序:前面是大分子量,后面是小分子量。Slant是什么东东?如果各泳道的速度不一致,此功能可以进行有限的校正。前提是要在两边各作一个Mark。然后在相同的Mark带之间拉出一根校正线。这样在分析测量时能够对分子量进行较正。Now,theanalysisrdsultcanbeobtained.分析结果该选哪一项?Rel/bandsAmountRelab%IOD:选这个最保险MaxOD光密度与样品量之间的关系正相关,但不是正比。也就是说,光密度相差一倍并不意味着样品的量也相差一倍。IOD是累积光密度,此项是直接反映了样品量之间的对比。但要注意的是,IOD与样品量之间不是正比关系,因此用IOD的比例来表达两个条带之间的量的对比属于半定量的分析。其他的定量方法误差更大。IOD的数值一般都很大,因此读数时很容易搞错位数。Thedatacanbecopiedtoexcel测量数据中有各条带的分子量和含量直接把数据copy到Excel中,可方便地进行各种统计操作WecandrowasurfaceplotSurfaceplot将图片转换成jpeg格式保存此程序拍摄的图片是常用软件打不开的。要先
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