实验型高血压

实验型高血压一、高血压动物建模方法分类1、肾性高血压模型2、内分泌性高血压模型3、神经原性高血压模型4、遗传性高血压模型5、环境型高血压模型2021/4/272（一）、肾性高血压模型1、肾血管性高血压模型（肾动脉狭窄性高血压模型）

分类：

（1）两肾一夹型（两侧肾完好，一侧肾动脉狭窄）（2）一肾一夹型（一侧肾切除，另一侧肾动脉狭窄）

（3）两肾两夹型(两肾均完好，两侧肾动脉狭窄）原理：狭窄肾动脉可以造成肾脏缺血，导致肾脏内肾素合成和分泌增多，进而增高血管紧张素的含量，使血压升高。2021/4/273

肾血管性高血压模型的操作步骤：

肾血管性高血压大鼠的制备：150—200g大鼠，用安定5mg/kg和氯胺酮50mg/kg，麻醉，仰卧位固定，剪去腹部手术野毛，皮肤消毒后于剑下1.5cm沿腹中线切开皮肤及肌层，找到肾脏，将肾脏轻轻挤出，用眼科镊分离肾动脉，在近主动脉端用U形银夹套上，然后缝合切口。随后血压将逐渐升高，4—5周后70%的大鼠形成持续性高压，收缩压>160mmhg。

2021/4/2742、肾外包扎性高血压模型（肾外压迫性高血压模型)

分类：

（1）两肾一扎型（两侧肾完好，一侧肾包扎）

（2）一肾一扎型（一侧肾切除，另一侧肾包扎）

（3）两肾两扎型（两侧肾完整，两侧肾包扎）

原理：肾外异物包扎，可致肾周围炎在肾外形成纤维素性鞘膜，压迫肾实质，造成肾组织缺血，使肾素形成增加，进而是血管紧张素含量增多，血压升高。2021/4/275

肾外包扎性高血压模型操作步骤：150—200g大鼠，用安定5mg/kg和氯胺酮50mg/kg，ip麻醉，仰卧位固定，剪去腹部手术野毛，皮肤消毒后于剑下1.5cm沿腹中线切开皮肤及肌层，找到肾脏，将肾脏轻轻挤出，小心的将肾与周围组织剥离，将自制的双层乳胶薄膜剪成“X”形，绕开肾门交叉包扎，同法对右肾进行包扎，缝合手术切口，皮下注射2万单位青霉素，约20天即可约有70%以上大鼠出现持续性高血压，收缩压一般可升高50%以上。2021/4/276（二）、内分泌性高血压模型1、DOC盐性高血压模型

原理：去氧皮质酮（DOC）为盐皮质激素，具有明显的水钠潴留作用，使细胞外液增加，血压升高。大鼠一侧肾切除后皮下注射DOC和附加饮用1%氯化钠溶液可形成持续高血压。2021/4/277DOC盐性高血压模型制作步骤：

大鼠100—150g，用安定5mg/kg和氯胺酮50mg/kgip麻醉，腹部正中切口进行左肾切除。术后大鼠用醋酸去氧皮质酮（DOCA）50mg/kg，sc，qd，每周给药5天，共五周，同时饮用1%氯化钠溶液，停药后改饮普通水。给药一周后约50%大鼠血压升高，给药五周停药后70%大鼠形成持久性高血压，收缩压>21.3kpa

者用作实验。2021/4/2782、肾上腺素再生性高血压模型

幼年大鼠左侧肾和肾上腺素切除，右侧肾上腺包膜用小刀切一小口，用弯头无头眼科镊轻压肾上腺将髓质和大部分皮质剔除。术后饮用1%氯化钠溶液。术后两周动物血压和血浆DOC含量明显升高，术后7—14周血浆DOC下降到正常水平，但血压仍维持高血压水平。2021/4/279（三）、神经原性高血压模型1973年Jannetta在手术观察基础上提出脑干左侧Ⅸ，Ⅹ颅神经根入脑区（REZ）被血管压迫是原发性高血压的原因，即“神经源性高血压”假说。在此基础上，许多学者从临床及实验研究证实了Jannetta的假说。最初采用脉动球囊法，即有大小两个橄榄球囊，中间细管相连，内充液体，大囊置于主动脉内，小囊置于延髓左侧来建立高血压动物模型。2021/4/2710（四）、遗传性高血压模型１、选择性近亲繁殖高血压模型遗传性高血压大鼠有多种品系，如：遗传性高血压大鼠（GH）自发性高血压大鼠（SHR）Dahl盐敏感大鼠（DS）里昂株高血压大鼠（LH）蒙特斯种高血压大鼠（SHM）米兰种高血压大鼠（MHS）其中具有使用价值，应用较广泛的是日本学者培育的突变系-自发性高血压大鼠（SHR）及其亚系，它们是目前国际上公认的最接近人类原发性高血压的动物模型。2021/4/27112、基因工程高血压模型1990年德国科学家首先将一个高血压候选基因（小鼠DBA/2JR-2肾素基，Ren-2）转入大鼠的生殖细胞而制备携带该候选基因的转基因大鼠（TGR），由此而建立了一种新的高血压大鼠模型：TGR，该模型4周龄时血压升高，9周时达199.5～259.4mmHg（对照组119.7～129.7mmHg）。血浆活性肾素（PRA）和血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）水平正常或降低，肾脏的肾素合成明显受抑，但肾上腺等肾外组织的肾素合成却显著增强。2021/4/2712（五）、环境性高血压模型研究发现正常大鼠暴露于5℃的环境中3周即可形成高血压并且伴有心肌肥厚。如果暴露7周，去除冷环境后4周内其血压都不会恢复正常。故推测，暴露时间更长将会形成不可逆转的高血压动物模型。2021/4/2713二、高血压药物的研究方法1、辛伐他汀对高血压大鼠的作用研究方法2、阻断环氧化没-2对高血压大鼠的作用研究方法2021/4/2714（一）、辛伐他汀对高血压大鼠的作用研究方法

1、实验材料

（1）实验动物：8周龄健康雄性wistar大鼠40只，体重180—220g

（2）试验药物：辛伐他汀：40mg/片

卡托普利：12.5mg/片2、主要试剂及仪器

血管紧张素II放射免疫分析试剂盒、NO含量检测试剂盒、

羟脯氨酸含量检测试剂盒、8-iso-PGF2a检测试剂盒、TC、TG、LDL-C检测试剂盒，MD100-1电子分析、BX51型光显微镜、HX-II型为套式小动物血压测量仪、分光光度计、-4到-70摄氏度冰箱2021/4/27153、实验方法

（1）建模：

建立两肾一夹肾性高血压大鼠模型。并选用收缩压超过150mmHg,并且在原来基础上升20mmHg以上者位高血压大鼠建模成功，备用。

（2）分组：选用健康雄性8周龄的wistar大鼠40只，体重180-220g，适应性喂养1周后，随机取7只作为假手术组，其余33只进行两肾一夹手术造模。造模组及假手术组均喂养4周，选取造模成功的大鼠并重新分组：高血压组（H组，n=6）、辛伐他汀治疗组（S组，n=8）、卡托普利组（C组，n=6)、合用组（C+S组，n=8）。另设假手术组为对照组（sh组，n=6）。一组一笼，每笼的大鼠用苦味酸标记，以便饲养，观察和记录数据。2021/4/2716

(3)给药：

a、卡托普利组：25mg卡托普利溶于3.75ml双蒸水内，一天一次，每次1.5ml/100g。药物剂量100mg/kg.d。

b、辛伐他汀组：8mg辛伐他汀溶于60ml双蒸水中，一天一次，每次1.5ml/100g。药物剂量2mg/kg.d

c、卡托普利+辛伐他汀组：辛伐他汀2mg和卡托普利100mg溶于16ml双蒸水内，一天一次，每次1.5ml/100g,药物剂量：辛伐2mg/kg.d、卡托普利：100mg/kg.d。

d、假手术组与高血压组在同样的时间内每日同一时间灌双蒸馏水一次，每次1.5ml/kg.d

（4）血压测量：用HX-II型尾套是小动物血压测量计测定大鼠血压，并且应当在一定时间内，完成所有操作，一般固定于每天上午的8点至12点。血压测定重复测定3次，求三次的均值作为测压结果。2021/4/2717（5）相关数据的采集

检测NO和血脂含量、血浆和心肌AngII的测定、血浆8-异前列素F2a

的测定

（6）相关结构及生理变化的检测

左室质量指数的测定、心肌组织羟脯氨酸龙都的测定

（7）统计学分析

注：方法来源于山西医科大学硕士论文

2021/4/2718（二）、阻断环氧化没-2对高血压影响的研究方法

1、实验动物的来源于分组：

（1）实验动物的来源：8周龄雄性大鼠10只

（2）药物来源与分组：COX-2选择性抑制剂塞来昔布胶囊，增加盐负荷的效果，本研究选择低盐饮食与高盐饮食进行对比。大鼠随机分组（n=5）：低盐饮食组、高盐饮食组。

2021/4/2719

2、实验方法：

实验前大鼠置于大鼠笼中饲养3天，所有大鼠给予低盐饮食（含0.04%NaCl）同时给予celecoxib（25mg/kg.d)灌胃5天。第6天开始，低盐实验组给予celecoxib灌胃及低盐饮食，高盐饮食组改为给予celecoxib灌胃及高盐饲料（含8%NaCl），连续三天。实验过程中称量每日投放量及回收量，计算每日盐摄入量

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3、结果

（1）一般情况：体重、肾功能及肾脏组织学检测、尾动脉收缩压、钠摄入量、血钠浓度、24H尿量（UV）及尿钠排泄

（2）改变盐负荷后UV的每日变化情况

（3）改变盐负荷后尿钠每日变化情况

（4）不同COX的分布于表达（cox-1、cox-2、肾脏髓质COX-2）

（5）血、24h尿醛固酮的变化

注：方法来源于复旦大学硕士学位论文2021