期末复习要点总结-生物材料评价

期末复习要点总结-生物材料评价一、生物材料国家标准答：1:评价与试验2:动物保护要求3：遗传毒性、致癌性和生殖毒性试验4:与血液相互作用试验选择5:体外细胞毒性试验6：植入后局部反应试验7:环氧乙烷灭菌残留量8:生物学试验参照材料的选择与定量指南9:潜在降解产物的定性和定量框架10:刺激与致敏试验11:全身毒性试验12:样品制备与参照样品13:聚合物降解产物的定性与定量14:陶瓷降解产物的定性与定量15:金属与合金降解产物的定性与定量16:降解产物与可沥滤物毒性动力学研究设计17:可沥滤物允许限量的设计18:材料的化学定性（貌似这个是国际标准）（1）基本评价实验：细胞毒性试验、致敏试验、刺激试验、急性毒性试验、溶血试验、热源试验、遗传毒性试验、植入试验、血液相容性试验；（2）补充评价的生物学试验：亚急性毒性试验、致癌试验、生殖和发育毒性试验、体内降解试验。二、血液相容性评价答：凝血:材料、器械表面与血液接触数秒钟内，血浆蛋白首先吸附于材料的表面，随后血小板在材料表面粘附、聚集、变形，形成细小血栓，同时血液内一系列凝血因子相继被激活，形成更大的血栓，最后产生红血栓和凝血。体外试验：将血液或血液成分离体后、暴露于不同材料，观察材料或血液的变化。主要包括：全血和血液凝固实验测定，血浆蛋白吸附实验，血小板粘附实验和血栓形成实验半体内实验：动物体流出的血液直接与实验材料接触，实验材料位于动物体外，动物体内流出的血可直接进入试验盒或管，在分析血液变化后将其废弃或通过动物静脉，将经过实验材料的血液流回动物体内。多采用同位素标记血液成分并测定这些成分粘附在材料表面的变动情况来评价材料的血液相容性。体内：将材料直接植入动物体内的心血管体系。溶血：红细胞破裂,血红蛋白逸出称红细胞溶解。测试原理：红细胞被溶血剂破坏，血红蛋白中的Fe2+被高铁氰化钾氧化为Fe3+,形成高铁血红蛋白（Hi），与氰化钾提供的氰根离子结合生成稳定的化合物氰化高铁血红蛋白（HiCN），在波长540nm处有吸收峰，用分光光度计测定你该处的吸光度，转化成每升血液中的血红蛋白浓度，用HiCN参考液进行比色法测定制作标准曲线供查阅.溶血率：材料组-阴性对照组/阳性对照组-阴性对照组（小于5%合格）阳性对照：蒸馏水；阴性对照：生理盐水。三、组织相容性1、MTT（细胞生长抑制法）活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能使外源性的MTT还原为难溶性的蓝紫色结晶物甲H（Formazan）,并沉积在细胞中，而死细胞无此功能。二甲基亚砜（DMSO）或盐酸-异丙醇溶解细胞中的紫色结晶物。酶联免疫监测仪在490或570nm处测定溶液的吸光值OD（opticaldensity）。在一定细胞数范围内，MTT结晶物形成的量与细胞数成正比。2、热原试验：热原：引入或释放到机体内后能引起恒温动物体温异常升高的物质。它包括细菌性热原、内源性高分子热原、内源性低分子热原及化学热原等。家兔热原试验：取适用的家兔3只，测定其正常体温后15分钟以内，自耳静脉缓缓注入规定剂量（10ml/kg）并温热至约38°C的供试品溶液，然后每隔30分钟按前法测量其体温1次，共测6次，以6次体温中最高的一次减去正常体温，即为该兔体温的升高温度。如3只家兔中有1只体温升高了0.6C或0.6C以上，或3只家兔体温升高均低于0.6C,但体温升高的总和达1.3C或1.3C以上，应另取5只家兔复试，检查方法同上。结果判断：在初试的3只家兔中，体温升高0.6C或0.6C以上的家兔超过1只；或在复试的5只家兔中，体温升高0.6C或0.6C以上的家兔超过1只；或在初试、复试合并8只家兔的体温升高总和超过3.5C，均判为供试品的热原检查不符合规定在初试的3只家兔中，体温升高均低于0.6C，并且3只家兔体温升高总和低于1.3C；或在复试的5只家兔中，体温升高0.6C或0.6C以上的家兔不超过1只，并且初试、复试合并8只家兔的体温升高总和为3.5C或3.5C以下，均判为供试品的热原检查符合规定。四、可降解高分子答：性能变化：形貌（TEM、SEM）、结构（SEM、TEM）、分子量（GPC、粘度法）、力学性能（万能电子试验机）玻璃化转变温度（DSC）、分子组成（红外、核磁）降解影响因素：直链（易）支链（交联）-难柔软（易）非晶（易）结晶（难）相对分子质量低（易）脂肪族（易）芳香族（难）亲水（容易）疏水难降解分为体内降解（酶催化）、体外降解（酸催化、碱催化、酶催化）亲水高分子：聚乙二醇、聚丙烯酸、尼龙、聚醚、聚丙烯酰胺疏水高分子：聚碳酸酯、聚乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯、聚丙烯、硅橡胶五、细胞毒性试验：1、直接法（1）直接接触法：该法是形态不规则的试样（如金属粉末、油脂类材料）等与细胞一起放入培养皿中进行培养。当有溶出物时试样周围的细胞就会受到影响。（2）浸提液：浸出液法:试样投入培养液或蒸馏水中适当条件下进行浸泡，浸泡液加在含有细胞的培养皿或试管中继续培养，观察溶出物对细胞的影响。2、间接法（1）琼脂覆盖法：将含有培养液的琼层平铺在有单层细胞的培养皿中，再在固化的琼脂层上放上试样进行细胞培养。当溶出物分子量小，易溶于水，毒性发现早且较强（2）分子滤过法：在单层细胞上覆盖一层微孔滤膜，将试样材料放在滤膜上，使材料毒性在成份通过滤膜作用于其下的细胞。由于滤膜微孔直径较小（如0.45um），适合评价毒性成份分子量小的材料的相容性.六、提高材料的血液相容性：（1）使材料表面带上负电荷的基团（2）高分子材料的表面接枝改性（3）制备具有微相分离结构的材料（4）高分子材料的肝素化（5）材料表面伪内膜化七、组织相容性影响因素：①材料本身的结构和性质（如微相结构、亲水性、疏水性、电荷等）材料中可渗出的化学成分（如残留单体、杂质、低聚物、添加剂等）降解或代谢产物等。植入材料的几何形状也可能引起组织反应。八、致突变试验：1、微核试验：用于测试能干扰细胞有丝分裂的物质的致突变性；微核：真核类生物细胞中的一种异常结构，是染色体畸变在间期细胞中的一种表现形式。微核往往是各种理化因子，如辐射、化学药剂对分裂细胞作用而产生的。2、细菌回复突