细胞生物学技术Dr.上新生

何为层流技术及其在FCM成要满足雷诺数Re=——<2300。层流是液体稳定流动的必要条件，为细胞分析提供技术所获得的FSC信号差别很大。侧向角散射光信号（SCC）：信号强弱与细胞内颗粒多少相关。细胞凋亡时其SCC常变大，同时FSC常减小等高线图(ContourPlot)：在一条等高线上细胞数相同，不同的等高线上细胞数不同二维密度图(DensityPlot)假三维图(Pseudo3DPlot)：Z为细2.）0.50.1%；胰蛋0.25%(1-10μg/mlDNase10-15ml酶，加入少量以减弱酶对细胞的不利影响；通过反复离心漂洗，移去酶消化液，彻底终止酶消化过程等。收获率是指分离后所得的细胞亚群数占原细胞样品中该亚群细胞数的百分比。纯度是指分离后的样品中该亚群细胞所占的百分比。细胞样品技术的优缺点及注意事3.）酶学法，化学法对实体组织的分散效果较理想，但会造成所测化学成分的不良影响。FCM所测细胞是单个分散状态；细胞团块，细胞DNA含量分布线性直方图的分析1.）PIDNA，AnnexinV2.）X轴为AnnexinV‐FITC，Y轴表3.）LL：正常细胞，PIAnnexinLR:早期凋亡细胞，AnnexinV（+），PI（‐）UR：晚期凋亡细胞，AnnexinV（+），PI（+）朗玻－定律（吸收光度测量术）一束平行的单色光透过嗜色液体时，其光强度随该液体中嗜色物质的浓度与光程呈指数形式衰减，即II。*e-简述共聚焦的原 （光源点,物点,像点，三点共轭）（完整版学横断面，分辨率提1.4；可无损伤地对样品作层扫描和荧光强度测量,重建后能得到样品的三维立体结构。 荧光信号被PMT或cCCD探测器接收 的简述显微图像分析处理的基本过程,图像分析处理能解决哪些生物医学测量问题?:即电子射线，电流通过电镜镜筒顶部的电子枪内的灯丝时释放电子，电子在栅极和阳极的作用下形成短波长高能。电子束带负电荷，具有光的波动性和可折射性，电镜就是利用作为“光源”来实现成像的。:用深如果你的课题中需要了解细胞内部的超微结构变化，请问你应选择哪种类型的电镜，为保证样品良好的超微结构，在样本取材及固定时应注意什么？如果是培养细胞，细胞数量一定要达到多少？了解细胞内部的超微结构变化应选择TEM要想获得一张理想的电镜，每个制样环节都很重要，尤其是取材和固定极为关键。在透射电镜样本取材时，样本不可大于1mm3，并在1分钟以内完成固定。请问如果组织块过大会出现什么？没有及时固定的组织电镜下会出现何种改变？扫描电镜用于观察组织表面形貌，取材时必需要充分组织的表面结构，请问取材时注意事项有哪些什么是血管灌注固定？为什么脑、心肌、肾脏等组织要进行灌注固定取材？在样品过程中为什么要进行半薄切片定位半薄切片的意义在于：1取超薄切片的部超薄切片的面积一般要小于0.5mm2，要经过半薄切片来选取有意义的部位。2同一3用于图像分析，统计学处理。如何描述一张电镜 放 成像 样品制成超薄切片等，过程复杂 应 变性、复性、探针、靶分子（分单cDNA、RNA和寡核苷酸三种。简述ABC胞化学方法对标记探针进行探测，从而在细胞原位显示特异的DNA或RNA分子。PAP法（过氧化物酶-抗过氧化物酶复合物法） 一抗与组织抗原特异结合，二抗又将PAP复合物与一抗连接在一起，然后加入HRP的天然底物H2O2和捕捉底物DAB；光镜-棕黄色反应产物(组织抗原的定位)，电镜-与锇酸反应，呈高电子密度锇黑（超微结构定位抗特点：介质为密度梯度溶液，且密度较低，介质的最大密度应小于被分离生物颗粒的最小密度pm)；等密度离心法（isodensity特点：介质密度较高，陡度大，介质的最高密度应大于被分离组分的最大密度pm)。所需的力场通常比速率沉降法大10~100倍，往往需要高速或超速离心。特征：失去原有形态分化特性减弱；光光光光1.转录因子就是调控蛋白，通过与DNA上调控序列结合，调节转录激光扫描共焦显微镜：是在显微镜基