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CapillaryGelElectrophoresis毛细管凝胶电泳CITPCZECIEFCGECECCapillaryGelElectrophoresis根据带电组分的大小分离毛细管的表面电荷少分离介质交联聚丙烯酰胺线性聚丙烯酰胺其它可更换的水溶性聚合物适用于淌度相近而大小不同的组分DNAProteins-SDScomplexOgstonModelRepatationModelCH2=CHC=ONHCH2NHCH2=CHC=OCH2=CHCONH2丙烯酰胺量(a)甲叉双丙烯酰胺(b)PA凝胶的浓度T和CT-单体和交联剂的百分浓度C-交联剂的量a-丙烯酰胺量(g)b-甲叉双丙烯酰胺的量(g)m-缓冲溶液的体积(ml)聚丙烯酰胺凝胶毛细管柱的制备方法检测窗口制备内壁修饰
120°C热空气吹,室温氨气冲洗2h,后50%3-甲基丙烯酰氧丙基-三甲氧基硅烷(3-methacryloxypropyl-trimethoxysilane)充满一昼夜后,用甲醇和水冲洗缓冲溶液制备1.1gTris和0.01gEDTA溶于100ml7M尿素溶液,用NaH2PO4调至pH8.6单体溶液制备29g丙烯酰胺和1gN-甲叉双丙烯酰胺溶解在100ml缓冲溶液中催化剂制备0.2g过硫酸铵溶于2ml缓冲溶液中凝胶溶液制备10ml单体溶液加入到30ml缓冲溶液中,甲4ul催化剂溶液,2.5ul
四甲基乙二胺(TEMED)预聚合45分钟灌注聚合上述凝胶溶液注入毛细管到无气泡,将两端浸入缓冲溶液中聚合数小时。亲水高分子聚合物无胶筛分体系MobilityofdsDNAandthechoiceofgelconcentration凝胶的浓度-ssDNAConcentrationofHPMContheseparationofdsDNAladderA-0.1%,B-0.3%,C-0.7%电场强度ssDNA高效分离塔板数达3千万!EBanddsDNAssDNASanger链中止法扩增测序HVsupplyCapillaryGlassslideDetectionwindowITOthermostatPCRvialFractureChipPCRonlinewithchipCEDenaturingofproteinbeforeSDS-CDenaturecondition:1%SDS,2%beta-mercaptoethanol30minat90C.SDSCGEofprot
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