临床微生物检验-产碱杆菌属和莫拉菌属

产碱杆菌属

Alcaligenes

[,ælkə'lidʒə,ni:z]

无色杆菌属

Achromobacter

[ə'krəumə,bæktə])

临床微生物检验教研室产碱杆菌属和无色杆菌属同属产碱杆菌科（Alcaligenaceae）分类

粪产碱杆菌(A.faecalis)木糖氧化无色杆菌(A.xylosoxidans)木糖氧化无色杆菌木糖氧化亚种(Subspxylosoxidans)木糖氧化无色杆菌脱硝亚种(Subsp.denitrificans)皮氏无色杆菌(A.Piechaudii)临床常见种类脱硝无色杆菌（A.denitrificans)临床意义

1.自然界分布广（水、土壤），是人体正常菌群。

2.条件致病，临床最常见的是粪产碱杆菌。

3.引起医院感染，如抵抗力低下患者发生败血症，并可从患者呼吸道、尿液、血液及脑脊液中分离出来。生物学特性革兰阴性杆菌、周鞭毛专性需氧营养要求不高，普平生长氧化酶＋、触酶＋O/F：产碱型不利用任何糖类（除木糖氧化无色杆菌）粪产碱杆菌鞭毛染色革兰阴性杆菌分离培养血平板：灰白色、湿润有光泽、不溶血菌落Mac或SS平板：无色或淡黄色菌落肉汤培养基：表面生长、浑浊生长生物学特性有些粪产碱杆菌产生特殊的水果样气味导致血平板上出现绿色的变色粪产碱杆菌在血平板上-不溶血木糖氧化无色杆菌菌落产碱杆菌在Mac上菌落生化反应蛋白胨肉汤生长，产氨，pH上升至8.6氧化酶阳性触酶阳性不分解任何糖类（除外。。。）

O-F培养基呈碱性（除外。。。）尿素酶阴性KIA底层斜面不变色硝酸盐还原：粪产碱-，无色杆菌+（除皮氏无色杆菌）生物学特性痰液、脓液、尿液脑脊液、血液直接涂片分离培养增菌培养革兰染色血平板麦康凯平板

35-37℃18-24h

挑可疑菌落

最后鉴定初步鉴定全面生化反应

16SrRNA基因检测G-b氧化酶+硝酸盐还原动力+

产碱杆菌和无色杆菌的检验程序耐药性药敏试验的药物选择与假单胞菌属相同。鉴别

与产碱假单胞菌的鉴别：

周鞭毛、蛋白胨肉汤生长产氨pH↑

粪产碱皮氏无色木糖氧化脱硝无色杆菌无色杆菌葡萄糖同化

-

-

+

-木糖同化

-

-

+

-硝酸盐还原-

-

+

+亚硝酸盐还原+

-

+

+葡萄糖酸盐-

+

+

-尿素-

-

-

v乙酰胺-

v

+

v枸橼酸盐+

-

+

+常见产碱杆菌和无色杆菌的主要区别粪产碱杆菌产碱假单胞菌假产碱假单胞菌氧化酶+++Mac生长+++尿素--/+-动力+++鞭毛周毛端单毛端单毛产酸葡萄糖---/+果糖--+木糖---/+硝酸盐还原-+/-+亚硝酸盐产气+-–产碱杆菌与产碱假单胞菌区别1、关于不动杆菌错误的是?A氧化酶＋B硝酸盐还原－C革兰阴性杆菌，形态多为球杆状D无动力E专性需氧2、嗜麦芽窄食单胞菌与不动杆菌的相同点是

A有鞭毛

B氧化酶阴性CDNA酶阳性

D革兰阴性球杆菌

E不氧化糖类3、嗜麦芽窄食单胞菌的生化反应是

A氧化酶试验阳性，缓慢氧化葡萄糖，DNA酶阳性

B氧化酶试验阳性，水解七叶苷，液化明胶

C氧化酶试验阴性，缓慢氧化葡萄糖，DNA酶阳性

D氧化酶试验阴性，缓慢氧化葡萄糖，产生吲哚

E氧化酶试验阳性，产生吲哚，DNA酶阳性思考题4、不动杆菌的生物学特征中“三阴”是指

ADNA酶阴性，氧化酶试验阴性，动力阴性

B氧化酶试验阴性．动力阴性，硝酸盐还原试验阴性

C动力阴性，硝酸盐还原试验阴性，DNA酶阴性

D氧化酶试验阴性，硝酸盐还原试验阴性，DNA酶阴性

E氧化酶试验阴性，硝酸盐还原试验阴性，革兰阴性杆菌5、产碱杆菌的生化反应特征是

A分解葡萄糖B分解乳糖

C分解麦芽糖D分解蔗糖

E一般不分解糖类6、鲍曼不动杆菌的培养特性正确的是

A在血平板上产生清晰的β-溶血环

B麦康凯上可生长

C在血平板上菌落较小

D产生色素

E营养要求高鲍曼不动杆菌与粪产碱杆菌的异同点？嗜麦芽、不动杆菌及产碱杆菌的主要微生物学特性？思考题

莫拉菌属

Moraxella

[,mɔ:ræk'selə]分类莫拉菌属(Moraxella)属莫拉菌科医学上重要的莫拉菌有：卡他莫拉菌（M.catarrhalis）

非液化莫拉菌(M.nonliquefaciens)

腔隙莫拉菌（M.lacunata）奥斯陆莫拉菌(M.osloensis)

亚特兰大莫拉菌(M.atlantae)

狗莫拉菌(M.canis)

林肯莫拉菌(M.lincolnii)其它莫拉菌：山羊莫拉菌和牛莫拉菌临床意义莫拉菌是人体（尤其是儿童、老年人）黏膜表面的正常菌群，多见于呼吸道，致病性较低。引起中耳炎、鼻窦炎、眼结膜炎、气管炎、肺炎、菌血症、脑膜炎、心包炎等。微生物特性革兰阴性球杆菌，不易脱色成双或短链状排列（与奈瑟菌相似），无鞭毛，部分菌株有荚膜具有多形性

细杆状球状diplococci奈瑟菌莫拉菌coccobacillus莫拉菌革兰染色镜下结果莫拉菌痰涂片中被中性粒细胞吞噬

分离培养：专性需氧，营养要求较高最适生长温度32~35℃血琼脂平板上生长良好，菌落灰白色、圆形凸起、光滑有光泽、不透明、不溶血。长时间培养后可见色素微生物特性卡他莫拉菌血平板菌落（菌落可被接种环在平板上完整水平推移）培养48h后菌落培养3天后菌落卡他莫拉菌在血平板上菌落卡他莫拉菌在MH平板上菌落培养24小时菌落培养48小时后菌落卡他莫拉菌巧克力平板上菌落卡他莫拉菌在巧克力平板培养48h后菌落卡他莫拉菌在巧克力平板培养3天的菌落菌落呈淡粉色氧化酶阳性、触酶阳性不能分解任何糖类,OF(-)吲哚(-)无动力卡他莫拉菌DNA酶阳性、丁酸（乙酰）酯酶阳性、硝酸盐还原阳性微生物特性（生化特性）微生物检验分离培养标本采集接种首选血平板较小的圆形凸起、光滑、不透明或半透明、边缘整齐灰白色不溶血的菌落。微生物检验属间鉴定（与奈瑟菌属，不动杆菌属区别）氧化酶阳性触酶阳性无动力不分解任何糖类吲哚试验阴性属内鉴定（H2S，硝酸盐，DNA酶，生长温度，尿素，明胶水解，动力等）（可与不动杆菌区别）（可与奈瑟菌区别）莫拉菌属与相似属间主要鉴别特征试验莫拉菌奈瑟菌不动杆菌球状

+/-

+

-球杆状

+/--

+氧化酶++-葡萄糖-+/-VDNA酶

+/-

--硝酸盐还原+/-+/--

莫拉菌属属内主要鉴别特征项目腔隙莫拉非液化莫拉狗莫拉林肯莫拉奥斯陆莫拉苯丙酮酸莫拉亚特兰大莫拉氧化酶+++++++触酶+++++++麦康凯生长-V(17)+-­V(49)++动力-------OF葡萄糖-------尿素酶-----+-苯丙氨酸脱氨酶---ND-+-七叶苷水解+ND-----硝酸盐还原+++-V(26)+ND亚硝酸盐还原--VV--V(20)DNA酶--+----溶血（羊血）-------明胶水解+------药物敏感试验大多数莫拉菌对低浓度的青霉素很敏感，所以临床上分离出的这些菌株一般不做药敏试验。但现在产β内酰胺酶的菌株也开始出现，要注意临床分离株的β内酰胺酶的检测,常用头孢硝噻吩纸片法检测。头孢硝噻吩纸片法检测β内酰胺酶IDENTIFICATIONGramstainnegativefastidious

aerobesNonmotileShortroborCoccobacillusCatalasepositiveOxidasepositive

Non-fermentingIndolenegative

首次发现于1896年，当时称之为卡他微球菌，后又称为卡他奈瑟菌和卡他布兰汉菌。曾经认为卡他莫拉菌是对人体无致病性的上呼吸道正常寄居菌。现发现该菌不仅可以引起儿童和老年人的上呼吸道感染，而且还是引起成人下呼吸道感染的重要病原菌。是儿童上颌窦炎、中耳炎、肺炎以及成人的慢性下呼吸道感染的第3位最常见致病菌，仅次于流感嗜血杆菌和肺炎链球菌。卡他莫拉菌

(Moraxellacatarrhalis)卡他莫拉菌在下列情况培养时必须鉴定和报告

从鼓膜穿刺、中耳、耳窦吸出标本分离到。支气管炎、肺炎患者痰等标本，直接涂片革兰染色，镜检有大量革兰阴性双球菌并在细胞内，且获纯培养。正常无菌体液标本，生长的卡他莫拉菌。卡他莫拉菌革兰阴性球菌，血琼脂平板或巧克力平板上生长良好，菌落灰白色、光滑，如用接种环推可在平板上移动。常用硝酸盐、DNA酶试验和丁酸酯酶（乙酰酯酶）与奈瑟菌属鉴别。卡他莫拉菌的快速鉴定试验革兰阴性球菌或球杆菌DNA酶（+）硝酸盐还原（+）乙酰酯酶（+）革兰阴性球形卡他莫拉菌被白细胞吞噬DNA酶（+）：上面是金葡菌，下面是卡他莫拉菌硝酸盐还原阳性乙酰酯酶（+）：用3-乙酰吲哚纸片沾取待检菌落，3分钟内纸片变为蓝绿色，即为阳性。乙酰酯酶试验原理：乙酰酯酶可以分解3-乙酰吲哚生成吲哚酚，在有氧情况下成蓝色。

药物敏感试验及结果解释对青霉素类敏感对头孢类、四环素类、喹诺酮类、氨基糖甙类药物均较为敏感脑炎或脑膜炎、脑脓肿应注意药物通过血脑屏障的问题

质控菌株：卡他莫拉菌ATCC25238耐药机制（了解）卡他莫拉菌对青霉素类抗生素耐药的原因是产生β-内酰胺酶中的BRO内酰胺酶的所致。卡他莫拉菌对氨基糖苷类耐药，据报道是由于耐药菌株可产生氨基糖苷类修饰酶，但对此酶尚需做进一步研究。在国内外均有耐四环素菌株的报道。有人分析了四环素耐药菌株，结果表明在细菌染色体上携带有TetB基因。复习关于莫拉菌属，错误的是

A革兰阴性球杆菌，不易脱色

B营养要求高，一般在普通平板上生长不良

C氧化酶阳性，触酶阳性

D无动力，吲哚试验阴性，可分解葡萄糖

E卡他莫拉菌大多数菌株产DNA酶，但不能还原硝酸盐

F可用乙酰酯酶试验鉴别卡他莫拉菌与奈瑟菌非发酵革兰阴性杆菌临床常见种类有假单胞菌、窄食单胞菌、不动杆菌、伯克霍尔德菌属、产碱杆菌、无色杆菌属、莫拉菌非发酵革兰阴性杆菌的共同特性有G-b、多专性需氧、营养要求不高、OF为O或-、氧化酶多