微生物检验重点知识

微生物知识要点：一、葡萄球菌：TSST-1；耐热核酸酶； 葡激酶；透明质酸酶；脂酶。内膜炎；全身感染败血症、脓毒血症； （毒素相关）食物中毒烫伤样皮肤综合症；毒性休克综合症；假膜性肠炎。鉴定： 细菌和菌落形态； 生化实验：触+微阳性；链+肠阴性葡：杆菌肽R，呋喃唑酮S金黄色葡萄球菌特征：普通平板-脂溶性黄色色素；血琼脂-β溶血；

血浆凝固酶+； 耐热核酸酶甘露醇发酵+2）.如何确定从标本中分离的细菌为葡萄球菌？并确定其有无致病性。72-3mm、产生不同色素的菌落。金葡菌菌落周围有透明溶血环。③试验鉴定：血浆凝固酶试验，甘露醇发酵试验，耐热核酸酶试验，肠毒素测定，SPAA二、链球菌：致病因素：M血素；致热外毒素。III48h几中链球菌特征：A群：血平板β溶血;杆菌肽-敏感BβCAMP+；胆汗七叶苷（—试验（+）草绿色链球菌：血平板α溶血；optochin（—；αoptochin（+荚膜肿胀实验（+）三、大肠埃希菌致病因素：侵袭力（K；内毒素；肠毒素（LT，ST）临床意义：肠道外感染（等；肠道感染：EHEC、ETEC、EPEC、EIEC、EaggEC鉴定：普通平板（湿润、光滑、灰白中等大小菌落）葡萄糖发酵（+，硝酸盐还原（+，氧化酶（—，触酶（+）中国兰平板（蓝色，伊红美蓝（紫黑色）SS（红色）四、志贺菌属致病因素：侵袭力（菌毛；内毒素；外毒素（ST，Vero）临床意义：1）急性细菌性痢疾：腹痛腹泻脓血粘液便，里急后重，发WBC；中毒性菌痢多见于小儿，2）疾；3）携带者鉴定：葡萄糖发酵（+，硝酸盐还原（+，氧化酶（—，触酶SS清学鉴定。简述对疑似痢疾患者进行病原学诊断的常规与快速方法。答：常规鉴定：①初步鉴定②最后鉴别③鉴别试验④血清学鉴定⑤非典型菌株可用传代法与毒力试验进行鉴定。生物学方法五、沙门菌属致病因素 侵袭力（Vi抗原，内毒素，肠毒素。临床意义 胃肠炎（食物中毒；菌血症和败血症；肠热症（伤寒副伤寒）SS菌，需进一步生化反应鉴定，3．如何根据O抗体和H抗体的变化特点判断肥达试验的结果？答：若OHOHOHO4．对肠热症患者进行微生物学检查时标本采集应注意什么？答:根据不同的疾病、不同的病程取不同的标本。肠热症第1、2周取外周血，第2、3周取粪便、尿液，全程可取骨髓分离培养细菌。六、铜绿假单胞菌4℃42℃5鉴定：革兰阴性杆菌，葡萄糖氧化发酵（氧化型，动力阳性，氧化酶+，.触酶（+，专性需氧，营养要求不高，麦康凯上生物良好，初始分离培养基特征性菌落（扩展性，平坦，具有锯齿边缘，金属性光泽，产生蓝绿色色素，玉米面气味）42度长，4度不长。七、嗜血杆菌简述流感嗜血杆菌的生物学特点.答：革兰阴性短小球杆菌，无芽胞、无鞭毛、不能运动，多数菌有荚膜。需氧或兼性厌氧最适生长温度35℃，最佳培养基是巧克力琼脂。临床意义：脑膜炎、鼻咽炎、关节炎、心包炎，鼻窦炎，中耳炎CO2力平板，露滴状菌落。八、霍乱弧菌霍乱患者为什么会出现剧烈腹泻与严重脱水的症状？1A5B，BAAcAMP导致肠粘膜细胞内的水、氯和碳酸氢钾等过度分泌到肠腔，同时钠的吸收减少，导致严重的腹泻和呕吐.九白喉棒状杆菌简述白喉棒状杆菌的致病过程。白喉棒状杆菌在鼻咽部粘膜处繁殖并产生外毒素，引起局部炎症和全身中毒症状。白喉杆菌在侵犯局部增殖，产生外毒素致病2．简述白喉杆菌体外毒力试验的原理、方法与结果判断。答：①琼脂平板毒力试验。将含有20%牛血清肉汤琼脂分注与平皿中，每只平皿(Elek平板)。在与滤纸条相垂直的方向将待检菌画直线接种，划6-7mm，10mm37℃24-48②SPAIgGSPASPA-IgG30min. .一，直或微弯，一端或两端膨大，排列呈B九结核杆菌2D3D结核分枝杆菌细胞壁中脂质含量高，这一特点有何意义？答：结核分枝杆菌胞壁含脂质多，与其染色性、抵抗力、生长速度与致病性等特性有密切关系，脂质中的分枝菌酸使其具有抗酸性；细胞壁含大量脂质，可故生长缓慢，且脂质中的磷脂、索状因子、蜡质D、硫酸脑苷脂等毒性成分以不同机制致病。简述从标本中检验结核分枝杆菌的方法。答：1．显微镜检查(1)直接涂片染色镜检：是一种临床常用的简易快速的检查方法。直接涂片法是用接种环取病人痰液中浓厚部分或离心沉淀(3000r／min，20min)的尿沉淀物2—3接种环涂片，涂片要厚。经自然于燥和火焰固定后进行齐-尼抗酸染色，或作金胺荧光染色。前法用油镜检查，后法用荧光显微镜高倍镜检查镜检时应仔细查遍整个涂片或观察至少100个视野结核分枝杆菌抗酸染色后呈红色其它细菌和细胞为蓝色经荧光染色的结核分枝杆菌在黑色背景中呈亮黄色。涂片镜检结果应报告“找到抗酸性杆菌’或“未找到抗酸性杆菌，而不能报告“找到结核分枝杆菌。(2浓缩集菌涂片检查法：如果直接涂片镜检不易检出结核杆菌应采用浓缩集菌涂片检查法以提高结核杆菌的检出率所谓浓缩集菌涂片即为将采集标本离心取沉淀涂片或是采用漂浮集菌法，集菌后标本经反复多次使涂层加厚，一般取3—4个接种环，涂抹面积大约直径在15mm即可，干燥固定后染色镜检2．核酸检测用PCR法快速诊断结核分枝杆菌感染设计结核分枝杆菌特异rRNA片段的引物进行扩增然后用结核分枝杆菌rRNA序列特异的DNA探针与之杂交PCR技术的特异性与敏感性均大于95％抗PPDIgG的检测 用ELlSA法检测患者血清中抗可作为活动性结核分枝杆菌感染的快速诊断方法之一肺结核病人的血清阳性率为80％—90％。简述抗酸染色的步骤与结果，并举出两种抗酸菌。5min②脱色：31min③1min杆菌均为抗酸菌5．一患者怀疑患有肺结核，如何进行微生物学检查？（包括标本采集至报告）答：1）标本采集：根据感染部位不同，采集不同的标本。2）标本直接检查：PPDIgG3）分离培养与鉴定4）5）6）动物接种.梅毒螺旋体获得性梅毒（TP）官肉芽肿。标本直接检测1、 暗视野显微镜检查2、免疫荧光染色3、镀银染色法4、核酸检测抗体检测1、 性病研究实验室试验(VDRL)2、快速血浆反应素环状卡试验（RRR）3、苯胺红不加热血清试验（TRUST）荧光梅毒螺旋抗体吸收试验FTA-ABS；荧光梅毒螺旋抗体吸收试验FTA-ABS；荧光梅毒螺旋抗体双染色试验FTA-ABS-DS;抗梅毒螺旋抗体的微量血凝检测MHA-TP ;抗梅毒螺旋抗体明姣颗粒凝集试验TPPA; ELISA1.L（表格自制µµm}{细胞膜--不含固醇--含高浓度固醇}{细胞--缺乏或无--无}{细胞壁缺失的原因--青霉素、溶菌酶和胆汁等作用所致，去除条件可恢复--遗传}{通过滤器--能通过滤器--能通过滤器}{对青霉素的作用--抵抗--抵抗}{液体培养--有一定混浊度，可附壁---混浊度极低}{致病性--引起慢性感染，如骨髓炎、尿路感染和心内膜炎等--原发性非典型性肺炎，泌尿生殖道感染和条件致病}简述衣原体独特的发育周期。沙眼的病原体与其传播方式。答：沙眼的病原体是沙眼衣原体，传播方式主要通过眼-眼或眼-手-眼传播衣原体有哪些重要特点？答：①形态多为球型，革兰染色阴性原体小，介于细菌和病毒之间，始体大，大小与细菌相似。②代谢，缺乏能量来源，故严格的细胞内寄生DNARNA抗生素敏感。衣原体引起哪些重要疾病？答：能引起人类的沙眼、泌尿生殖道的感染和呼吸系统等疾病2.简述白色念珠菌感染的微生物检查方法与结果分析。. .ELISA1ml等有脓肿。白色念珠菌检验：1标本直接检查直接显微镜检查；G1-3-B-D-抗原检测，ELISA免疫印迹；核酸检测；2培养鉴定接种沙氏培养基，25371-4可见假菌丝和芽生孢子。鉴定试验：1芽管形成试验2厚膜孢子形成试验3糖同化或发酵试验。白色念珠菌鉴定的依据有哪些与35℃均生长并形成顶端厚膜孢子，42℃也能生长。③芽管形成试验阳性。④验，培养基不变色或淡红色。桥。新生隐球菌主要侵犯部位为肺、脑、脑膜，也可侵犯皮肤，骨，关节致病物质为荚膜；标本直接检测：1显微镜检查2抗原检测3抗体检测4核酸检测简述流行性感冒病毒的形态结构与其主要结构成分的功能。流感病毒呈球形或丝状⑴流感病毒的内部结构核衣壳：病毒分片段的RNA，NPRNARNAMM特异性。外膜：来自宿主细胞的脂质双层膜。⑵流感病毒的辅助结构血凝素(HA：HA（病毒吸附）保护性抗原，血凝抑制抗体(保护性抗体)神经氨酸酶NA（核衣壳释放）与病毒释放有关。简述分离与鉴定流感病毒常用的实验室检验方法有哪些。..主要包括病毒分离培养、血清学诊断和快速诊断方法3.甲型流感病毒为何容易引起大流行？RNA87HANA4.简述流感病毒的抗原变异。（antigenicHANA引起局部中、小型流行。抗原转换（antigenicshift）因HANA轮状病毒临床意义：4-2424-72，80%患儿先10-20性便呀白色米汤样便，无粘液和脓血，恶臭。简述轮状病毒的微生物检验方法⑴标本采集与处理⑵标本直接检查①电镜和免疫电镜检查②抗原检测③病毒RNA聚丙烯酰胺凝胶电泳分析④核酸检测⑶病毒分离培养简述乙型肝炎病毒的形态结构。球形,双层衣壳。外衣壳=包膜(脂质双层+蛋白质)HBsAg等内衣壳：HBcAg、HBeAg内部：DNA---环状双链、DNA多聚酶4ORF,7基因简述乙型肝炎病毒的抗原组成与其意义。HBV抗原组成⑴、HBsAgHBVHBs。⑵、HBcAg：HBcAgHBcAgCTLHBcAgHBc，HBcIgMHBVHBeAgHBVHBeAgHBeHbeHBe（是预后良好的征象）简述乙型肝炎病毒抗原抗体系统检测的用途⑴乙型肝炎的诊断⑵判断传染型⑶判断预后⑷筛选献血员⑸检测乙肝疫苗接种效果⑹流行病学调查巨细胞病毒感染的病原学直接检查方法有哪些？⑴检测病毒颗粒⑵检测病毒包涵体⑶检测病毒抗原⑷检测病毒核酸疑似人巨细胞病毒先天性感染的诊断依据是什么？3HCMV天性感染最敏感和特异的诊断依据。HIV的形态结构形态：球形病毒，80-120nm结构1、核衣与核心——呈圆锥状、两条相同的正. .RNA、有衣壳蛋白和核衣壳蛋白、有逆转录酶，蛋白酶和整合酶22、糖蛋白刺突（gP120gP41）2.简述HIV的复制过程。⑴逆向转录为DNA，形成DNA复制中间体，⑵形成前病毒DNA⑶转录为病毒RNAmRNARNA3AIDSAIDS症、艾滋病4.HIV感染的常用临床检测方法有哪些？⑴标本直接检查①抗原检查②核酸检查⑵抗体检测①初筛试验②确证试验⑶CD4T细胞计数4.人乳头瘤病毒诊断方法有哪些？