实验1-蒽酮比色定糖法

实验一：蒽酮比色定糖法糖是世界上存在最多的一类有机化合物，也是人类所需要的最基础的物质。CO2光合作用糖一切含碳物质分解代谢合成代谢糖类一、糖的概念和分类1、糖的组成：

CH2O，可以写成Cn(H2O)m

糖又称为碳水化合物（Carbohydrate)脱氧核糖C5H10O4

鼠李糖C6H12O5

乙酸C2H4O2，符合Cn(H2O)n

这些糖不符合Cn(H2O)n酮基醛基定义：多羟基的醛类或酮类化合物，以及它们的衍生物或聚合物。(HCOH)nH2COHCHOH2COHCOH2COH(HCOH)n2、糖的分类：糖单糖二糖多糖葡萄糖果糖蔗糖麦芽糖淀粉纤维素不能再水解的糖水解后能生成两分子单糖水解后能生成多个单糖1、能源物质：淀粉，糖原2、碳源：各种有机物的碳架3、结构物质：纤维素，肽聚糖，几丁质4、功能物质(细胞识别的信息分子)：病毒识别，抗原抗体反应等

二、糖的生理功能与膜蛋白和膜脂相连的糖——通信天线一、实验目的学习分光光度法的基本原理学习对水果中糖含量进行测定的方法二、实验原理分光光度法基本原理：物质对光吸收的定量关系很早就受到了科学家的注意并进行了研究。皮埃尔·布格（PierreBouguer）和约翰·海因里希·朗伯（JohannHeinrichLambert）分别在1729年和1760年阐明了物质对光的吸收程度和吸收介质厚度之间的关系；1852年奥古斯特·比尔（AugustBeer）又提出光的吸收程度和吸光物质浓度也具有类似关系，两者结合起来就得到有关光吸收的基本定律——布格－朗伯－比尔定律，简称比尔－朗伯定律。溶液中的物质在光的照射激发下，产生对光的吸收效应，不同的物质具有各自选择性的吸收光谱，因此，当某单色光通过溶液时，能量会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质浓度有一定比例关系，即符合于比色原理——比尔定律朗伯-比尔定律

A=lg(1/T)=Kbc

A：为吸光度,

T：为透射比,是投射光强度比上入射光强度

K:

摩尔吸收系数。它与吸收物质的性质及入射光的波长λ有关。

c：为吸光物质的浓度

b：为吸收层厚度物理意义：是当一束平行单色光垂直通过某一均匀非散射的西光物质时,起其吸光度A与吸光物质的浓度c及吸收层厚度b成正比.二、实验原理蒽酮比色法是一个快速而简便的定糖方法。蒽酮可以和游离的己糖或多糖中的己糖基，戊醛糖及己糖醛酸反应，反应后溶液呈蓝绿色，在620nm处有最大吸收。三、实验特点蒽酮可与其他一些糖类发生反应，但显现的颜色不同。当样品中存有含较多色氨酸的蛋白质时，反应不稳定，呈现红色。对于特定的糖类，反应较稳定。本法多用于测定糖原含量，亦可用于测定葡萄糖含量。

四、实验试剂蒽酮试剂：取0.2g蒽酮溶于100mL80%(V/V)硫酸中，当日配制使用；

标准葡萄糖溶液(0.1mg/mL)：(可滴加几滴甲苯作防腐剂)；

糖样品溶液。五、实验操作步骤1.制作标准曲线：

取干试管5支，依次加入标准糖溶液

0，0.1，0.2，0.4ml,0.8ml并依次用蒸馏水补足体积到1mL，各管均加入蒽酮试剂4mL，震摇混匀。沸水浴准确煮沸10min，室温放置10min，用1号试管溶液调零，比色测定A620（同时测定样品）。用标准糖溶液浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，制作标准曲线。

管号12345葡萄糖标准液（

ml）00.10.20.40.6蒸馏水（

ml）10.90.80.60.4葡萄糖含量（

ug）0102040602.样品含糖量测定：葡萄汁溶液样品溶液稀释1000倍，吸取1mL置试管中，再加入4mL蒽酮试剂，沸水浴中煮沸10分钟，取出后冷却10min后比色，其他条件与做标准曲线相同，测得的吸光度值由标准曲线查算出样品液的糖含量。计算：样品糖含量(%)=(C×