GMP质量体系醋酸地塞米松检验操作规程

PAGE5PAGE1目的：为检验醋酸地塞米松规定一个标准的程序，以便获得准确的实验数据。范围：适用于醋酸地塞米松的检验。职责：检验室主任、检验员。规程：1．性状：本品为白色或类白色的结晶或结晶性粉末,无臭，味微苦。本品在丙酮中易溶，在甲醇或无水乙醇中溶解，在乙醇或氯仿中略溶，在乙醚中极微溶解，在水中不溶。1.1熔点:本品按熔点测定法(SOP-QC-307-00)测定，熔点为223-233℃，熔融时同时分解为符合规定。1.2比旋度:取本品精密称取250mg置25ml量瓶中，加二氧六环溶解并定量稀释至刻度，摇匀，依法测定(SOP-QC-310-00)，比旋度为+82°至88°为符合规定。计算:a:旋光仪读数；w:样品称重量(g)；B:水分含量(%)。1.3吸收系数:取本品，精密称取150mg置100ml量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，再精吸1ml置100ml量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，照分光光度法(SOP-QC-301-00)，在240nm的波长处测定吸收度，吸收系数E1cm1%为343-371，为符合规定。2.鉴别2.1试剂与仪器2.1.1甲醇 2.1.2硫酸溶液(1→2)2.1.3碱性酒石酸铜 2.1.4乙醇制氢氧化钾试液2.1.50.01mol/L氢氧化钠溶液2.1.6茜素氟蓝试液2.1.712%醋酸钠的稀醋酸溶液2.1.8硝酸亚铈试液2.1.9移液管（2ml，1ml，10ml）2.1.10红外光谱仪2.1.11电炉2.1.12试管，烧杯，量筒2.1.13电子天平2.1.14锥形瓶（500ml）2.1.15 小型三用水箱 2.2项目与步骤2.2.1取本品约10mg加甲醇1ml微温溶解后，加热的碱性酒石酸铜试液1ml，即生成红色沉淀。2.2.2取本品50mg加乙醇制氢氧化钾试液2ml，置水溶中加热5分钟，放冷，加硫酸溶液(1→2)2ml缓缓煮沸1分钟，即发生醋酸乙酯的香气为符合规定。2.2.3取本品，照红外分光光度法(SOP-QC-302-00)测定，红外吸收图谱应与对照的图谱（光谱集546图）一致为符合规定。2.2.4本品显有机氟化物的鉴别反应:取供试品约7mg，照氧瓶燃烧(SOP-QC-317-00)进行有机破坏，用水20ml与0.01mol/L氢氧化纳溶液6.5ml为吸收液，俟燃烧完毕后，充分振摇,取吸收液2ml加茜素氟蓝试液0.5ml，再加12%醋酸钠的稀醋酸溶液0.2ml用水稀释至4ml，加硝酸亚铈试液0.5ml即显蓝紫色，同时做空白对照试验为符合规定。3检查3.1试剂与仪器3.1.1氯仿-甲醇(9:1)3.1.2二氯甲烷-醋酸甲酯-水(100:50:50)3.1.3碱性四氮唑蓝试液3.1.4亚硒酸3.1.5硝酸溶液（3→10）3.1.6氨试液3.1.7盐酸羟胺溶液(1→2)3.1.8二氨基荼试液3.1.9环已烷3.1.10无水硫酸钠3.1.11碘化钾3.1.12盐酸溶液(1→2)3.1.13硫代硫酸钠3.1.14淀粉指示液3.1.15容量瓶（10ml，100ml，250ml）3.1.16层析缸3.1.17微量进样器3.1.18硅胶G薄层板3.1.19喷雾器3.1.20移液管（1ml，5ml）3.1.21锥形瓶（100ml）3.1.22烧杯，量筒3.1.23碘量瓶3.1.24碱性滴定管3.1.25分液漏斗,漏斗架3.1.26铁架台3.1.27电炉3.1.28紫外分光光度计3.1.29恒温烘箱3.1.30称量瓶3.1.31坩埚3.1.32电子天平3.2项目与步骤3.2.1其他甾体:取本品精密称取100mg置10ml量瓶中，加氯仿-甲醇(9:1)溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液，精密称取1ml置100ml量瓶中，加氯仿-甲醇(9:1)溶解并稀释至刻度，作为对照品的溶液。照薄层色谱法(SOP-QC-301-00)试验，吸取上述两种溶液各5μl分别点于同一硅胶G薄层板上，另取二氯甲烷-醋酸甲酯-水(100:50:50)，振摇混合，放置使分层，取下层澄清液为展开剂，展开后，晾干，在105℃干燥10分钟，放冷，喷以碱性四氮唑蓝试液，立即检视，供试品溶液如显杂质斑点，其颜色与对照溶液的主斑点比较，不得更深为符合规定。3.2.2干燥失重: 取本品精密称取1.0g,置称量瓶中，照干燥失重测定法(SOP-QC-325-00)，在105℃干燥至恒重，减失重量不得过0.5%为符合规定。3.2.3炽灼残渣:取本品,照炽灼残渣检查法(SOP-QC-327-00)检查，不得过0.1%为符合规定。3.2.4硒: 取本品0.10g,依法检查(SOP-QC-359-00),(0.0050%)为符合规定。4含量测定4.1试剂与仪器4.1.1C18硅胶色谱柱 4.1.2醋酸地塞米松对照品4.1.3甲睾酮对照品 4.1.4甲醇4.1.5容量瓶（50ml，25ml）、单标移液管（5ml） 4.1.6电子天平（万分之一克），称量瓶4.1.7高效液相色谱仪4.2检验步骤: 按高效液相色谱法(SOP-QC-306-00)检测。4.2.1色谱条件与系统适用性试验用C18硅胶色谱柱，流动相为甲醇-水（70：30）；流速为1ml/min，检测波长为240nm，量取醋酸地塞米松对照溶液与内标溶液的混合对照液[*]20μl注入液相色谱仪，醋酸地塞米松峰与内标物质峰的分离度不得少于1.5，理论板数按醋酸地塞米松峰计算，应不低于1500。4.2.2内标溶液的制备: 取甲睾酮20mg，精密称定置100ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，作为内标溶液。4.2.3醋酸地塞米松对照溶液与样品溶液的制备及测定:醋酸地塞米松对照溶液与内标物溶液的混合对照溶液的制备[*]取醋酸地塞米松对照品约13mg，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇35ml使溶解，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取此溶液与内标溶液各5ml置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，作为混合对照溶液。样品溶液与内标溶液的混合样品溶液的制备用测定取样品约13mg，精密称定，置50ml量瓶中，加甲醇35ml溶解，用水稀释至刻度，摇匀，精密量取此溶液与内标溶液各5ml，置25ml量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀，取20μl注入液相色谱仪，将醋酸地塞米松的混合对照溶液按同法测定，按下式计算本品中醋酸地塞米松（C22H31FO6）的折干含量，应在97.0%～102.0%。为符合规定。Cd=Cw/(1－B%)Cd:本品的折干含量；Cw:本品的湿品含量；B%:本品的含水百分数； Ws:内标物的称样量（g）；As:内标物溶液中甲睾酮的峰面积或峰高；A1:样品中地醋酸地塞米松磷的峰面积或峰高；W1:样品的称样量（g）;f:为校正因子;As,Ws同上式意义；A2:醋