实验室常用生物安全操作技术1415

病毒学国家重点实验室武汉大学基础医学院医学病毒研究所实验室生物安全实验室常用生物安全操作技术

1实验室常用仪器的生物安全操作

2课程内容3生物安全管理组织体系实验室常用生物安全操作技术

一.血清分离的生物安全操作

血清分离作为实验室的常规工作，应有相应的标准操作程序。1.血清分离操作时应戴手套，同时做好眼晴和粘膜的防护措施。

2.进行血清或血液操作时，应用移液器小心吸取，不能倾倒。

3.移液管使用完后应完全浸入适当的消毒液中，要浸泡足够长的时间，然后再丢弃或高压灭菌后重复使用。

4.准备适当的消毒剂来清洗喷溅和溢出的样品。5.带有血凝块的废弃样品管，在加盖后置于适当的容器内高压灭菌。二.组织匀浆器和研磨器的生物安全操作

可能造成的危害因素为气溶胶，溢漏和容器破碎。

1.使用实验室专用的结构上可以最大限度避免气溶胶产生的组织匀浆器，homogenizer。当使用匀浆器处理危险度3级以上的微生物时，应在生物安全柜中进行操作。

2.尽量选用在转子轴承和垫圈处有防漏设计的机型。器具的盖，管和瓶体应处于良好状态，无裂缝或变形。3.使用匀浆器或超声处理器，sonicator时，应选择有一定强度的透明塑料罩设备，并在操作后进行消毒处理。这些仪器也可以在生物安全柜内覆盖塑料盖后操作。

4.玻璃研磨器,glassgrinder外部应使用吸收材料包裹，戴手套操作，以采用聚四乙烯塑料研磨器较为安全。操作和打开研磨器时应当在生物安全柜内进行。

三.搅拌器和振荡器的生物安全操作

可能造成的主要危害为气溶胶，飞溅物和溢出物。

1.使用实验室专用的搅拌器,stirrer和混匀器,vortex.2.使用这些仪器前，所使用的管子，盖子，杯子和瓶子都应保持完好，无裂缝，无变形。采用结实的螺旋盖培养瓶，瓶口装有防护滤膜。

3.在混匀，振荡的过程中，容器的压力会增加，所以装容液的容器应控制样品量，含有感染性材料的气溶胶可能从容器和盖子之间的空隙逸出。4.使用搅拌器和振荡器,oscillator时，应有防护装置，并在生物安全柜中操作。特别在使用涡旋振荡器时，必须在生物安全柜内操作，操作的容器必须是密闭的，以免产生气溶胶和液体飞溅而污染工作台面。四.离心机使用的安全操作技术

可能造成的危害因素为气溶胶，飞溅物和离心管液体泄露。在离心过程中可以产生高速运动的气溶胶颗粒，在传统开口的I级和II级生物安全柜内，也不能防护这些产生的气溶胶。1.在使用离心机时，应按操作程序使用离心机，保持离心机有良好的机械性能。

2.离心管和装液体的容器应为厚壁玻璃，最好为塑料制品，应检查是否破损。

3.用于离心的试管和标本容器应当始终牢固盖紧。采用封闭式的吊桶，离心杯和转头。固定角转头要加盖离心，用前要检查密封圈是否完好。水平转头最好选用风屏密闭式的离心机。4.离心机吊桶，套管，离心管必须按重量配对，准确配平，空离心桶应当用水来平衡，而不能使用盐溶液。离心管中溶液不能装过量，应留有适当空间。5.对危险度3级和4级的微生物，必须使用可封口的离心桶。生物安全管理组织体系

我国的实验室生物安全管理组织体系由国家、地区、单位上级主管部门、实验室所在单位和实验室五个层面构成。国家病原微生物实验室生物安全专家委员会

组成由国务院卫生主管部门和兽医主管部门会同国务院有关部门与病原学、免疫学、检验医学、流行病学、预防兽医学、环境保护和实验室管理等方面的专家组成。职责承担从事高致病性病原微生物相关实验活动实验室的设立与运行的生物安全评估和技术咨询、论证工作。地区病原微生物实验室生物安全专家委员会

组成由省、自治区、直辖市人民政府卫生主管部门和兽医主管部门会同同级人民政府有关部门组织病原学、免疫学、检验医学、流行病学、预防兽医学、环境保护和实验室管理等方面的专家组成。职责承担本地区实验室设立和运行的技术咨询工作。单位或上级主管部门病原微生物实验室生物安全委员会

组成由病原微生物实验室所在单位或上级主管部门成立的生物安全委员会。

职责制定所在单位的生物安全规章制度、操作规范和标准操作程序等；对某些研究方案进行审查和风险程度评估；负责日常监督和检查。

实验室感染控制管理机构

组成该实验室具有病原微生物有关的传染病防治知识的机构或人员。

职责承担实验室感染控制工作，定期检查实验室的生物安全防护、病原微生物菌毒种和样本保存与使用、安全操作、实验室排放的废物处置等规章制度的实施情况。生物安全委员会的组成

生物安全委员会制定所在单位的生物安全政策和操作规范，研究方案涉及感染性因子，动物使用和重组DNA时，生物安全委员会应进行审查。其它工作还包括危险度评估，制定新的安全政策和仲裁安全事件纠纷。

生物安全委员会的组成

⒈生物安全官员⒉生物科学研究人员⒊医务人员⒋动物科学研究人员⒌技术人员⒍实验室管理人员生物安全官员

在一个研究机构，生物安全官员可以是微生物学家或者是一位专业人员，他们可以以兼职的形式来完成这一职责，必须具有良好的微生物学实验室工作背景和实验室安全工作的经验。⒈定期的生物安全检查⒉确保所有工作人员都接受了适当的教育和培训⒊对所有人员进行继续安全教育⒋为工作人员提供新的安全操作程序和资料⒌参与感染性物质和有毒物品意外事故的处理和调查实验室负责人

组成由实验室负责人或任命的具有专业知识的实验室生物安全负责人。

职责对所有员工和实验室来访者的安全负责。2、生物安全管理制度规章制度

1.人员培训制度

2.实验室准入制度

3.安全计划审核制度

4.安全检查制度

5.事件、伤害、事故和职业性疾病报告制度

6.危险标识制度

7.记录制度

管理规范

1.实验室安全手册

2.食品、饮料及类似物品

3.化妆品、发、珠宝

4.免疫

5.个人物品

6.内务行为

7.洗手

8.接触生物源性材料的安全工作行为

9.减少接触有害气溶胶行