仪器分析色谱分析法导论

仪器分析色谱分析法导论2023/1/171第一页，共九十一页，2022年，8月28日§12-1概述

一、色谱法的产生1903年俄国植物学家茨维特在研究植物叶的色素成分时，将植物叶子的萃取物倒入填有碳酸钙的直立玻璃管内，然后加入石油醚使其自由流下，结果色素中各组分互相分离形成各种不同颜色的谱带。2023/1/172第二页，共九十一页，2022年，8月28日固定相——CaCO3颗粒流动相——石油醚

色带2023/1/173第三页，共九十一页，2022年，8月28日上述方法因此得名为色谱法。以后此法逐渐应用于无色物质的分离，“色谱”二字虽已失去原来的含义，但仍被人们沿用至今。2023/1/174第四页，共九十一页，2022年，8月28日填入玻璃管或不锈钢管内静止不动的一相（固体或液体）称为固定相；自上而下运动的一相（一般是气体或液体）称为流动相；装有固定相的管子（玻璃管或不锈钢管）称为色谱柱。2023/1/175第五页，共九十一页，2022年，8月28日色谱法：混合组分在流动相的携带下通过装有固定相的色谱柱被分离检测的一种方法。流动相液体流动速度慢，加压，使其流快，1969年高压液相色谱(HPLC)发展。气体1952年产生气相色谱，是色谱法一项革命性进展。2023/1/176第六页，共九十一页，2022年，8月28日二、色谱分析法分类1、按两相状态分类气相色谱—气体作流动相

（1）气固色谱：气体作流动相，固体吸附剂作固定相。（2）气液色谱：气体作流动相，固定液作固定相。2023/1/177第七页，共九十一页，2022年，8月28日2023/1/178第八页，共九十一页，2022年，8月28日液相色谱—液体作流动相（1）液固色谱：液体作流动相，固体吸附剂作固体相。（2）液液色谱：液体作流动相，固定液作固定相。超临界液体色谱——超临界流体作色谱流动相。

2023/1/179第九页，共九十一页，2022年，8月28日2023/1/1710第十页，共九十一页，2022年，8月28日2、按操作形式分类（1）柱色谱：填充柱色谱—固定相填充到柱管内毛细管柱色谱—把固定相涂在毛细管内壁上，中间是空的。（2）纸色谱：滤纸为固定相的色谱法，流动相是含一定比例水的有机溶剂，样品在滤纸上展开进行分离。（3）薄层色谱：把固体固定相压成或涂成薄膜的色谱法。2023/1/1711第十一页，共九十一页，2022年，8月28日2023/1/1712第十二页，共九十一页，2022年，8月28日3、按分离原理分类

（1）吸附色谱：利用吸附剂表面对被分离的各组分吸附能力不同进行分离。

（2）分配色谱：利用不同组分在两相分配系数或溶解度不同进行分离。

（3）离子交换色谱：利用不同组分对离子交换剂亲和力不同进行分离。

（4）凝胶色谱：利用凝胶对分子的大小和形状不同的组分所产生的阻碍作用不同而进行分离的色谱法。

2023/1/1713第十三页，共九十一页，2022年，8月28日三、色谱法的特点优点：“三高”、“一快”、“一广”缺点：选择性高——可将性质相似的组分分开效能高——反复多次利用组分性质的差异产生很好分离效果灵敏度高——10-11~10-13g，适于痕量分析分析速度快——几~几十分钟完成分离一次可以测多种样品应用范围广——气体，液体、固体物质化学衍生化再色谱分离、分析

对未知物分析的定性专属性差需要与其他分析方法联用(GC-MS,LC-MS)2023/1/1714第十四页，共九十一页，2022年，8月28日标准编号标准名称实施日期HJ/T72-2001

水质邻苯二甲酸二甲（二丁、二辛）酯的测定液相色谱法2002-1-1HJ/T73-2001

水质丙烯睛的测定气相色谱法2002-1-1HJ/T74-2001

水质氯苯的测定气相色谱法2002-1-1HJ/T83-2001水质可吸附有机卤素（AOX）的测定离子色谱法2002-4-1HJ/T84-2001水质无机阴离子的测定离子色谱法2002-4-1GB/T17130-1997

水质挥发性卤代烃的测定顶空气相色普法1998-5-1GB/T17132-1997

环境甲基汞的测定气相色谱法1998-5-1GB/T14204-93

水质烷基汞的测定气相色谱法1993-12-1GB/T

14552-93水和土壤质量有机磷农药的测定气相色谱法1994-1-15GB/T14672-93

水质吡啶的测定气相色谱法1994-5-1GB/T13904-92

水质梯恩梯、黑索金、地恩梯的测定气相色谱法1993-9-1GB/T13192-91

水质有机磷农药的测定气相色普谱法1992-6-1GB/T13194-91水质硝基苯、硝基甲苯、硝基氯苯、二硝基甲苯的测定气相色谱法1992-6-1GB/T13198-91水质六种特定多环芳烃的测定高效液相色谱法1992-6-1GB/T11890-89水质苯系物的测定气相色谱法1990-7-1GB/T8972-88

水质五氯酚的测定气相色谱法1988-8-1GB/T7492-87水质六六六、滴滴涕的测定气相色谱法1987-8-1GB/T4919-85工业废水总硝基化合物的测定气相色谱法1985-8-1四、在环境监测中运用2023/1/1715第十五页，共九十一页，2022年，8月28日HJ/T33-1999固定污染源排气中甲醇的测定气相色谱法2000-1-1HJ/T34-1999固定污染源排气中氯乙烯的测定气相色谱法2000-1-1HJ/T35-1999固定污染源排气中乙醛的测定气相色谱法2000-1-1HJ/T36-1999固定污染源排气中丙烯醛的测定气相色谱法2000-1-1HJ/T37-1999固定污染源排气中丙烯腈的测定气相色谱法2000-1-1HJ/T38-1999固定污染源排气中非甲烷总烃的测定气相色谱法2000-1-1HJ/T39-1999固定污染源排气中氯苯类的测定气相色谱法2000-1-1HJ/T40-1999固定污染源排气中苯并（a）芘的测定高效液相色谱法2000-1-1GB/T15439-1995

环境空气苯并[a]芘的测定高效液相色谱法1995-8-1GB/T15263-94

环境空气总烃的测定气相色谱法1995-6-1GB/T14676-93

空气质量三甲胺的测定气相色谱法1994-3-15GB/T14677-93

空气质量甲苯二甲苯苯乙烯的测定气相色谱法1994-3-15GB/T14678-93空气质量硫化氢、甲硫醇、甲硫醚和二甲二硫的测定气相色谱法1994-3-152023/1/1716第十六页，共九十一页，2022年，8月28日§12-2色谱图及色谱常用术语一、色谱图混合物样品（A+B）→色谱柱中分离→检测器→记录下来。组分从色谱柱流出时，各个组分在检测器上产生信号，该信号随时间变化所形成的曲线叫色谱图。记录了各个组分流出色谱柱的情况，又叫色谱流出曲线2023/1/1717第十七页，共九十一页，2022年，8月28日二、色谱图中的基本术语

t02023/1/1718第十八页，共九十一页，2022年，8月28日1、基线—在实验操作条件下，色谱柱后没有组分流出的曲线叫基线。稳定情况下，一条直线。基线上下波动称为噪音。2023/1/1719第十九页，共九十一页，2022年，8月28日2、色谱峰的高度h峰高h—色谱峰最高点与基线之间的距离，可用mm,mV，mA表示。峰高低与组分浓度有关，峰越高越窄越好。

h2023/1/1720第二十页，共九十一页，2022年，8月28日3.色谱峰的宽度标准偏差—σ峰高0.607倍处的色谱峰宽的一半。σ2023/1/1721第二十一页，共九十一页，2022年，8月28日峰底宽Wb—色谱峰两侧拐点所作切线在基线上的距离Wb

=4σ

半峰宽W1/2—峰高一半处色谱峰的宽度

W1/2

=2.354σWb=4σW1/2

=0.589Wb

Wb2023/1/1722第二十二页，共九十一页，2022年，8月28日4.色谱保留值——定性的依据

组分在色谱柱中停留的数值，可用时间t和所消耗流动相的体积V来表示。组分在固定相中溶解性能越好，或固定相的吸附性越强，在柱中滞留的时间越长，消耗的流动相体积越大，

固定相、流动相固定，条件一定时，组分的保留值是个定值。2023/1/1723第二十三页，共九十一页，2022年，8月28日（1）死时间t0——不被固定相吸附或溶解的组分流经色谱柱所需的时间。气相色谱—惰性气体（空气、甲烷等）流出色谱柱所需的时间。t02023/1/1724第二十四页，共九十一页，2022年，8月28日(2)保留时间tR

组分流经色谱柱时所需时间。进样开始到柱后出现最大值时所需的时间。操作条件不变时，一种组分有一个tR定值，定性参数。2023/1/1725第二十五页，共九十一页，2022年，8月28日

扣除了死时间的保留时间。t’R=tR-t0又称校正保留时间，实际保留时间。

t’R体现的是组分在柱中被吸附或溶解的时间。

t’R（3）调整保留时间t’R2023/1/1726第二十六页，共九十一页，2022年，8月28日保留值用体积表示：（4）死体积V0—不被固定相滞留的组分流经色谱柱所消耗的流动相体积称死体积，色谱柱中载气所占的体积。V0=t0F0

F0柱后出口处流动相的体积流速mL/min

2023/1/1727第二十七页，共九十一页，2022年，8月28日（5）保留体积VR

—组分从进样开始到色谱柱后出现最大值时所需流动相体积，组分通过色谱柱时所需流动相体积VR=tRF0（6）调整保留体积V’R—扣除了死体积的保留体积，真实的将待测组分从固定相中携带出柱子所需的流动相体积。V’R=t’RF0

V0、t0与被测组分无关，因而V’R.t’R更合理地反映了物质在柱中的保留情况。2023/1/1728第二十八页，共九十一页，2022年，8月28日（7）相对保留值ϒ2,1(或ϒi,s)—在相同操作条件下，组分2(或组分i)对另一参比组分1(或s)调整保留值之比由于相对保留值只与柱温及固定相的性质有关，而与柱径、柱长、填充情况及流动相流速无关，因此，它是色谱法中，特别是气相色谱法中，广泛使用的定性数据。2023/1/1729第二十九页，共九十一页，2022年，8月28日

（8）选择因子

在定性分析中，通常固定一个色谱峰作为标准（s），然后再求其它峰（i）对这个峰的相对保留值。此时，γi,s可能大于1，也可能小于1。

在多元混合物分析中，通常选择一对最难分离的物质对，将它们的相对保留值作为重要参数．在这种特殊情况下，可用符号表示：

式中tR2′为后出峰的调整保留时间，总是大于1的。2023/1/1730第三十页，共九十一页，2022年，8月28日1

．分配系数K

分配色谱的分离是基于样品组分在固定相和流动相之间反复多次的分配过程，而吸附色谱的分离是基于反复多次的吸附-脱附过程。分离过程经常用样品分子在两相间的分配来描述，而描述这种分配的参数称为分配系数K。三、分配系数K和分配比k

2023/1/1731第三十一页，共九十一页，2022年，8月28日

分配系数K是指在一定温度和压力下，组分在固定相和流动相之间分配达平衡时的浓度之比值，即

分配系数是由组分和固定相的热力学性质决定的，它是每一个溶质的特征值，它仅与两个变量有关：固定相和温度。与两相体积、柱管的特性以及所使用的仪器无关。2023/1/1732第三十二页，共九十一页，2022年，8月28日

2.分配比k

分配比(又称容量因子)是指在一定温度和压力下，组分在两相间分配达平衡时，分配在固定相和流动相中的质量比。即

2023/1/1733第三十三页，共九十一页，2022年，8月28日k值越大，说明组分在固定相中的量越多，相当于柱的容量大，又称分配容量或容量因子。

它是衡量色谱柱对被分离组分保留能力的重要参数。k值也决定于组分及固定相热力学性质。它不仅随柱温、柱压变化而变化，而且还与流动相及固定相的体积有关。2023/1/1734第三十四页，共九十一页，2022年，8月28日3.色谱基本保留方程2023/1/1735第三十五页，共九十一页，2022年，8月28日分配系数K与分配比k的关系

其中β称为相比率，它是反映各种色谱柱型特点的又一个参数。例如，对填充柱，其β值一般为6～35；对毛细管柱，其β值为60～600。

2023/1/1736第三十六页，共九十一页，2022年，8月28日分配系数K及分配比k与选择因子的关系

2023/1/1737第三十七页，共九十一页，2022年，8月28日

通过选择因子把实验测量值k与热力学性质的分配系数K直接联系起来，对固定相的选择具有实际意义。如果两组分的K或k值相等，则=1，两个组分的色谱峰必将重合，说明分不开。两组分的K或k值相差越大，则分离得越好。两组分具有不同的分配系数是色谱分离的先决条件。2023/1/1738第三十八页，共九十一页，2022年，8月28日从色谱流出曲线上，可以得到许多重要信息：

（l）根据色谱峰的个数，可以判断样品中所含组份的最少个数；（2）根据色谱峰的保留值(或位置），可以进行定性分析；（3）根据色谱峰下的面积或峰高，可以进行定量分析；（4）色谱峰的保留值及其区域宽度，是评价色谱柱分离效能的依据；（5）色谱峰两峰间的距离，是评价固定相(和流动相)选择是否合适的依据。2023/1/1739第三十九页，共九十一页，2022年，8月28日§12-3色谱法基本原理2023/1/1740第四十页，共九十一页，2022年，8月28日

下图是A、B两组分沿色谱柱移动时，不同位置处的浓度轮廓。

浓度沿柱移动距离LABAB2023/1/1741第四十一页，共九十一页，2022年，8月28日

图中KA>KB

，A组分在移动过程中滞后。随着两组分在色谱柱中移动距离的增加，两峰间的距离逐渐变大，同时，每一组分的浓度轮廓（即区域宽度）也慢慢变宽。显然，区域扩宽对分离是不利的，但又是不可避免的。浓度沿柱移动距离LABAB2023/1/1742第四十二页，共九十一页，2022年，8月28日若要使A、B组分完全分离，必须满足以下三点：一、两组分的分配系数必须有差异；二、区域扩宽的速率应小于区域分离的速度；三、在保证快速分离的前提下，提供足够长的色谱柱。2023/1/1743第四十三页，共九十一页，2022年，8月28日

第一、二点是完全分离的必要条件。因此，作为一个色谱理论，不仅要说明组分在色谱柱中移动的速率，而且要说明组分在移动过程中引起区域扩宽的各种因素。塔板理论和速率理论均以色谱过程中分配系数恒定为前提，故称为线性色谱理论。2023/1/1744第四十四页，共九十一页，2022年，8月28日一、塔板理论-柱分离效能指标

1.塔板理论（platetheory）

半经验理论；将色谱分离过程比拟作蒸馏过程，将连续的色谱分离过程分割成多次的平衡过程的重复（类似于蒸馏塔塔板上的平衡过程）；在每一个塔板上，被分离组分达到一次分配平衡。2023/1/1745第四十五页，共九十一页，2022年，8月28日

塔板理论的假设：

(1)在每一个平衡过程间隔内，平衡可以迅速达到；这一小段间隔的柱长称为理论塔板高度。

(2)将流动相看作成脉动（间歇）过程；

(3)试样沿色谱柱方向的扩散可忽略；

(4)每次分配的分配系数相同。2023/1/1746第四十六页，共九十一页，2022年，8月28日

色谱柱长：L

虚拟的塔板间距离（理论塔板高度）：H

色谱柱的理论塔板数：n

则三者的关系为：2023/1/1747第四十七页，共九十一页，2022年，8月28日理论塔板数与色谱参数之间的关系为：

单位柱长的塔板数越多，表明柱效越高。用不同物质计算可得到不同的理论塔板数。2023/1/1748第四十八页，共九十一页，2022年，8月28日塔板理论指出：

1、当溶质在柱中的平衡次数，即理论塔板数n大于50时，可得到基本对称的峰形曲线。在色谱柱中，n值一般很大，如气相色谱柱的n约为103

~106

，因而这时的流出曲线可趋近于正态分布曲线。

2、当样品进入色谱柱后，只要各组分在两相间的分配系数有微小差异，经过反复多次的分配平衡后，仍可获得良好的分离。2023/1/1749第四十九页，共九十一页，2022年，8月28日

2.有效塔板数和有效塔板高度

组分在t0时间内不参与柱内分配，需引入有效塔板数和有效塔板高度：2023/1/1750第五十页，共九十一页，2022年，8月28日

3.塔板理论的特点和不足

(1)当色谱柱长度一定时，塔板数n

越大(塔板高度H越小)，被测组分在柱内被分配的次数越多，柱效能则越高，即使分配系数只有微小的差别，仍可获得好的分离效果。所得色谱峰越窄。

(2)不同物质在同一色谱柱上的分配系数不同，用有效塔板数和有效塔板高度作为衡量柱效能的指标时，应指明测定物质。2023/1/1751第五十一页，共九十一页，2022年，8月28日

(3)柱效不能表示被分离组分的实际分离效果，当两组分的分配系数K相同时，无论该色谱柱的塔板数多大，都无法分离。

(4)塔板理论无法解释同一色谱柱在不同的载气流速下柱效不同的实验结果，也无法指出影响柱效（如塔板高度H）的因素及提高柱效的途径。2023/1/1752第五十二页，共九十一页，2022年，8月28日二、速率理论

1956年荷兰学者vanDeemter等在研究气液色谱时，提出了色谱过程动力学理论——速率理论。他们吸收了塔板理论中板高的概念，并充分考虑了组分在两相间的扩散和传质过程，从而在动力学基础上较好地解释了影响板高的各种因素。该理论模型对气相、液相色谱都适用。2023/1/1753第五十三页，共九十一页，2022年，8月28日vanDeemter方程的数学简化式为:

式中μ为流动相的线速度；A、B、C为常数，分别代表涡流扩散项系数、分子扩散项系数、传质阻力项系数。2023/1/1754第五十四页，共九十一页，2022年，8月28日（1）提出了影响Ｈ的三项因素：涡流扩散项A，分子扩散项B/，传质阻力项C

。（2）在流动相流速一定时:当Ａ,Ｂ,Ｃ最小时，

Ｈ最小，n最高，柱效高。当Ａ,Ｂ,Ｃ最大时，

Ｈ最大，n最小，柱效低。2023/1/1755第五十五页，共九十一页，2022年，8月28日（1）涡流扩散项A在填充色谱柱中，当组分随流动相向柱出口迁移时，流动相由于受到固定相颗粒障碍，不断改变流动方向，使组分分子在前进中形成紊乱的类似“涡流”的流动，故称涡流扩散。2023/1/1756第五十六页，共九十一页，2022年，8月28日

A＝2λdpA与填充物的平均直径dp的大小和填充不规则因子λ有关。

减小A：固定相颗粒应适当细小、均匀填充要均匀。

2023/1/1757第五十七页，共九十一页，2022年，8月28日待测组分是以“塞子”的形式被流动相带入色谱柱的，在“塞子”前后存在浓度梯度，由浓→稀方向扩散，产生了纵向扩散，使色谱峰展宽。（2）分子扩散项B/u（纵向扩散项）

2023/1/1758第五十八页，共九十一页，2022年，8月28日

B＝2γDg

γ——是填充柱内流动相扩散路径弯曲的因素，也称弯曲因子，它反映了固定相的几何形状对分子扩散的阻碍情况。

Dg——为组分在流动相中扩散系数（cm2·s-1），与气体分子量、组分性质、温度、压力等因素有关。

2023/1/1759第五十九页，共九十一页，2022年，8月28日减小纵向扩散项B/采取措施：①适当提高流动相流速，减小保留时间②用相对分子质量较大的气体作流动相。

Dg∝B＝2γDg

③适当降低柱温Ｔc.2023/1/1760第六十页，共九十一页，2022年，8月28日（3）传质阻力项Cμ传质阻力系数包括两部分:Ｃ＝Ｃl+Cg两项组成Cg

—流动相传质阻力系数:组分从流动相移动到固定相表面进行两相之间的质量交换时所受到的阻力，质量交换慢，引起色谱峰变宽。2023/1/1761第六十一页，共九十一页，2022年，8月28日2Cl

­—固定项传质阻力系数即组分从两相界面移动到固定相内部，达分配平衡后，又返回到两相界面，在这过程中所受到的阻力为固定相传质阻力。组分在固定相中扩散系数固定液膜厚度2023/1/1762第六十二页，共九十一页，2022年，8月28日减小Ｃ采取措施：①采用粒度小的填充物Cm∝dp2②相对分子质量小的载气，Dg大。

Cg∝1/Dg③降低固定液液膜厚度(Cl∝df2)并且液膜要均匀；若膜厚，扩散费时；太薄则包不住载体。④Dl越大越好，增加柱温是提高Dl的方法之一。

2023/1/1763第六十三页，共九十一页，2022年，8月28日

流速严重影响分离效果和分析时间可以通过H－u曲线来选择。为缩短分析时间，可选比u最佳稍大的载气流速。一般为2u最佳2023/1/1764第六十四页，共九十一页，2022年，8月28日三、色谱基本分离方程１、分离度Ｒ——色谱柱的总分离效能指标

定义：相邻两个峰的保留值之差与两峰宽度平均值之比分子反映了组分在两相中分配行为对分离的影响，是色谱分离的热力学因素。分母反映了动态过程组分区带的扩散对分离的影响，是色谱分离的动力学因素。2023/1/1765第六十五页，共九十一页，2022年，8月28日两个峰tR

相差越大，Wb越窄，Ｒ值越大，说明柱分离较能高。

Ｒ≥１.5两个组分能完全分开。Ｒ＝１.0两组分能分开，满足分析要求。Ｒ＜１.0两峰有部分重叠。2023/1/1766第六十六页，共九十一页，2022年，8月28日2023/1/1767第六十七页，共九十一页，2022年，8月28日２、分离度与柱效能、选择性的关系

——色谱基本分离方程式柱效能—指色谱柱在分离过程中的分离效能，常用n，Ｈ来描述，n越大，Ｈ越小，柱效越高，对单个组分而言。对多个组分的分离来说，无法用n,H来描述，n大，Ｈ小，几个峰未必分的开。2023/1/1768第六十八页，共九十一页，2022年，8月28日选择性—描述两个相邻组分在同一固定相中热力学分布行为的重要参数，用r2,1相对保留值表示.r2,1越大，保留时间相差大，分离越好（但未考虑峰宽因素）2023/1/1769第六十九页，共九十一页，2022年，8月28日2023/1/1770第七十页，共九十一页，2022年，8月28日2023/1/1771第七十一页，共九十一页，2022年，8月28日讨论：（1）分离度与柱效的关系（柱效因子n)

分离度与柱效因子n的平方根成正比，r2,1一定时，增加柱长以增加柱效n，可提高分离度，但组分保留时间增加且峰扩展，分析时间长。增加n值的另一办法是减小柱的H值。2023/1/1772第七十二页，共九十一页，2022年，8月28日

（2）分离度与相对保留值r

的关系

增大r是提高分离度的最有效方法。在相同分离度下，当r

增加一倍，需要的n有效减小4倍。增大r

的最有效方法是选择合适的固定相。2023/1/1773第七十三页，共九十一页，2022年，8月28日k影响峰位n影响峰宽窄影响两峰间距2023/1/1774第七十四页，共九十一页，2022年，8月28日如何根据具体情况改进分离度？k

太小，n

也太小，应增大固定液用量，降低柱温n

太小，许多组分未分开应设法降低板高，提高柱效2023/1/1775第七十五页，共九十一页，2022年，8月28日

例1：在一定条件下，两个组分的调整保留时间分别为85秒和100秒，要达到完全分离，即R=1.5。计算需要多少块有效塔板。若填充柱的塔板高度为0.1cm，柱长是多少？解：

=100/85=1.18

n有效=16R2[/(—1)]2=16×1.52×(1.18/0.18)2

=1547（块）

L有效=n有效·H有效=1547×0.1=155cm

即柱长为1.55米时，两组分可以得到完全分离。2023/1/1776第七十六页，共九十一页，2022年，8月28日

例2：在3.0m色谱柱上，分离A、B组分，其保留时间分别为14.0min、17.0min，不被保留的组分的保留时间为1.0min，B组分的峰底宽度Wb为1.0min。计算A和B达到完全分离时（R=1.5）的柱长为多少？解：算出B组分的有效塔板数：再算出需要达到R=1.5时，需要的有效塔板数：2023/1/1777第七十七页，共九十一页，2022年，8月28日由于n∝L，则要达到基线分离需要的柱长为：所以L需=0.75m

因此要达到基线分离，所需柱长为0.75m。2023/1/1778第七十八页，共九十一页，2022年，8月28日§12—4

色谱定性和定量分析一、定性分析定性分析的任务是确定色谱图上各个峰代表什么物质。

1.利用保留值与已知物对照定性（1）利用保留时间定性在相同色谱条件下，将标准物和样品分别进样，两者保留值相同，可能为同一物质。此方法要求操作条件稳定、一致，必须严格控制操作条件，尤其是流速。2023/1/1779第七十九页，共九十一页，2022年，8月28日2023/1/1780第八十页，共九十一页，2022年，8月28日（2）利用峰高增量定性

若样品复杂，流出峰距离太近，或操作条件不易控制，可将已知物加到样品中，混合进样，若被测组分峰高增加了，则可能含该已知物。（3）利用双色谱系统定性

通过改变色谱条件来改变分离选择性，使不同物质显示不同保留值。例：选用极性差别较大的两种不同固定液来制备色谱柱，不同物质具有不同保留值2023/1/1781第八十一页，共九十一页，2022年，8月28日2.与其它分析仪器联用的定性方法色质谱联用仪（GC-MS；LC-MS）色谱-红外光谱仪联用仪；组分的结构鉴定SampleSample

58901.0DEG/MINHEWLETTPACKARDHEWLETTPACKARD5972AMassSelectiveDetectorDCBA

GasChromatograph(GC)MassSpectrometer(MS)SeparationABCDIdentificationBACD2023/1/1782第八十二页，共九十一页，2022年，8月28日二、定量分析

气相色谱定量分析是根据检测器对组分产生的响应信号与组分的量成正比的原理，通过色谱图上的峰面积或峰高，计算样品中组分的含量。mi=fiA