第22章抗原或抗体的检测

第二十章肿瘤免疫

（tumorimmunity）

概述

肿瘤的发生、发展、诊断、治疗均与免疫有关肿瘤是仅次于心脑血管病的第二大死亡原因。一.肿瘤抗原1、概念：指细胞在癌变过程中新出现或过度表达的物质总称。

在肿瘤发生、发展、机体抗肿瘤、诊断、治疗中有重要作用。2、肿瘤抗原的分类：1、根据抗原的特异性分类1）肿瘤相关抗原（tumorassociatedantigen,TAA)：无严格肿瘤特异性，正常细胞也可表达，但有量的变化。2）肿瘤特异性抗原（tumorspecificantigen,TSA）：仅表达于肿瘤细胞组织，不存在于正常组织中。2、根据肿瘤发生的情况分类1）理化因素诱发的肿瘤抗原具有高度的异质性2）病毒诱发的肿瘤抗原由病毒基因编码，此类抗原具有病毒特异性，但无器官、种属特异性。既同一病毒诱发的不同类型的肿瘤均表达相同的肿瘤抗原。3）自发性肿瘤抗原无明确诱发原因，大多数肿瘤抗原属此类。抑癌基因失活或原癌基因活化编码的蛋白质，如P53的突变蛋白等。4）癌胚抗原或分化抗原胚胎时产生，出生后极少或无，癌变时量增加或分泌极性改变。如：AFP、CEA等。恶性肿瘤细胞在形态、代谢和功能方面类似未分化的胚胎细胞（返祖、去分化），可表达幼稚细胞的分化抗原，但不能刺激免疫应答。

二、机体抗肿瘤免疫机制（一）非特异性抗肿瘤免疫

1、NK细胞特点：广谱抗瘤作用，无需抗原致敏，不受

MHC限制作用：1）直接杀伤（释放穿孔素、颗粒酶）2）通过fas/fasL诱导瘤细胞凋亡3）通过ADCC作用4）释放细胞因子（IL-1、IL-2、

IFN-γ）扩大杀瘤作用ADCCADCC2、巨噬细胞只有激活的巨噬细胞才有杀瘤作用作用：1）ADCC作用2）非特异膜受体与瘤细胞结合3）分泌TNF、IFN、蛋白水解酶4）与致敏T细胞、抗体、补体等共同作用3、γδTL

（二）特异性抗肿瘤免疫体液免疫机制

1激活补体系统溶解肿瘤细胞

2ADCC3抗体的调理作用

4抗体封闭肿瘤细胞上的某些受体

5抗体使肿瘤细胞的粘附特性改变或丧失转铁蛋白RTumor+—Anti-R细胞免疫机制1、CD4+Th细胞：释放多种细胞因子：

IL-2、IFN-γ--激活单核-巨噬细胞、NK细胞

IL-2—活化CTLIFN-γ—促进肿瘤细胞表达MHC-I类分子，利于肿瘤抗原的提成，激活CTL，

TNF—直接杀伤肿瘤细胞2、CD8+CTL

肿瘤免疫的主要效应细胞通过通过细胞毒作用，直接杀伤肿瘤细胞。

Howcanweharnesstheimmuneresponse?TumourcellpresentBrokenuptoreleaseantigensAPCAPCrecruitsTcellsabletorecognisetumourantigensTTThCTLCTLrecogniseanddestroyothertumourcellsCTLThcellseducateotherT/BcellsBAb/ADCC/cytokineattack*淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）病人淋巴细胞（体外）IL-2激活回输病人*肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）激活病人Tumor分离淋巴细胞IL-2回输

三、肿瘤的免疫逃逸机制

1、肿瘤细胞的抗原缺失和抗原调变

*肿瘤抗原和正常组织蛋白差异小---免疫原性弱*肿瘤细胞表面抗原表位减少或缺失--不易被免疫系统识别2、肿瘤细胞的“漏逸”肿瘤细胞生长迅速超越了机体抗肿瘤的限度，机体不能有效清除肿瘤细胞。3、肿瘤细胞MHC-I类分子表达异常4、肿瘤细胞分泌免疫抑制因子5、肿瘤细胞缺乏协同刺激因子6、可溶性抗原封闭抗体7、肿瘤细胞可诱导免疫细胞凋亡肿瘤细胞可高表达fasL，与肿瘤特异性T细胞表达的fas结合后，可引起T细胞凋亡五、肿瘤的实验室诊断和免疫治疗检测注意点：1.多数为非特异性2.常检测异常表达的一些物质（又称肿瘤标志物）：细胞分化抗原、胚胎抗原、激素、酶、受体、生物活性物质3.常用联合检测方法

（一)免疫学诊断1、血清肿瘤相关标志物检测免疫标记技术（ELISA、放免）、化学发光等。结果快、特异，敏感可达0.01µg/ml2、免疫组化法3、体内免疫成像诊断Monoclonalantibodies:

useasadiagnostictool乳腺癌（二）免疫治疗目的：激发和增强机体的免疫功能，控制和杀灭肿瘤细胞方法：1、主动免疫治疗

应用肿瘤疫苗或基因工程疫苗免疫，激发机体增强抗瘤免疫应答。采用自体或异体癌细胞制成活或死瘤苗（尽可能保持、增强其免疫原性）

细胞疫苗

★基因修饰的肿瘤细胞细胞因子的基因或MHCI分子的基因，B7基因等转移入肿瘤细胞，降低致瘤性，增强免疫原性。

★基因修饰的树突状细胞

分子疫苗

★胚胎抗原疫苗

★人工合成肽疫苗肿瘤抗原多肽+佐剂（如HSP）蛋白多肽瘤苗

★与肿瘤发生有关的病毒疫苗

★癌基因产物的分子疫苗

★抗独特型抗体疫苗核酸疫苗Dendritoma免疫治疗的抗肿瘤效应DCs高表达CD1α,CD83和募集Th细胞的共刺激分子CD80、CD86和MHCⅡ(HLADR)抗原。肿瘤细胞与DCs融合，可获得既具有独特肿瘤特异性抗原又具有DCs协同刺激作用的杂合体-DendritomaDendritoma-杂合体细胞表达肿瘤特异性抗原、MHCⅠ、Ⅱ类抗原和协同刺激分子，回输体内具有抗瘤作用。2、被动免疫治疗给机体外源性免疫效应物质：抗体、细胞因子、免疫细胞等，使机体发挥抗肿瘤作用。

1）抗瘤抗体介导的靶向治疗‘Passive’immunotherapyAdminstrationofmonoclonalantibodieswhichtargeteithertumour-specificorover-expressedantigens.Killtumourcellsinavarietyofways:ApoptosisinductionComplement-mediatedcytotoxicityADCCNKMØConjugatedtotoxin/isotope2）过继性免疫治疗（adoptiveimmuno-therapy)*细胞毒性T细胞（CTL）：患者T细胞在体外与自体瘤细胞共同培养，建立特异的CTL*淋巴因子激活的杀伤细胞（LAK）：外周血淋巴细胞在IL-2刺激下，体外培养后回输*肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）：浸入肿瘤组织的淋巴细胞，取出后用IL-2

刺激后回输。比LAK好。增加MHC-I分子的表达，可能为抗肿瘤机制缓解毛细胞白血病,对癌症有弱的效应IFN-αβIFN-β增加MHC-I分子的表达,激活Tc

和NK细胞缓解卵巢癌IL-2使T细胞活化和增殖,激活NK细胞缓解肾细胞癌和黑色素瘤TNF-α

激活巨噬细胞和淋巴细胞减少恶性腹水3）细胞因子用于免疫治疗CompleteregressionofalargelivermetastasisfromkidneycancerinapatienttreatedwithIL-2.RegressionisongoingsevenyearslaterEffectivetherapiesRosenberg(2001)Nature,411;381-4胸腺素产生干扰素吡喃,多聚I:C激活巨噬