用紫外分光光度法测定总生物碱含量

用紫外分光光度法测定总生物碱含量综述：党院霞

李杏花

汇报：杨春军资料：白妙林

赵彩玉摘要：目的：归纳总结用紫外可见分光光度法测定中药中总生物碱含量。方法：查阅近二十年有关用紫外可见分光光度法测定单个药材，中

药复方中总生物碱含量的文献及资料。结果：含生物碱药材及配方较多，用紫外可见分光光度法及紫外可见与其它方法联用测定其含量取得了广泛的应用，并取得了良好的效果。结论：用紫外可较准确测定药材及配方中生物碱含量，在以后的研

究中应将其更多的与其它方法联用测定药材及配方中生物碱及其它成分含量。生物碱及其测定方法

生物碱是存在于自然界（主要为植物，但有的也存在于动物）中的一类含氮的碱性有机化合物，有似碱的性质，所以过去又称为赝碱。大多数有复杂的环状结构，氮素多包含在环内，有显著的生物活性，是中草药中重要的有效成分之一。

紫外分光光度法是通过可见-紫外分光光度计,产生可见光,紫外线照射某些不同物质,不同浓度吸收光谱的不同,可获得不同吸收光谱的曲线,同时它们的吸收峰数值与浓度成正比关系,遵循朗伯-比尔定律,不仅能鉴别物质及测定物质的含量,而且能和其他方法配合,研究物质的组成。生物碱具环状结构，有一定的旋光性和吸收光谱。具有光学活性，所以大多数研究者用紫外可见分光度法测定中药及复方中生物碱含量。12一、紫外分光光度法在单味药生物碱含量测定中的方法单波长法（表1）显色比值法（表2）导数法（表3）层析-紫外联用（表4）研究方法研究人员研究过程与结果结论单波长法陆世惠等[1]用Lambda25型紫外/可见分光光度计测定两面针中总生物碱的含量。结果表明，两面针提取液在329nm处有最大吸收，在3～8µg/ml有良好的线性范围，r＝0.9991(n=6)，氯化两面针碱的平均回收率为99.5%，RSD＝2.32%(n＝5)。精密度考察中RSD＝2.01%(n＝5)。重复性考察中RSD＝2.20%(n＝5)，表明重复性较好。稳定性试验中RSD＝2.14%(n＝8)，结果显示在24h内基本稳定。用紫外分光光度法测定两面针中总生物碱的含量的方法较好。单波长法刘志才等[2]用岛津UV-210紫外分光光度计对苦参中苦参总碱的含量进行了测定。结果表明,苦参总碱的光谱在200nm处有最大吸收,并且吸收值与苦参总碱的含量在3.285～16.426Lg/ml的范围内有良好的线性关系,r=0.9999;其平均回收率为103.2%,RSD=0.3%。从分析方法的精密度,样品的稳定性,浓度与吸收值之间的线性关系及回收率来看,紫外分光光度法测定苦参中苦参总碱的含量是一个切实可行的分析方法。表1研究方法研究人员研究过程与结果结论显色比值法张菊红等[3]将对照品蒺藜皂苷FSA-1和蒺藜总皂苷分别溶于硫酸-甲醇(7∶3)溶液中，于60℃作用15分钟后,用分光光度法在319nm处测定蒺藜总皂苷的含量,浓度与吸收值之间有良好的线性关系r=0.9996,平均回收率为98.22%,RSD=1.61%。通过测定6批蒺藜全草中总皂苷的含量，表明本法简单，重现性好，结果准确。紫外可见分光光度法与其它方法联用可较准确测定总生物碱含量显色比值法王宇等[4]对半夏药材采用超声提取、依据酸性染料比色法的原理，在pH5.40缓冲液中加入0.1溴麝香草酚蓝显色剂，在416nm处利用紫外分光光度法测定药材中总生物碱紫外可见分光光度法与其它方法联用可较准确测定总生物碱含量表2研究方法研究人员研究过程与结果结论导数法黄淑彰等[5]报道了使用一阶导数紫外分光光度法测定厚朴酚及厚朴酚的含量。结果表明本法可以消除其它组分的干扰,平均回收率在99%以上。导数光谱具有可消除干扰、分辨率高的特点导数法吕定刚[6]使用UV--2000紫外-可见分光光度法测定制川乌、制草乌、制附子中总生物碱的含量。以239nm--241nm处的一阶导数紫外光谱值为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。将制备好的样品按照上述方法测定一阶导数紫外光谱值，计算生物碱的含量。在阴性液干扰的考察中发现在乌头碱的最大吸收波长处阴性液有一定的吸收，如果直接用零阶吸收光谱测定制川乌、制草乌、制附子中总生物碱的含量，受阴性液的干扰会给测定的结果带来一定的误差，而在一阶导数光谱中，在239nm处阴性液的吸收基本为零。因此，可以用一阶导数光谱法来消除阴性液的吸收干扰。实验表明，可以选定波长239nm--241nm进行一阶导数光谱计算。浓度在1--5µm/ml线性范围内，线性拟合较好。r=0.9995，制川乌、制草乌、制附子三者的RSD均小于0.05，表明该测定方法准确可靠。紫外可见分光光度法与其它方法联用测定的结果准确可靠表3研究方法研究人员研究过程与结果结论层析-紫外联用梁秀群[7]采用薄层板将槐果碱分离出来，在206nm槐果碱有最大紫外吸收。在2.16--10.8µg/ml范围内有良好的线性关系，r=0.9999，提取回收效率为98.2％，RSD为0.57％（n=5）。本法测定结果可靠、准确、重现性好，可用于该制剂的质量控制。层析-紫外联用常军民等[8]采用薄层分离新疆鼠尾草中6,7-去氢罗列酮,于330nm处采用紫外分光光度法测定其含量，含量为0.37%，在10～15µg的范围内具良好的线性关系，r=0.9988；平均回收率为98.3%，RSD=2.58%。林辉[[[]]]以乙醇提取药材，醋酸乙酯萃取，聚酰胺柱层析分离，于360nm处紫外分光光度法测定高良姜中总黄酮，其含量为3.44%，加样回收率为96.9%,RSD=2.1%。该法灵敏度高，稳定性好,可为制订高良姜的质量指标提供方法依据。层析-紫外联用林辉[9]以乙醇提取药材，醋酸乙酯萃取，聚酰胺柱层析分离，于360nm处紫外分光光度法测定高良姜中总黄酮，其含量为3.44%，加样回收率为96.9%,RSD=2.1%。该法灵敏度高，稳定性好,可为制订高良姜的质量指标提供方法依据。表4二、中药复方及配伍中总生物碱含量测定紫外可见分光光度法单用测定复方中生物碱含量紫外可见分光光度法与其它方法联用测定总生物碱含量中药配伍中总生物碱含量测定结论紫外可见分光光度法单用测定复方中生物碱含量、紫外可见分光光度法与其它方法联用测定总生物碱含量和中药配伍中总生物碱含量测定（表5）研究人员研究药物及方法冉海琳等[10]建立了测定川乌、草乌中酯型生物碱含量的紫外分光光度法史亚军等[11]建立了测定骨刺消痛胶囊中酯型生物碱含量的紫外分光光度法程丽梅等[12]利用紫外分光光度法对骨刺消痛胶囊中酯型生物碱含量进行了限度研究刘冰等[13]利用紫外可见分光光度计对骆驼蓬总生物碱颗粒剂中总生物碱含量进行了测定李孝栋等[14]用紫外分光光度法测定桃红四物缓释片中总生物碱的含量普建军，庄学潮等[15]应用紫外分光光度法对外用伤科黄水中主要化学成分生物碱进行了含量测定，相关系数0.9997韩建伟等[16]以黄连生物碱提取量为考察指标,采用紫外分光光度法测定黄连生物碱含量,比较了黄连与其余药材混煎及分煎合并两种工艺对舒胃颗粒中黄连生物碱含量的影响杨玉琴，梁光义，秦利芬等[17]研究四逆汤的汤剂，经方颗粒，单方颗粒等三种剂型中各自生物碱含量的测定戴开金，罗奇志等[18]对葛根芩连汤剂和微丸中总生物碱进行了含量测定张学农等[19]将骆驼蓬总生物碱胶囊与总生物碱浸膏胶囊和总生物碱片剂进行了比较,对骆驼蓬总生物碱胶囊剂的处方进行了较好的筛选结论：

中药中所含成分繁多，准确测定中药及中药复方中总生物碱含量对中药制剂含量限制级优化制剂工艺具有重大意义。单用紫外可见分光光度法及紫外可见分光光度法与其它方法联用可较准确测定总生物碱含量。众多研究皆证明紫外可见分光光度法在测定总生物碱时准确，可靠，重现性好，可广泛用于总生物碱含量的测定。展望：

紫外分光光度法作为药物的一种常用分析方法,尤其是在近十几年中,其方法学的研究已经得到普遍的认可，它在总成分中应用广泛，并且可以很好地测定。它在单一成分的测定中也具有很好的稳定性、重现性，而且快速、简捷，结果准确。对于成分复杂的药物，由于仪器自动化，数据计算机化处理，应用紫外光光度法进行多组分含量测定更加简便。

总之，随着现代科学各个领域的不断发展，新技术新方法不断应用到药物分析中来，因此药物分析今后的发展要向着：系统筛选自动化分析仪器的应用，集分析操作自动化，数据处理电子计算机化，达到快速、高效、特异性强、重现性好的目的。参考文献：[1]陆世惠，龙盛京，UV测定两面针提取液中总生物碱的含量，西北药学杂志2008,23（6）：350-352[2]刘志才,毕鸿亮.应用紫外分光光度法测定苦参总碱的含量.黑龙江医药,2001,14(3):174[3]张菊红,王志伟,金吉琴,等.蒺藜全草中总皂苷含量的测定.中国临床药学杂志,2001,10(4):244[4]王宇,张明,于超,等.紫外分光光度法测定不同产地半夏药材中生物碱的含量.重庆中草药研究,2001,43:34[5]黄淑彰,黎小伟.厚朴酚与和厚朴酚含量测定方法.中国药师.2002,5(8):495[6]吕定刚，采用一阶导数紫外分光光度法测定制川乌、制草乌、制附子中总生物碱的含量，《当代医药论丛》，2014,12（2）：47--49[7]梁秀群，薄层-紫外分光度法对克泻灵胶囊总生物碱中槐果碱含量测定的效果分析，主管药师，中国临床新医学，2010.2,3（2）：179--181[8]常军民,堵年生,王青,等.紫外分光光度法测定新疆鼠尾草中6,7-去氢罗列酮的含量.中成药,2001,23(8):600[9]林辉.中药高良姜总黄酮的含量测定.时珍国医国药,2001,12(6):486[10]冉海琳，吴佳，杨惠莲.紫外分光光度法测定双虎肿痛宁喷雾剂中酯型生物碱含量[J].中国药业:2007，16（21）,29.[11]史亚军,唐志书,崔春利.骨刺消痛胶囊中酯型生物碱含量研究[J].云南中医中药杂志：2009,4（30）,50-51.[12]程丽梅.骨刺消痛胶囊中酯型生物碱含量限度研究[J].中国医药指南：2010,8（29）,216-217.[13]刘冰，买尔旦·马合木提,葛继红.骆驼蓬总生物碱颗粒剂的制备及含量测定[J].新疆医科大学学报：2003,26（1）,81-82.[14]王琼珺,李素云,李孝栋.桃红四物缓释片中总生物碱的含量测定[J].齐齐哈尔医学院学报：2010,31（18）,2937-2938.[15]普建军，庄学潮.紫外分光光度法测定外用伤科黄水中生物碱含量[J].时珍国药研究：1994,6（4）,22.[16]韩建伟，蒋伟，王佳馨，周颖.两种工艺对舒胃颗粒中黄连生物碱含量的影响[J].中国药师：2007,10（9）,889-884.[17]杨玉琴，梁光义，秦利芬，谷博，贺祝英，曹佩雪,3种剂型四逆汤中总生物碱的含量研究[J].安徽农业科学：2011，39(30)，18526－18527.[18]戴开金，罗奇志，罗佳波，谭晓梅，马安德.葛根芩连方药中黄连总生物碱的含量测定[J].第一军医大学学报:2004,24(4)，437-438.[19]张学农，孙殿甲，贺冰，托乎提.骆驼蓬总生物碱胶囊剂的处方筛选及溶出度测定[J].中成药：1998,20（8）,5-7.[20]杨青，张璐.通宣理肺方不同剂型中总黄酮和生物碱含量测定[J].辽宁中医药大学学报：2013,15（12）.[21]梁秀群.薄层-紫外分光光度法对克泻灵胶囊总生物碱中槐果碱含量测定的效果分析[J].中国临床新医学：2010,3（2）,179-181.[22]郭琪，王德鸾.润肤膏生物碱含量测定实验研究[J].时珍国医国药：1998，9（4）,360.[23]曲仕明，王集会，高世杰.三种产地黄连上清丸中总生物碱含量的比较研究[J].中药园地:2012，31(6)，436.[24]孔广英，王艳秋.柱层析一紫外分光光度法测定小儿牛黄清心散中黄连总生物碱的含量[J].海峡药学:1999，11(1)，29-30.[25]张荣,汤秋华,胡永狮，郭文勇,杜青云.紫外分光光度法测定雷公藤口服液总生物碱的含量[J].华西药学杂志:2000,15(1).[26]陈佳江,熊敏,周静波,彭成，郭