第二章基因工程在食品工业中的应用

第二章基因工程在食品工业中的应用第一节基因工程概述一、基因工程的定义二、基因工程的发展简史一、基因工程的定义二、基因工程的发展简史（一）遗传物质的研究（二）基因工程的诞生和发展（一）遗传物质的研究（二）基因工程的诞生和发展第二节基因工程工具酶一、限制性内切核酸酶二、DNA甲基化酶三、连接酶四、DNA聚合酶五、碱性磷酸酯酶六、T4多聚核苷酸激酶七、S1核酸酶八、反向转录酶一、限制性内切核酸酶（一）限制性内切酶的命名（二）限制性内切酶种类（三）限制性内切酶的基本特性（一）限制性内切酶的命名（二）限制性内切酶种类1.Ⅰ类限制性内切酶2.Ⅱ类限制性内切酶3.Ⅲ类限制性内切酶1.ⅠⅠ类类限限制制性性内内切切酶酶2.ⅡⅡ类类限限制制性性内内切切酶酶3.ⅢⅢ类类限限制制性性内内切切酶酶（三三））限限制制性性内内切切酶酶的的基基本本特特性性1.识识别别特特定定序序列列2.切切割割方方式式1.识识别别特特定定序序列列2.切切割割方方式式二、、DNA甲甲基基化化酶酶三、、连连接接酶酶四、、DNA聚聚合合酶酶（一一））大大肠肠杆杆菌菌DNA聚聚合合酶酶（二二））大大肠肠杆杆菌菌Klenow片片段段（一一））大大肠肠杆杆菌菌DNA聚聚合合酶酶（二二））大大肠肠杆杆菌菌Klenow片片段段五、、碱碱性性磷磷酸酸酯酯酶酶六、、T4多聚聚核核苷苷酸酸激激酶酶七、、S1核核酸酸酶酶八、、反反向向转转录录酶酶第三三节节基基因因工工程程载载体体及及其其选选择择一、、大大肠肠杆杆菌菌载载体体二、、酵酵母母载载体体三、、植植物物载载体体四、、动动物物载载体体一、、大大肠肠杆杆菌菌载载体体（一一））质质粒粒载载体体（二二））噬噬菌菌体体（三三））柯柯斯斯质质粒粒载载体体（一一））质质粒粒载载体体（二二））噬噬菌菌体体（三三））柯柯斯斯质质粒粒载载体体二、、酵酵母母载载体体（一一））整整合合型型载载体体（（YIP））（二二））复复制制型型载载体体（（YRP））（三三））附附加加体体型型载载体体（（YEP））（一一））整整合合型型载载体体（（YIP））（二二））复复制制型型载载体体（（YRP））（三三））附附加加体体型型载载体体（（YEP））三、、植植物物载载体体四、、动动物物载载体体第四四节节目目的的基基因因的的制制备备一、、基基因因组组文文库库法法二、、cDNA文文库库法法三、、化化学学合合成成法法四、、聚聚合合酶酶链链式式反反应应（（PCR））一、、基基因因组组文文库库法法二、、cDNA文文库库法法三、、化化学学合合成成法法四、、聚聚合合酶酶链链式式反反应应（（PCR））第五五节节基基因因的的克克隆隆与与检检测测一、、基基因因的的克克隆隆二、、重重组组克克隆隆的的筛筛选选与与鉴鉴定定一、、基基因因的的克克隆隆（一一））基基因因与与载载体体的的连连接接（二二））重重组组DNA导导入入受受体体细细胞胞（一一））基基因因与与载载体体的的连连接接1.黏黏性性末末端端连连接接2.平平末末端端连连接接3.人人工工加加尾尾连连接接4.人人工工接接头头连连接接1.黏黏性性末末端端连连接接2.平平末末端连连接3.人人工工加尾尾连接接4.人人工工接头头连接接（二））重组组DNA导导入受受体细细胞1.生生物物学方方法2.物物理理学方方法3.化化学学方法法1.生生物物学方方法2.物物理理学方方法3.化化学学方法法二、重重组克克隆的的筛选选与鉴鉴定（一））利用用表型型特征征进行行筛选选（二））重组组DNA电电泳检检测（三））内切切酶图图谱鉴鉴定（四））利用用核酸酸杂交交进行行鉴定定（五））利用用聚合合酶链链式反反应（（PCR））技术术鉴定定（六））免疫疫沉淀淀检测测法（七））DNA序序列分分析（一））利用用表型型特征征进行行筛选选1.抗抗药药性标标志的的筛选选2.ββ-半乳乳糖苷苷酶系系统筛筛选3.利利用用噬菌菌斑的的形成成进行行筛选选1.抗抗药药性标标志的的筛选选2.ββ-半乳乳糖苷苷酶系系统筛筛选3.利利用用噬菌菌斑的的形成成进行行筛选选（二））重组组DNA电电泳检检测（三））内切切酶图图谱鉴鉴定（四））利用用核酸酸杂交交进行行鉴定定（五））利用用聚合合酶链链式反反应（（PCR））技术术鉴定定(六)免免疫沉沉淀检检测法法（七））DNA序序列分分析第六节节外外源基基因的的表达达一、外外源基基因正正确表表达的的条件件二、外外源基基因在在原核核细胞胞中的的表达达特点点三、影影响外外源基基因在在原核核细胞胞中高高效表表达的的因素素四、外外源基基因在在真核核细胞胞中的的表达达特点点一、外外源基基因正正确表表达的的条件件（一））启动动子（二））S-D序序列（三））起始始密码码子（四））终止止子（五））表达达产物物的后后加工工（一））启动动子（二））S-D序序列（三））起始始密码码子（四））终止止子（五））表达达产物物的后后加工工二、外外源基基因在在原核核细胞胞中的的表达达特点点三、影影响外外源基基因在在原核核细胞胞中高高效表表达的的因素素（一））启动动子结结构对对表达达效率率的影影响（二））载体体的选选择（三））S-D序序列与与起始始密码码子之之间的的距离离（四））转译译起始始相关关序列列对表表达效效率的的影响响（五））转录录终止止区对对外源源基因因表达达效率率的影影响（六））基因因拷贝贝数对对表达达效率率的影影响（七））翻译译后的的蛋白白修饰饰与基基因表表达的的关系系（八））提高高表达达蛋白白的稳稳定性性（九））培养养条件件的控控制对对表达达效率率的影影响（一））启动动子结结构对对表达达效率率的影影响（二））载体体的选选择（三））S-D序序列与与起始始密码码子之之间的的距离离（四））转译译起始始相关关序列列对表表达效效率的的影响响（五））转录录终止止区对对外源源基因因表达达效率率的影影响（六））基因因拷贝贝数对对表达达效率率的影影响（七））翻译译后的的蛋白白修饰饰与基基因表表达的的关系系（八））提高高表达达蛋白白的稳稳定性性（九））培养养条件件的控控制对对表达达效率率的影影响四、外外源基基因在在真核核细胞胞中的的表达达特点点第七节节基基因工工程在在食品品工业业中应应用一、改改良食食品加加工原原料二、改改良微微生物物菌种种性能能三、应应用于于食品品酶制制剂的的生产产四、改改良食食品加加工工工艺五、应应用于于生产产保健健食品品的有有效成成分六、利利用啤啤酒酵酵母基基因工工程法法生产产索马马甜一、改改良食食品加加工原原料（一））改良良动物物性食食品源源（二））改良良植物物性食食品源源（一））改良良动物物性食食品源源（二））改良良植物物性食食品源源1.改改良良蛋白白质类类食品品2.改改良良油脂脂类食食品3.延延熟熟保鲜鲜1.改改良良蛋白白质类类食品品2.改改良良油脂脂类食食品3.延延熟熟保鲜鲜二、改改良微微生物物菌种种性能能三、应应用于于食品品酶制制剂的的生产产三、应应用于于食品品酶制制剂的的生产产四、改改良食食品加加工工工艺五、利利用基基因工工程生生产甜甜蛋白白索马马甜（一））索马马甜研研究概概况（二））利用用基因因工程程法生生产索索马甜甜（三））利用用基因因工程程对索索马甜甜进行行改性性（一））索马马甜研研究概概况（二））利用用基因因工程程法生生产索索马