生化组分的鉴定（以糖和蛋白质为例）_第1页
生化组分的鉴定（以糖和蛋白质为例）_第2页
生化组分的鉴定（以糖和蛋白质为例）_第3页
全文预览已结束

下载本文档

版权说明：本文档由用户提供并上传，收益归属内容提供方，若内容存在侵权，请进行举报或认领

文档简介

基础生物学技术试验生化组分的鉴定（以糖和蛋白质为例）实验结果淀粉的鉴定淀粉原液与碘液反应颜色淀粉原液与碘液反应颜色本尼迪特实验（还原糖鉴定）砖红色沉淀麦芽糖无沉淀，原溶液颜色蔗糖砖红色沉淀麦芽糖无沉淀，原溶液颜色蔗糖蛋白质鉴定双缩脲试验蛋白质溶液（牛血清白蛋白BSA）鲜牛奶鸡蛋清蛋白质溶液（牛血清白蛋白BSA）鲜牛奶鸡蛋清茚三酮试验鲜牛奶鸡蛋清标准蛋白溶液BSA鲜牛奶鸡蛋清标准蛋白溶液BSA问题思考淀粉遇碘液溶液变蓝紫色，加入缓冲液及a-淀粉酶水解后，可以明显看出碘反应减弱最终消失，碘液不变色。说明在酶的作用下，淀粉长链被切断液化成为麦芽糖，碘反应随淀粉含量下降而减弱。由于淀粉在a-淀粉酶液化下成为麦芽糖，为含有游离醛基的二糖，具有还原性，是还原糖，因此可以与本尼迪特试剂反应，在沸水浴条件下生成砖红色沉淀。而蔗糖为无游离醛基的二糖，不具有还原性因此无法与本尼迪特试剂发生反应，水浴后溶液无明显变化。麦芽糖蔗糖麦芽糖蔗糖双缩脲反应：在碱性溶液(NaOH)中，双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)能与Cu2+作用，形成紫红色的络合物，称双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此也能与铜离子在碱性溶液中发生双缩脲反应，且颜色深浅与蛋白质的含量的关系在一定范围内符合比尔定律，而与蛋白质的氨基酸组成及分子量无关，故可用双缩脲法测定蛋白质的含量（借助分光光度计可减小误差）。茚三酮反应：所有氨基酸及具有游离α-氨基和α-羧基的肽与茚三酮反应都产生蓝紫色物质，只有脯氨酸和羟脯氨酸与茚三酮反应产生（亮）黄色物质。此反应十分灵敏，根据反应所生成的蓝紫色的深浅，用分光光度计在570nm波长（最大吸收值）下进行比色就可测定样品中氨基酸的含量。从本次实验结果可以看出三份蛋白质样品在相同显色剂中颜色有明显差别。鸡蛋清颜色最深而BSA溶液颜色最浅。说明样品中蛋白质的含量有明显差别，鸡蛋清的蛋白质含量最高而BSA溶液蛋白质含量最低。实验中的注意事项：在对淀粉进行消化时由于需要水浴加热，因此在加入淀粉酶之前要注意，如果在沸水浴中加热则需先冷却在加酶，以防酶变性失活。如果是在60℃温度下水浴则可以直接加入淀粉酶。进行还原糖鉴定之前，需要靠对淀粉水解程度来预判断溶液中是否已经含有还原糖。若加入淀粉酶后碘反应长时间存在且蓝紫色较深，则无法确定酶是否作用

人人文库> 全部分类> 教育资料 > 备课教案

温馨提示

  • 1. 本站所有资源如无特殊说明，都需要本地电脑安装OFFICE2007和PDF阅读器。图纸软件为CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.压缩文件请下载最新的WinRAR软件解压。
  • 2. 本站的文档不包含任何第三方提供的附件图纸等，如果需要附件，请联系上传者。文件的所有权益归上传用户所有。
  • 3. 本站RAR压缩包中若带图纸，网页内容里面会有图纸预览，若没有图纸预览就没有图纸。
  • 4. 未经权益所有人同意不得将文件中的内容挪作商业或盈利用途。
  • 5. 人人文库网仅提供信息存储空间，仅对用户上传内容的表现方式做保护处理，对用户上传分享的文档内容本身不做任何修改或编辑，并不能对任何下载内容负责。
  • 6. 下载文件中如有侵权或不适当内容，请与我们联系，我们立即纠正。
  • 7. 本站不保证下载资源的准确性、安全性和完整性, 同时也不承担用户因使用这些下载资源对自己和他人造成任何形式的伤害或损失。

最新文档

评论

0/150

提交评论