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【实用】检验科SOP【实用】检验科SOP文件药海无涯学无止境专注医学领域药海无涯学无止境专注医学领域基因扩增检测实验及结果分析适用范围:适用于本室使用的普通离心机。负责人:肖静操作人:胡可存蒋艺勤4、标准程序:基因扩增检测标准程序:扩增反应前须先在样本输入模板上按照性对照、阳性对照、室内质控品各一份,一组阳性标准品个梯度、、、4。WindowsNT界面。PCR5分钟。ABIPrism5700SDSSoftware图标进入程序设置界面。单击“文件”菜单中的“”(或单击工具栏中的“新建”扭。应用检测管理程序,并将其添加到样品板文档中。检测反应管,根据当次实验所需条件编辑时间和温度。运行样品板文档。结果分析标准程序:——调整参数,获得较好的标准曲线,显示定量结果——登记,发报告。整体曲线的观察:将所有曲线选中进行整体观察)观察是否存在污染情况(包括标本污染和试剂污染大量曲线在同一Ct值出现上涨的情况。观察是否有光路传导阻滞或电压波动等机器原因形成的异常曲线。阴性对照的分析阴性对照:试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知阴性标本。作用:用以监测实验室和前处理过程中是否存在污染。阳性对照的分析阳性对照:试剂中加入与待检标本进行同样处理的已知阳性标本。作用:用以监测实验能否正常检出阳性标本,避免假阴性的出现。室内质控品的分析控品。作用:用以监控日常实验的精密度。阳性标准品的分析1)模稀释可能存在问题,提示实验中存在较大人为误差。2)Ct值是否在平日的正常位置。Ct是否为试剂扩增效率下降(如试剂过期或保存条件不合格。Ct示可能存在低拷贝阳性标准品的降解情况。104标准品,用作以下三方面监控:一是否存在操作误104Ct单个曲线的判断:逐个分析每条曲线,判断曲线的阴阳性或属(25Ct)2~8(是否有三期特征Ctvs.WellNumberRnvs.Cycle这三种扩增图形式下分析数据。得出定量结果:调节基线和阈值以得到一较好的标准曲线。电性上扬而得出的假阳性结果和某些弱阳性标本因终末荧光值过低而显示的假阴性。发放报告:及时登记检测结果记录,发放临床报告。种,当次实验结果不可发,查找原因,重做实验。阴性对照出现扩增。阳性对照无扩增。大批甚至所有的标本都扩增了。室内质控血清检测结果出现失控情况,实验失控的具体标准详见室内质控标准操作程序。以发放结果。阴性对照没有扩增,阳性对照扩增。数的数值
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