cho基因敲除细胞系

北京维尚立德生物HO-GS-/-1isderivedfromCHO-K1cell(ATCC),andKnock-outglutamate-ammonialigasegenebyTALEN,thenadapttosuspensionculturewithserumfreeculturemedium.Cho细胞来源：ATCCCHOK1Genotypesequence：CHOGSWT:TTTrATTTATCjCTrTCTrGAT0CrTCIArAaTATCIT03TATrTTAA^GIGCTTIIGTTAAAJOlGTTCTrTTJUAAjlCACACTAATTjlGGCaGA；CCGAGAATGW端T黑及C3虻居CCIG解KCWKCAAMTOCT彼8：TCTCTTWCCTWTTCTOSTWCTICKGOCCTCTCC虹卷IC匚乩TCATCCOGCCAGOC©KTC^AiC妣1兀迎的值皿蛆工诙匚鲍酊1口归TTGAX：AAAGGCATC姻C^AATGTKMGTCCCTGCCC匚用;OCTa;山加;TCCAAGCCATGT且TMCQGCTE&XTAOCGG蛇她;G■氏值GCTGCAA山归CCGCmtCTGGKWK且GCCCMGTGTGT&GAAGJGmCCTGA6TGGAAmTGGTGGGTC"GTA0CTTTC)TCrGMGGCTOCA也由TG比ATGT&ICTC防COCTGGTGCCMGTITOGGGKCC匚TTCCGC3&AGCCCAACMGCTGGTGTT匚TG正蜘TCTIC她比WZA虹CGGAXCCCGCAG寓ADCAATTIA解GCASCGTGTAAKGGATAArGGJCKTGGGG蛇CMCCAGCAOCC匚TGGGTTGGAA际&C也为国■TATI匚TCKTTGGGAmGATGGG绘OCTTTTGGTTGGCCTTCCG2TGGC11匚OCTGGCCCCQUGGTCTTTTTTACTGTGGTGTGGGOGC^jm^CCCTTCGCAGCGGTAIC也TGGA；GCTCACTWZCCTCCCTGQTmATG匚TGGGGTC2TTKJGGA^ETTTGC芯GGGTCMGCATGOOC加TGGG肥］TCCAAAITGGGOCCT^GAAGGAAICOGCATGCG的ATCATCTGIGGG1G(XCgTTCMCngTCG■端TATG 1KGGGT驰I解CAAOCTTIG氏皿四COC且TIOCTOGG血EG配值值蜕匚工GCCATMA^TTT/T故CAAGMCATGCGaG因AGAAKGTCKAA就此ATW居场的CATTG胡贴ACTM^AASO；氯ACOGGTAHAT也TTTG&GCCTKGGICCCAAGGCGGGGCTGGGCAATCCCCGKGTCTG&CTGGGTKC匿AM啦rKC诋好C岫:函:TTTIC蜕IGCCGICXCa；ATTGC照TGOC端CAT皿CAIMOOGGKTCT淡CC殿照A^AA^GTTMTT翼AA(SOCOGCT^CaCKTGOCAATT；KmCE际甑TGACAGMGCC用OGTCOG函CTGOCCTCTCAArGAGKKGCG■妣国CCCCrOCAM氏AAA血TAASACX：TnG舫TG4TCTTG及CCCTTCCTAGTTCATCCaOCCTGTOX展1KTCTTCATTGTAACTC如KATWMT加翅GTCTTTTTATTCCTOGAAAUMAAAMA^加TAATTATGTrAOAATAMTTA】GSKnock-outgenotype:5bpGSKnock-outgenotype:5bpMutant:TATCTCAGCCCTGTTGCCATGTATTTTGATGGCTCTAGTACCTTTCAGTCTGAGGGCTCCAACAGTG,TATCTCAGCCCTGTTGCCATGTWT:ATTTTGATGGCTCTAGTACCTTTCAGTCTGAGGGCTCCAACAGTGACATGTATCTCAGCCCTGTTGCCATGTmycoplasmadetectionresult:mycoplasmadetectionresult:1-5:differentcellwellssample;NC:negativecontrol;北京安必奇生物Knockout基因敲除细胞或动物模型一直以来是开展基因功能研究、寻找合适药物作用靶点的重要工具。CRISPR/Cas系统是细菌的一种适应性免疫机制，用来抵抗各种外来核酸的入侵。CRISPR/Cas9技术与ZFN、TALEN相比，更为高效、便捷，成为基因编辑的一个重要工具，在基因工程领域开创了新纪元。改造优化后的CRISPR/Cas9系统由两部分组成：sgRNA和Cas9蛋白。sgRNA特异性识别靶位点后，Cas9蛋白在靶位点附近进行切割，从而形成DSB。安必奇凭借先进的技术平台、专业的科研团队，将为您提供各种Knockout基因敲除细胞系服务，甚至是难转染的细胞，如原代细胞、干细胞、神经元细胞等。我们的一站式服务包括：sgRNA设计、筛选高效的sgRNA、敲除载体构建、敲除效率验证等。我们将会在最短的时间内提供给您高质量的单克隆基因敲除细胞系，以及全面的检测报告，包括靶点设计，靶点基因敲除效率检测，克隆筛选及靶基因检测全部过程。

tracrRNACas9TargetDNANGG20ntcrRNA设审口筛选高效的sgRNAsgRNA表达载体构建细胞转染Pool细胞敲除效率检测细胞克隆筛选tracrRNACas9TargetDNANGG20ntcrRNA设审口筛选高效的sgRNAsgRNA表达载体构建细胞转染Pool细胞敲除效率检测细胞克隆筛选Cruiser™Enzyme酶切、TA克隆测序、4红外一华典边0检测服务内容流程脱靶检测靶点设计-根据目的基因设计相应的靶位点，并构建sgRNA表达质粒。效率检测-通过Cruiser™Enzyme酶切及pool细胞测序对设计的sgRNA进行靶点敲除效率检测。细胞转染-将cas9和sgRNA质粒转染目的细胞。克隆筛选-挑选单克隆细胞，检测细胞基因型。敲除检测-Cruiser™Enzyme酶切、TA克隆测序、qRT-PCR、Westernblot等。我们的^势多样细胞种类-在H1299、2F-2B、4T1、786-O、9607、THP-1、MCF7/ADR、A549、V79、CHO、HepG2等多个种属细胞中成功构建Knockout基因敲除细胞系。一站式服务-我们提供从sgRNA设计至敲除结果检测（DNA、mRNA、蛋白水平）的一站式服务，满足客户不同的需求。各种基因位点-敲除效率不受靶位点限制。敲除效率高-敲除效率达到高，且脱靶效率低，达到100%的准确率。应用前景研究基因的功能及表达调控机制。构建各种基因突变导致的疾病模型如白化病、阿尔兹海默症、镰刀型细胞贫血症等，从而研究疾病的治疗及诊断方法。染色体敲除或大片段敲除［1］。通过设计模版链和同源臂，插入外源基因或修复突变基因，从而进行转基因或突变基因修复实验［2］。利用Cas9的突变体（dCas9）只能特异性识别结合靶位点，而不能产生DSB的特点，可以进行基因表达调控的研究［3-4］以及甲基化等表观遗传学研究［5］。参考文献HeZ,ProudfootC,MilehamAJ,etal.HighlyefficienttargetedchromosomedeletionsusingCRISPR/Cas9[J].Biotechnologyandbioengineering,2015,112(5):1060-1064.SchwankG,KooBK,SasselliV,etal.FunctionalrepairofCFTRbyCRISPR/Cas9inintestinalstemcellorganoidsofcysticfibrosispatients[J].Cellstemcell,2013,13(6):653-658.Perez-PineraP,KocakDD,VockleyCM,etal.RNA-guidedgeneactivationbyCRISPR-Cas9-basedtranscriptionfactors[J].Naturemethods,2013,10(10):973-976.GilbertLA,LarsonMH,MorsutL,etal.CRISPR-mediatedmodularRNA-guidedregulationoftranscript