药物分析07第七章 芳香胺类药物的分析1

第七章芳香胺类药物的分析AnalyticalofAromaticamines芳香胺

(Aromaticamines)

芳胺类

芳烃胺类（1）（2）氨基苯甲酸酯类药物苯胺的酰基衍生物苯乙胺类药物（1）（2）

苯丙胺类药物

Page2第一节芳胺类药物的分析结构

(Structure)1.

芳伯氨基：重氮化－偶合反应；与芳醛缩合成希夫（Schiff）碱；易氧化变色2.水解：受光线、热、碱的影响；盐酸丁卡因→氨基苯甲酸3.

弱碱性：叔胺氮原子，生物碱沉淀剂反应，非水溶剂滴定4.

溶解性：游离碱，油状液体或低熔点固体难溶于水，易溶于有机溶剂；盐酸盐白色结晶粉末，具一点的熔点，易溶于水和乙醇，难溶于有机溶剂。化学性质

(Feature)苯佐卡因(benzocaine),盐酸普鲁卡因(procainehydrochloride),盐酸丁卡因(tetracainehydrochloride).1.对氨基苯甲酸酯类都含有对氨基苯甲酸酯的结构母体

Page32.酰胺类对乙酰氨基酚醋氨苯砜盐酸罗哌卡因1.

水解后显芳伯氨基特性2.

醋酸乙醇/硫酸醋酸乙酯3.酚羟基特性4.弱碱性：叔胺氮原子＋生物沉淀剂→沉淀5.酰胺氮原子与金属离子络合显色盐酸妥卡尼结构

(Structure)化学性质

(Feature)对乙酰氨基酚(paracetamol),醋氨苯砜(acedapsone),盐酸利多卡因(lidocainehydrochloride),盐酸布比卡因(bupivacainehydrochloride).(共性)(特性)共性是具有芳酰胺基

Page4芳伯氨基：苯佐卡因、盐酸普鲁卡因、盐酸普鲁卡因胺

NaNO2/HCl碱性β-萘酚有色偶氮染料（橙黄到猩红色）（一）重氮化－偶合反应鉴别试验

(Identification)

Page5潜在芳伯氨基：对乙酰氨基酚、醋氯苯砜盐酸或硫酸加热水解NaNO2/HCl碱性β-萘酚有色偶氮染料（红色）区别盐酸丁卡因：（乳白色）（一）重氮化－偶合反应鉴别试验

(Identification)N-亚硝基化合物↓

Page6（二）与三氯化铁反应（蓝紫色）鉴别试验

(Identification)

Page7（三）与金属离子反应与铜和钴离子反应（具有芳酰胺结构的，如盐酸利多卡因）硫酸铜/碳酸钠试液→蓝紫色配合物→氯化钴/酸性溶液→亮绿色细小钴盐沉淀↓显黄色（溶于氯仿）鉴别试验

(Identification)

Page8（三）与金属离子反应2.

羟肟酸铁盐反应（具有芳酰胺结构的，如盐酸普鲁卡因胺）浓过氧化氢/加热至沸羟肟酸三氯化铁羟肟酸铁（紫红色→暗棕色至棕黑色。）鉴别试验

(Identification)++3+3HCl

羟肟酸铁

Page9（三）与金属离子反应3.

与汞离子反应芳酰胺类，如盐酸利多卡因硝酸汞/硝酸，煮沸对氨基苯甲酸酯类，如苯佐卡因硝酸汞/硝酸，煮沸黄色红色或橙黄色鉴别试验

(Identification)与对氨基苯甲酸酯类可区别。

Page10（四）水解产物反应（酯键结构）1.盐酸普鲁卡因＋10％氢氧化钠溶液→白色↓（加热变为油状物）继续加热蒸气（二乙氨基乙醇）↑（能使润湿的红色石蕊试纸变为蓝色）加热至油状物消失放冷、加盐酸白色↓（能溶于过量的盐酸）2.苯佐卡因＋氢氧化钠试液煮沸乙醇加入碘试液/加热黄色↓（碘仿臭气）

鉴别试验

(Identification)

Page11（五）制备衍生物测熔点1.盐酸利多卡因三硝基苯酚三硝基苯酚利多卡因（mp.228~232℃）

盐酸布比卡因三硝基苯酚布比卡因（mp.194℃）2.盐酸丁卡因25％硫氰酸铵溶液/5％醋酸溶液丁卡因硫氰酸盐（mp.131℃）鉴别试验

(Identification)

Page12（六）紫外特征吸收光谱药物溶剂浓度(μg/mL)λmax(nm)备注对乙酰氨基酚HCl(10.3g/L)-甲醇(1:99)0.4%NaOH10249860～980BP2003,8257715Chp2005用于含量测定苯佐卡因氯仿278USP24与对照吸收相同，两者之差不超过3.0%盐酸丁卡因pH6磷酸盐缓冲液10310同上，两者之差不超过2.0%盐酸普鲁卡因胺0.1mol/LNaOH10273580～610BP2003水5280Chp2005，片剂和注射剂鉴别醋氨苯砜无水乙醇5256，284Chp2005鉴别试验

(Identification)

Page13（七）红外吸收光谱盐酸普鲁卡因盐酸普鲁卡因胺波数cm-1

波数cm-1

鉴别试验

(Identification)酯羰基υC=O1692－酯基υC-O1271,1170,1115－二乙胺盐υN-H25852645（略向高波数）－1550（δN-H酰胺Ⅱ带）－1280（υN-H酰胺Ⅲ带）

Page14（一）对乙酰氨基酚中的特殊杂质工艺：对乙酰氨基酚有色氧化产物乙醇溶液的澄清度与颜色：中间体对氨基酚的有色氧化产物在乙醇中显橙红色或棕色。（比浊，比色）有关物质：中间体、副产物及分解产物（例：对氨基酚、对氯乙酰苯胺、O-乙酰基对乙酰氨基酚、偶氮苯、氧化偶氮苯、苯醌和醌亚胺等）药典规定：以对氯乙酰苯胺为对照品，TLC限度检查。对氨基酚的检查特殊杂质检查

(Detectionofspecificimpurities)

Page15对氨基酚乙酰化不完全或贮藏不当引起水解－毒性较大并有色泽检查方法：取本品1.0g，加甲醇溶液（1→2）20ml溶解后，加碱性亚硝基铁氰化钠试液1ml，摇匀，放置30min；如显色，与对乙酰氨基酚对照品1.0g加对氨基酚50μg用同一方法制成的对照液比较，不得更深（0.005%）。注：对氨基酚对照溶液不稳定，应临用前新鲜配制。特殊杂质检查

(Detectionofspecificimpurities)（亚硝基铁氰化钠）（蓝色）

Page16（二）盐酸普鲁卡因注射液中对氨基苯甲酸的检查限度：水解产物对氨基苯甲酸，不得超过1.2%。检查方法：TLC法，对氨基苯甲酸对照品对照，对二甲氨基苯甲醛溶液显色。黄色特殊杂质检查

(Detectionofspecificimpurities)氨基苯甲酸苯胺

Page17容量分析方法色谱法分光光度法亚硝酸钠滴定法非水溶液滴定法含量测定(Assay)spectrometrysodiumnitritemethodnon-aqueoustitrimetryvolumetricanalysischrometography

Page18亚硝酸钠滴定法

sodiumnitritemethod原理：芳香胺类药物分子结构中具有芳伯氨基或水解后具有芳伯氨基，在酸性溶液中与亚硝酸钠成重氮盐，可用亚硝酸钠滴定法测定含量。

Page19亚硝酸钠滴定法

sodiumnitritemethod测定主要条件：加入适量溴化钾加快反应加入过量盐酸加速反应重氮化反应加快；重氮盐在酸中稳定；可防止生成偶氮氨基化合物。反应温度

重氮化反应速度与温度成正比。

滴定速度为避免亚硝酸挥发和分解，滴定管尖端插入液面下滴定在不同酸中重氮化反应的速度为：HBr＞HCl＞H2SO4＞HNO3

Page20

永停滴定法

终点前：无过量无电流

HNO2

终点时：有过量有电流（使指针偏离零

HNO2永停在某一位置）

永不回复。即为滴定终点。

Page21非水溶液滴定法

non-aqueoustitrimetry盐酸丁卡因盐酸利多卡因侧链烃胺的叔胺氮侧链哌啶环的叔胺氮弱碱性高氯酸非水滴定注：滴定前滴加醋酸汞溶液，以除去氢卤酸的干扰盐酸丁卡因－加醋酐以突出终点；例：盐酸利多卡因的非水滴定反应过程：指示剂：结晶紫指示剂：萘酚苯甲醇盐酸布比卡因

Page22分光光度法

(spectrometry) 对乙酰氨基酚在257nm波长处有最大吸收，中国药典2005版采用百分吸收系数（）法，测定对乙酰氨基酚的含量。【含量测定】取本品约40mg，精密称定，置250ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液50ml溶解后，加水至刻度，摇匀，精密量取5ml，至100ml量瓶中，加0.4%氢氧化钠溶液10ml，加水至刻度，摇匀，照紫外－可见分光广度法（药典Chp2005版附录ⅣA），在257nm的波长处测定吸光度，按C8H9NO2的吸收系数（）为715计算，即得。例：对乙酰氨基酚、片剂、咀嚼片、注射液、栓剂、胶囊、颗粒剂

Page23比色法芳伯氨基的重氮化－偶合反应生成有色偶氮染料 －－专属性差盐酸普鲁卡因与1,2-萘醌-4-磺酸钠溶液反应生成棕红色化合物 －－适用于盐酸普鲁卡因及其制剂的常规分析快速荧光测定盐酸普鲁卡因胺结构中的芳伯氨基与荧胺反应，生成荧光物， 可在λ400nm、λ485nm波长处测定荧光强度 －－较重氮化法灵敏、简便，适用于普鲁卡因胺制剂的测定。

Page24以苯甲酸为内标，可以同时测定盐酸普鲁卡因注射液中的普鲁卡因及其降解产物对氨基苯甲酸（PABA），不需分离提取，准确简便。

色谱条件（色谱柱、流动相、检测器）

测定方法（供试品溶液、对照品溶液的制备，进样量，计算方法）高效液相色谱法(HPLC)

Page25体内药物分析应用示例：对乙酰氨基酚急性中毒的血药浓度测定色谱条件：Nova-PackC18柱（4μm,150mm×3.9mm），Nova-PackC18预柱 柱温：25℃，流动相为甲醇－水（50:50）流速：0.8ml/min

二极管阵列检测器，检测波长254nm血浆样品制备：取静脉血3～4ml，置含肝素抗凝剂的离心管中，离心分离 5min(3000rpm)，上清液为待测血浆。吸取上述血浆