生物：第二部分《实验六α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测》(浙科版选修1)

实验六α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测背景：酶在应用过程中存在的问题①天然酶对强酸、强碱、高温等敏感，易失活②难回收，提高了生产成本③反应后酶混在产物中，影响产品质量

将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。固定化酶基础知识：酶的固定化技术酶固定化的方法：a、吸附法：将酶吸附到固体吸附剂表面的方法，如：活性碳、多孔玻璃、石英砂等固体吸附剂酶d、包埋法：将酶包裹在凝胶交联后的格子中c、交联法：b、共价偶联法酶的某些基团（如氨基末端、羧基末端）与载体共价结合。利用试剂与酶之间发生分子交联来把酶固定化的方法。a、吸附法：实验六α-淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测实验目的：1.掌握α-淀粉酶的固定化2.检测固定化α-淀粉酶的效果实验设备和材料：38页—39页固定化酶柱气门心夹子5ml注射器1.α-淀粉酶的固定化吸附5mgα-淀粉酶+4ml蒸馏水+5g石英砂，搅拌30min装入下端接有气门心并用夹子封住的注射器中

用10倍柱体积的蒸馏水洗涤除去游离淀粉酶（1mL/min)装柱洗柱如何证明淀粉酶已全部被固定?蒸馏水洗柱流出的水+淀粉，保温几分钟后+KI-I2变蓝说明水中无游离的淀粉酶，已全部固定固定化装置—反应柱淀粉α-淀粉酶糊精β-淀粉酶葡萄糖糖化淀粉酶麦芽糖遇碘显蓝色红色实验原理：2、淀粉水解的检测一定浓度的淀粉流经固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，流出物用KI-I2溶液测试呈红色。枯草杆菌的α-淀粉酶：最适温度为50-75℃；最适PH为5.5-7.5溶解淀粉50mg淀粉溶于100ml热水中，搅拌均匀过柱使淀粉溶液以0.3ml/min的流速过柱，在流出5ml淀粉后接收0.5ml流出液。检测加入1-2滴KI-I2溶液，观察颜色变化。用水稀释1倍后再观察颜色。保存及再次使用10倍柱体积蒸馏水洗涤此柱，放置4℃冰箱保存，几天后取出重复实验。实验步骤：

让淀粉和固定的α-淀粉酶充分反应2.3实验结果12341、水+1~2滴KI-I2溶液、淀粉液+1~2滴KI-I2溶液、流出液+1~2滴KI-I2溶液、稀释1倍的流出液+1~2滴KI-I2溶液类型优点不足直接使用酶催化效率高，低耗能、低污染等容易失活；很难回收，提高生产成本；酶会混在产物中，可能影响产品质量固定化酶易与产物分离、反复利用一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的直接使用酶和固定化酶的优缺点有些生物无性别，如大部分植物（雌雄同株）；有性别的生物大部分由性染色体决定性别XY型（雌性为同型的XX，雄性为异型的XY)ZW型（雄性为同型的ZZ，雌性为异型的ZW)有些生物X比Y大，有些生物Y比X大果蝇9.1、将从大肠杆菌得到的磷酸三酯酶固定到尼龙膜上制成制剂，可以用来降解残留在土壤中的有机磷农药，与用微生物降解相比，其作用不需要适宜的（）A、温度B、PHC、水分D、营养D习题巩固2.某一实验小组的同学，欲通过制备固定化酵母细胞进行葡萄糖溶液发酵实验，实验材料及用具齐全。（2）该实验小组用如图所示的装置来进行葡萄糖发酵①图中a为固定化酵母；b是反应柱。②从上端漏斗中加入反应液的浓度不能过高的原因是：

。③为使该实验中所用到的固定化酵母细胞可反