第八章疾病与人类健康与1课件

第八章疾病与人类健康与第八章疾病与人类健康与1优选第八章疾病与人类健康与优选第八章疾病与人类健康与2生物学性状形态结构生物学性状形态结构3核衣壳核酸：两条ssRNA与核衣壳蛋白(P7)结合形成双体结构

衣壳：双层壳膜内层为衣壳蛋白（P24)

外层为内膜蛋白（P17)包膜脂质双层刺突gp120,gp41

生物学性状形态结构核衣壳核酸：两条ssRNA与核衣壳蛋白(P7)结合形成双体4

病毒基因组全长约9200bp，其5’端和3’端各有一段相同的核苷酸序列，是长末端重复序列(LTR)，中间含有env、pol、gag3个结构基因和tat、rev、nef、vif、vpu、vpr等6个调节基因。生物学性状基因组结构与功能病毒基因组全长约9200bp，其5’端和3’5结构基因

env基因：编码gp41：介导病毒包膜与宿主胞膜的融合；

gp120：有病毒颗粒与NT抗体及宿主细胞表面的CD4分子结合的部位。

pol基因：编码产生逆转录酶(p66/p53)和整合酶(p31)，与病毒的复制有关。

gag基因：编码产生蛋白前体，经酶解后形成3种蛋白(P17、

P24、P15)。调节基因：tat、rev、nef、vif、vpu、vprtat、rev和nef的产物对HIV表达的正、负调节以及对维持

HIV在细胞中复制平衡和控制HIV潜伏有重要意义。长末端重复序列(LTR)：对病毒转录的调控起关键作用。生物学性状基因组结构与功能结构基因生物学性状基因组结构与功能6

HIV病毒体的包膜糖蛋白刺突与细胞上的特异受体结合，然后病毒包膜与细胞膜发生融合。核衣壳进入细胞质内脱壳，释放其核心RNA进行复制。病毒的复制生物学性状HIV病毒体的包膜糖蛋白刺突与细胞上的特异受7病毒变异性

HIV基因组可发生变异，最易变异的是编码包膜糖蛋白的env基因和调节基因nef。估计病毒env基因核苷酸变异概率每年每个位点约0.1%，其变异率与流感病毒相似。根据nef基因序列的异同将HIV-1分为M、O、N等3组(group)12个亚型(subtype)；HIV-2型为A～F等6个亚型。在非洲主要流的是HIV-1的A、C、D、和E亚型，我国云南省感染者主要为B和C亚型。全球流行将以C和E亚型为主，另外各亚型的流行时间和传播情况也不同。

生物学性状病毒变异性生物学性状8

HIV仅感染表面有CD4受体的细胞。实验室中常用正常人T细胞分离病毒。感染病毒的细胞出现CPE。动物模型可用HIV感染恒河猴和黑猩猩。

培养特性生物学性状HIV仅感染表面有CD4受体的细胞。实验室中956℃加热30min；冻干血制品需68℃72h方能保证污染病毒的灭活；高压蒸气灭菌（103.4kpa/121.3℃）20min可被灭活；10%漂白粉液、0.5%次氯酸钠、50%乙醇、35%异丙醇、0.3%H2O2、0.5%来苏等消毒液中室温10min保证完全被灭活。

抵抗力HIV的抵抗力不强，以下条件可被灭活：生物学性状抵抗力HIV的抵抗力不强，以下条件可被灭活：生物学性状10HBV的发现源于表面抗原的研究。全球流行将以C和E亚型为主，另外各亚型的流行时间和传播情况也不同。WHO和包括我国在内的许多国家都制定了控制HIV感染的措施：tat、rev和nef的产物对HIV表达的正、负调节以及对维持HIV进入机体后病毒开始复制，约在8～12w时出现病毒血症，此期病毒在体内广泛播散，并开始在淋巴样器官种植，3～6w在许多病人（50%～70%）体内发展成急性单核细胞增多症样表现，其后大多数病毒以前病毒的形式整合于宿主细胞染色体内，进入长期的、无症状的潜伏感染期。检测的项目主要是HBsAg和抗HBs、HBeAg和抗HBe、以及抗HBcIgM和抗HBcIgG，必要时也可检测PHSA、PreS1和PreS2的抗原和抗体。S区基因：包括S基因、PreS1与PreS2基因，分别编有此细胞株可持续地产生Dane颗粒。WHO和包括我国在内的许多国家都制定了控制HIV感染的措施：传染源a）HIV无症状携带者b）艾滋病患者病毒分离：取新鲜分离的正常人淋巴细胞或脐血淋巴细胞接种病人的血液单个核细胞、骨髓细胞、血浆或脑脊液等标本。断HBV与肝细胞的结合而起抗病毒作用。HBcAg抗原很强，能刺激机体产生抗HBc，但无中和作用。抗HBs：NT抗体，免疫力（+）；合并各种条件致病菌(如分枝杆菌、念珠菌、卡氏肺孢菌等)或其他病毒(如EBV，CMV、HHV-8型等)感染；3℃）20min可被灭活；致病性与免疫性传染源和传播途径传染源

a）HIV无症状携带者b）艾滋病患者HBV的发现源于表面抗原的研究。致病性与免疫性传染源和传播途11

2）血液传播：医源性吸毒者1）性传播：STD之一同性恋异性恋传播途径3）母致病性与免疫性婴传播：胎盘产道哺乳1）性传播：STD之一传播途径12临床表现

1)原发感染致病性与免疫性

HIV进入机体后病毒开始复制，约在8～12w时出现病毒血症，此期病毒在体内广泛播散，并开始在淋巴样器官种植，3～6w在许多病人（50%～70%）体内发展成急性单核细胞增多症样表现，其后大多数病毒以前病毒的形式整合于宿主细胞染色体内，进入长期的、无症状的潜伏感染期。

临床表现1)原发感染致病性与免疫性H13

2)潜伏感染致病性与免疫性

此期可长达6个月至10年。临床无症状，有些病人可出现无痛性淋巴结肿大。当机体受到各种因素的激发使潜伏感染的病毒再次大量增殖而引致免疫损害时，才出现临床症状，进入AIDS相关综合征期。

临床表现2)潜伏感染致病性与免疫性此期可长达6个月至1014

3)AIDS相关综合征致病性与免疫性临床表现(AIDS-rilatedcomplex,ARC)早期有发热、盗汗、全身倦怠、体重下降、皮疹及慢性腹泻等胃肠道症状，并有进行性淋巴结病及舌上白斑等口腔损害。

3)AIDS相关综合征致病性与免疫性临床表现(AIDS-r154)典型AIDS致病性与免疫性临床表现

出现中枢神经系统疾患;

合并各种条件致病菌(如分枝杆菌、念珠菌、卡氏肺孢菌等)或其他病毒(如EBV，CMV、HHV-8型等)感染；并发卡波济肉瘤(Kaposisarcoma)。在感染后10年内约有50%的人会发展为AIDS。AIDS的5年间死亡率约为90%，多于临床症状出现后2年内死亡。

4)典型AIDS致病性与免疫性临床表现出现中枢神经系16感染病毒的细胞出现CPE。③大球形颗粒，即Dane颗粒，直径42nm。传染源a）HIV无症状携带者b）艾滋病患者HIV的gp120与细胞膜上的MHCⅡ类分子有一同源区，抗gp120抗体能与这类故表明机体的免疫力不足以清除病毒，HIV一经感染便终生携带病毒。③用HBVDNA探针与肝癌组织进行Southern印迹核酸杂交时，获得阳性结果，说明肝癌细胞染色体上整合有HBVDNA。在非洲主要流的是HIV-1的A、C、D、和E亚型，我国云南省感染者主要为B和C亚型。合成寡肽疫苗根据gp120分子中的主要中和决定簇（V3区）、与CD4受体结合区（C4区）和部分T细胞决定簇（C1、C4区）的氨基酸顺序，合成各种HIV的寡肽疫苗。S区基因：包括S基因、PreS1与PreS2基因，分别编HIV的gp120与细胞膜上的MHCⅡ类分子有一同源区，抗gp120抗体能与这类HBcAg：DNA复制标志，血清中（-），肝细胞核内（+）；外壳（包膜）：厚7nm。检出高效价抗HBc，特别是抗HBcIgM则表示HBV在肝内故表明机体的免疫力不足以清除病毒，HIV一经感染便终生携带病毒。tat、rev和nef的产物对HIV表达的正、负调节以及对维持并发卡波济肉瘤(Kaposisarcoma)。病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒的出芽释放，增加了细胞膜的通透性；机体对HIV感染的免疫应答冻干血制品需68℃72h方能保证污染病毒的灭活；HIV的致病机制1）选择性地侵犯CD4+T细胞，CD4/CD8比例倒置，导致免疫功能紊乱。2）HIV感染后B细胞多克隆活化，出现高丙球蛋白血症，循环血中免疫复合物及自身抗体含量增高，但对新抗原刺激的应答受到很大阻碍。3）单核－巨噬细胞也表达少量CD4分子，受HIV感染后通常不被杀死，成为感染后较长时期的病毒储存者。4）HIV感染所致神经细胞损害：约有40％～90％的AIDS患者出现不同程度的神经异常，包括HIV脑病、脊髓病变、周围神经炎和严重的AIDS痴呆综合征。致病性与免疫性感染病毒的细胞出现CPE。HIV的致病机制致病性与免疫性17HIV对CD4+T细胞损害的机制

1）病毒感染对细胞的直接杀伤作用a.病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒的出芽释放，增加了细胞膜的通透性；b.HIV增殖时可产生大量未整合的病毒cDNA,干扰细胞的正常生物合成；c.感染T细胞表面gp120与非感染细胞的CD4结合，细胞融合死亡，T细胞减少。

2)免疫病理所引起的细胞损伤：a.受染细胞膜上表达病毒的包膜糖蛋白，可激活特异性CTL的识别，或与特异性抗体结合后通过ADCC作用而破坏细胞；b.HIV的gp120与细胞膜上的MHCⅡ类分子有一同源区，抗gp120抗体能与这类

T细胞起交叉反应，即病毒诱导的自身免疫使细胞造成免疫病损害或功能障碍。

3)HIV感染诱导细胞凋亡：病毒激活T细胞凋亡基因，表达FAS受体，当其与细胞表面FAS结合后最终导致感染细胞死亡。致病性与免疫性HIV对CD4+T细胞损害的机制致病性与免疫性183.机体对HIV感染的免疫应答

机体感染HIV后产生多种抗体，包括抗gp120等中和抗体。HIV感染也可刺激机体细胞产生免疫应答，包括CTL细胞、NK细胞及ADCC的杀伤活性，但细胞免疫依然不能清除有HIV潜伏感染的细胞，这与病毒能逃逸免疫作用有关，如:HIV损伤CD4细胞，使整个免疫系统的功能失效；病毒基因整合于宿主细胞染色体中，细胞不表达或少表达病毒结构蛋白，使宿主长期呈“无抗原状态；病毒包膜糖蛋白的一些区段的高变异性，致使不断出现新抗原而逃逸免疫系统的识别；HIV对各种免疫细胞均有损害。故表明机体的免疫力不足以清除病毒，HIV一经感染便终生携带病毒。致病性与免疫性3.机体对HIV感染的免疫应答致病性与免疫性19

HIV感染早期呈病毒血症时，从病人血液、脑脊液和骨髓细胞中能分离到病毒，从血清中查到HIV抗原；无症状的潜伏期内一般不能或很少从外周血中检测到HIV抗原；进入AIDS相关综合征或典型AIDS期，于外周血中均可查到病毒抗原、核酸及抗体。微生物学检查法HIV感染早期呈病毒血症时，从病人血液、20检测抗体

ELISA、IFA、RIA:敏感性好，应用方便。尤其ELISA法目前最为常用。但由于HIV的全病毒抗原与其他逆转录病毒（HTLV）有交叉反应，而且病毒系芽生释放，病毒包膜中常带有细胞成分，故有一定的假阳性。因此，这类试验仅适用于筛查HIV抗体.WesternBlot（WB）:HIV抗体阳性者进一步用WB法予以确认。微生物学检查法检测抗体微生物学检查法21检测病毒及其组分病毒分离：取新鲜分离的正常人淋巴细胞或脐血淋巴细胞接种病人的血液单个核细胞、骨髓细胞、血浆或脑脊液等标本。培养2～4周，细胞病变出现后，可用间接免疫荧光法检测培养细胞中的病毒抗原，或用生化方法检测培养液中的逆转录酶活性。检测病毒抗原：常用ELISA法检测衣壳蛋白。P24多出现于HIV感染的急性期，而在潜伏期中为阴性，到出现典型的艾滋病症状时，p24又可重新升高。检测病毒核酸：应用核酸杂交法检测整合在细胞中的前病毒DNA片段，可确定细胞中HIV潜伏感染的情况。应用PCR检测HIV的前病毒DNA，或用逆转录-PCR法检测病毒的RNA。微生物学检查法检测病毒及其组分微生物学检查法22防治原则WHO和包括我国在内的许多国家都制定了控制HIV感染的措施：①建立HIV感染和AIDS的监测网络，控制疾病的流行蔓延；②进行广泛的宣传教育，取缔娼妓，防止性传播疾病的流行，抵制吸毒等社会弊病；③检测高危险人群包括供血员、同性恋、静脉注射毒品成瘾者、血友病患者，国外旅游者和外事使馆人员等；④禁止进口血液制品，如凝血因子Ⅷ等；⑤加强国境检疫、留检等。防治原则WHO和包括我国在内的许多国家都制定23疫苗研究

尚缺乏理想的疫苗,目前研究得最多的是：

1.基因工程亚单位疫苗:HIV的包膜糖蛋白gp160,gp120和gp41已在细菌、酵母和真核细胞系统表达成功，免疫人和动物后可诱生特异性中和抗体和激发特异性T细胞免疫反应，在黑猩猩实验中已证明有保护作用。

2.合成寡肽疫苗根据gp120分子中的主要中和决定簇（V3区）、与CD4受体结合区（C4区）和部分T细胞决定簇（C1、C4区）的氨基酸顺序，合成各种HIV的寡肽疫苗。在实验中已证明V3肽可以刺激动物和人产生抗HIV的中和抗体和细胞毒T细胞反应。

3.重组病毒载体活疫苗用痘苗病毒、腺病毒和脊髓灰质炎病毒疫苗株作载体，将HIV基因插入构建成重组病毒载体疫苗。动物试验已证明能产生特异性细胞免疫和中和抗体。用表达HIVgp160、gp120蛋白的重组疫苗病毒接种志愿者后，可以产生较强的T细胞免疫反应，但体液免疫相对较弱。

防治原则疫苗研究防治原则242)免疫病理所引起的细胞损伤：如欧美主要是adr型，为A基因型；HBcAg：DNA复制标志，血清中（-），肝细胞核内（+）；机体对HIV感染的免疫应答病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒的出芽释放，增加了细胞膜的通透性；病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒的出芽释放，增加了细胞膜的通透性；传染源a）HIV无症状携带者b）艾滋病患者近年来，临床上也常采用PCR技术对乙型肝炎进行辅助诊断。近年来应用基因克隆技术，可使HBV基因转移给小鼠或转染细胞株。1．细胞介导的免疫病理损伤种族有关。传染源a）HIV无症状携带者b）艾滋病患者抗HBc：无中和作用，包括直至1968年确定这种抗原与血清型肝炎密切相关，称为肝炎相关抗原（hepatitisassociatedantigen，HAA）；1963年Blumberg首先在澳大利亚土著人血清中发现一种新抗原，称为澳大利亚抗原（Australiaantigen）；冻干血制品需68℃72h方能保证污染病毒的灭活；并发卡波济肉瘤(Kaposisarcoma)。⑤加强国境检疫、留检等。③大球形颗粒，即Dane颗粒，直径42nm。故表明机体的免疫力不足以清除病毒，HIV一经感染便终生携带病毒。尿液、鼻液、汗液和粪-口传播的可能性很小。AIDS的治疗①阻止HIV吸附穿入的重组可溶性CD4分子(rsCD4)的使用；②给予抑制病毒逆转录酶活性的核苷类似物如叠氮胸苷(azidothymidine,AZT),双脱氧肌苷(2，,3，-dideoxyinosine,DDI)与2，,3，-双脱氧肌苷(2，,3，-dideoxyinosine,DDC)等；③非核苷类逆转录酶抑制剂，如德拉维拉丁(Delaviradine)和耐维拉平(Nevirapine)等，国内多用施多宁；④近年来研制的蛋白酶抑制剂，如佳息患、赛科纳瓦(sapuinavir)、瑞托纳瓦(ritonavir)以及英迪纳瓦(indinavir)等；⑤免疫调节剂，如IFN-γ，IL-2和胸腺素等。

“鸡尾酒疗法”：联合交替使用2种HIV逆转录酶抑制剂和1种HIV蛋白酶抑制剂，可有效地把血液中的HIV含量减少到最低(外周血中测不出HIV或其RNA)，因而能减轻症状及延缓生命。但无法清除整合在CD4+细胞染色体上的前病毒，因此仍不能从体内彻底清除HIV。

防治原则2)免疫病理所引起的细胞损伤：AIDS的治疗防治原则25第2节乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus，HBV）属嗜肝DNA病毒科（hepadnaviridae）。

HBV的发现源于表面抗原的研究。1963年Blumberg首先在澳大利亚土著人血清中发现一种新抗原，称为澳大利亚抗原（Australiaantigen）；直至1968年确定这种抗原与血清型肝炎密切相关，称为肝炎相关抗原（hepatitisassociatedantigen，HAA）；1970年D.S.Dane在肝炎患者血清中发现具有传染性的颗粒，即Dane颗粒（Dane'sparticle）。从而HBV被确认。

HBV是乙型肝炎病原体，主要经输血、注射、性行为和母婴传播。起病徐缓，部分患者可转为慢性，少数还可导致肝硬化和肝癌。第2节乙型肝炎病毒26形态与结构

完整的HBV颗粒亦称Dane颗粒，直径为42nm，具有双层核壳结构：核心颗粒：直径为28nm。颗粒内部：DNA和DNA多聚酶。颗粒表面（内衣壳）：含有HBcAg和HBeAg。外壳（包膜）：厚7nm。脂质双层：含有HBsAg、PHSAr和PreSAg

蛋白质生物学性状形态与结构

生物学性状27

①小球形颗粒，直径22nm；②管形颗粒，直径22nm，长度在50～700nm之间；③大球形颗粒，即Dane颗粒，直径42nm。生物学性状形态与结构

①小球形颗粒，直径22nm；生物学性状形态与结构28HBV基因结构及复制

HBV基因结构

HBVDNA是由长链L(负链)和短链S(正链)组成的不完全双链环状DNA(cccDNA)，短链的长度相当于长链的50%～85%。

HBVDNA长链载有病毒蛋白质的全部密码，有4个开放读码框架(ORF)，分别称为S、C、P和X区。生物学性状HBV基因结构及复制

HBV基因结构生物学性状29HBV基因结构S区基因：包括S基因、PreS1与PreS2基因，分别编码HBsAg、PreS1和PreS2Ag。C区基因：编码HBcAg，还有一个PreC区可能在病毒核心和外壳的附着及结合中起作用。P区基因：最长，编码HBVDNA多聚酶、逆转录酶以及

RNaseH。X区基因：编码X蛋白，可反式激活一些细胞的癌基因及病毒的基因等，可能与肝癌的发生有关。生物学性状HBV基因结构生物学性状30HBV的复制生物学性状HBV的复制生物学性状31抗原组成

生物学性状外壳：HBsAg：是机体受HBV感染的主要标志之一。具有抗原性，能刺激机体产生保护性抗体，即抗HBs。根据HBsAg抗原性差异，HBV可分为adr、adw、ayr、

ayw等4种血清型。血清型分布有明显的地区差异，并与种族有关。如欧美主要是adr型，为A基因型；我国以

adr、ayw为多见。PreS1和PreS2：存在吸附肝细胞受体的表位；其抗原性比HBsAg更强，抗PreS1和抗PreS2通过阻断HBV与肝细胞的结合而起抗病毒作用。抗原组成生物学性状外壳：32生物学性状衣壳HBcAg：HBcAg主要定位于感染细胞核内，不易从患者血清中检出。但HBcAg也可在肝细胞膜表面表达，宿主CTL作用的主要靶抗原。

HBcAg抗原很强，能刺激机体产生抗HBc，但无中和作用。检出高效价抗HBc，特别是抗HBcIgM则表示HBV在肝内处于复制状态。HBeAg：HBeAg可作为HBV复制及血清具有传染性的标志。急性乙型肝炎进入恢复期时HBeAg消失，抗HBe阳性；但抗HBe亦见于携带者及慢性乙型肝炎血清中。抗原组成生物学性状衣壳抗原组成33易感动物和细胞培养

只有黑猩猩对HBV易感，接种后可发生与人类相似的急慢性感染。体外细胞培养尚未成功。近年来应用基因克隆技术，可使HBV基因转移给小鼠或转染细胞株。将病毒DNA导入肝癌细胞后，病毒可复制并在细胞中表达HBsAg、HBcAg和HBeAg。有此细胞株可持续地产生Dane颗粒。这些细胞培养可用于抗HBV药物的筛选、疫苗制备及HBV致病机制研究等。生物学性状易感动物和细胞培养

只有黑猩猩对HBV易感，接种后可发生34抵抗力

HBV对理化因素的抵抗力相当强：对低温、干燥、紫外线、醚、氯仿、酚等均有抵抗性。高压灭菌(121℃15min)、0.5%过氧乙酸、5%次氯酸钠、3%漂白粉液、0.2%新洁尔灭等均可使HBV失活。但应指出，HBV的感染性与HBsAg的抗原活性并非一致。如100℃10min或pH2.4处理6h均可使HBV失去感染性，但仍保持HBsAg的抗原活性。生物学性状抵抗力

HBV对理化因素的抵抗力相当强：生物学性状35传染源和传播途径

传染源急性、慢性乙肝患者及HBsAg无症状携带者均为传染源，特别是无症状的HBsAg携带者做为传染源危害性更大。致病性和免疫性传染源和传播途径致病性和免疫性36

乙型肝炎主要是经血液或注射途径传播即非胃肠道的感染(parenteralinfection)：1.血液、血制品传播：有少数HBsAg阴性、而HBVDNA阳性的血液仍可引起感染。2.医源性传播：通过注射、手术、采血、拔牙、内窥镜检查、预防接种、针刺、纹身、各种医疗器具、甚至工作人员的手，均可传播乙型肝炎。3.母婴传播主要是在围产期，分娩时新生儿经产道接触或吸吞入含HBV的母血、羊水、或分泌物所致，少数可由于宫内感染(＜10%)，也可通过母乳、体液或密切接触而传播。4.接触传播：日常生活中如共用牙刷、洗澡刷子、剃须刀等可引起HBV感染。通过唾液传播的可能性也应受到重视。性交，尤其男性同性恋亦可传播HBV。因此，在西方国家将乙肝列为性传播疾病(STD)之一。尿液、鼻液、汗液和粪-口传播的可能性很小。致病性和免疫性传播途径乙型肝炎主要是经血液或注射途径传播即非胃肠道的感染37致病机制

乙型肝炎的临床表现呈多样性，可表现为无症状病毒携带者、急性肝炎、慢性肝炎及重症肝炎等。

HBV的致病机制，除了HBV对肝细胞直接损害外，主要是通过宿主的免疫应答引起肝细胞的病理改变的临床表现。

致病性和免疫性致病机制致病性和免疫性381．细胞介导的免疫病理损伤

2．体液免疫所致的免疫损伤

3．自身免疫所致的损伤

致病性和免疫性1．细胞介导的免疫病理损伤致病性和免疫性39免疫性

体液免疫：抗HBs：中和体液中HBV，使其失去感染性。抗PreS2：封闭病毒与肝细胞表面的PHSA受体，阻止病毒吸附于肝细胞。抗Hbe：可通过与肝细胞表面HBeAg结合后，通过补体介导而参与破坏病毒感染的肝细胞。

细胞免疫：主要依靠CTL。CTL对HBV感染的肝细胞(靶细胞)有直接杀伤作用。据认为，针对HBcAg的CTL在清除HBV感染的靶细胞中有较重要的作用。致病性和免疫性NT抗体免疫性

体液免疫：致病性和免疫性NT抗体40

HBV与原发性肝癌

HBV感染与原发性肝癌的发生有密切关系，其依据是：①经流行病学调查表明，乙型肝炎患者及HBsAg携带者的原发性肝癌发生率明显高于未感染人群（危险性高217倍）；②用与HBV分子生物学相似的土拨鼠肝炎病毒(WHV)可诱发土拨鼠原发性肝癌。而未感染鼠则无一只发生肝癌；③用HBVDNA探针与肝癌组织进行Southern印迹核酸杂交时，获得阳性结果，说明肝癌细胞染色体上整合有HBVDNA。致病性和免疫性HBV与原发性肝癌致病性和免疫性41

最常用的是采用血清学方法检测患者血清中HBV抗原、抗体，并根据这些标志进行分析判断。近年来，临床上也常采用PCR技术对乙型肝炎进行辅助诊断。

微生物学检查法微生物学检查法42检测HBV抗原、抗体常用的方法有RIA、ELISA法，间接血凝、反向间接血凝，对流免疫电泳、双向琼脂扩散法等，其中最敏感的方法是RIA、ELISA。检测的项目主要是HBsAg和抗HBs、HBeAg和抗HBe、以及抗HBcIgM和抗HBcIgG，必要时也可检测PHSA、PreS1和PreS2的抗原和抗体。上述各项检查组成一套乙型肝炎病毒抗原抗体检测系统(HBV血清标志)。

微生物学检查法检测HBV抗原、抗体微生物学检查法43tat、rev和nef的产物对HIV表达的正、负调节以及对维持外壳（包膜）：厚7nm。血液、血制品传播：有少数HBsAg阴性、而HBVDNA阳性的血液仍可引起感染。这些细胞培养可用于抗HBV药物的筛选、疫苗制备及HBV致病机制研究等。近年来，临床上也常采用PCR技术对乙型肝炎进行辅助诊断。核衣壳核酸：两条ssRNA与核衣壳蛋白(P7)结合形成双体结构其抗原性比HBsAg更强，抗PreS1和抗PreS2通过阻培养2～4周，细胞病变出现后，可用间接免疫荧光法检测培养细胞中的病毒抗原，或用生化方法检测培养液中的逆转录酶活性。5%过氧乙酸、5%次氯酸钠、3%漂白粉液、0.病毒吸附于肝细胞。断HBV与肝细胞的结合而起抗病毒作用。HBcAg抗原很强，能刺激机体产生抗HBc，但无中和作用。吸毒者4）HIV感染所致神经细胞损害：约有40％～90％的AIDS患者出现不同程度的神经异常，包括HIV脑病、脊髓病变、周围神经炎和严重的AIDS痴呆综合征。检测病毒抗原：常用ELISA法检测衣壳蛋白。乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus，HBV）属嗜肝DNA病毒科（hepadnaviridae）。合并各种条件致病菌(如分枝杆菌、念珠菌、卡氏肺孢菌等)或其他病毒(如EBV，CMV、HHV-8型等)感染；最常用的是采用血清学方法检测患者血清中HBV抗原、抗体，并根据这些标志进行分析判断。当机体受到各种因素的激发使潜伏感染的病毒再次大量增殖而引致免疫损害时，才出现临床症状，进入AIDS相关综合征期。P24多出现于HIV感染的急性期，而在潜伏期中为阴性，到出现典型的艾滋病症状时，p24又可重新升高。3℃）20min可被灭活；P24多出现于HIV感染的急性期，而在潜伏期中为阴性，到出现典型的艾滋病症状时，p24又可重新升高。高压蒸气灭菌（103.RNaseH。在非洲主要流的是HIV-1的A、C、D、和E亚型，我国云南省感染者主要为B和C亚型。抗HBe亦见于携带者及慢性乙型肝炎血清中。⑤加强国境检疫、留检等。1）选择性地侵犯CD4+T细胞，CD4/CD8比例倒置，导致免疫功能紊乱。病毒基因组全长约9200bp，其5’端和3’端各有一段相同的核苷酸序列，是长末端重复序列(LTR)，中间含有env、pol、gag3个结构基因和tat、rev、nef、vif、vpu、vpr等6个调节基因。HIV的gp120与细胞膜上的MHCⅡ类分子有一同源区，抗gp120抗体能与这类④近年来研制的蛋白酶抑制剂，如佳息患、赛科纳瓦(sapuinavir)、瑞托纳瓦(ritonavir)以及英迪纳瓦(indinavir)等；这些细胞培养可用于抗HBV药物的筛选、疫苗制备及HBV致病机制研究等。④禁止进口血液制品，如凝血因子Ⅷ等；检测病毒抗原：常用ELISA法检测衣壳蛋白。尿液、鼻液、汗液和粪-口传播的可能性很小。衣壳：双层壳膜内层为衣壳蛋白（P24)ayw等4种血清型。3）单核－巨噬细胞也表达少量CD4分子，受HIV感染后通常不被杀死，成为感染后较长时期的病毒储存者。检出高效价抗HBc，特别是抗HBcIgM则表示HBV在肝内HIV感染也可刺激机体细胞产生免疫应答，包括CTL细胞、NK细胞及ADCC的杀伤活性，但细胞免疫依然不能清除有HIV潜伏感染的细胞，这与病毒能逃逸免疫作用有关，如:1963年Blumberg首先在澳大利亚土著人血清中发现一种新抗原，称为澳大利亚抗原（Australiaantigen）；外层为内膜蛋白（P17)HBsAg：感染性（+）；但HBcAg也可在肝细胞膜表面表达，宿主CTL作用的主要Dane在肝炎患者血清中发现具有传染性的颗粒，即Dane颗粒（Dane'sparticle）。HIV在细胞中复制平衡和控制HIV潜伏有重要意义。③非核苷类逆转录酶抑制剂，如德拉维拉丁(Delaviradine)和耐维拉平(Nevirapine)等，国内多用施多宁；3）单核－巨噬细胞也表达少量CD4分子，受HIV感染后通常不被杀死，成为感染后较长时期的病毒储存者。及病毒的基因等，可能与肝癌的发生有关。起病徐缓，部分患者可转为慢性，少数还可导致肝硬化和肝癌。AIDS的5年间死亡率约为90%，多于临床症状出现后2年内死亡。HBcAg抗原很强，能刺激机体产生抗HBc，但无中和作用。WHO和包括我国在内的许多国家都制定了控制HIV感染的措施：HBcAg：DNA复制标志，血清中（-），肝细胞核内（+）；动物试验已证明能产生特异性细胞免疫和中和抗体。3℃）20min可被灭活；病毒的复制有关。病毒基因组全长约9200bp，其5’端和3’端各有一段相同的核苷酸序列，是长末端重复序列(LTR)，中间含有env、pol、gag3个结构基因和tat、rev、nef、vif、vpu、vpr等6个调节基因。检出高效价抗HBc，特别是抗HBcIgM则表示HBV在肝内2%新洁尔灭等均可使HBV失活。1.HBsAg：感染性（+）；传染性（+）；抗HBs：NT抗体，免疫力（+）；2.HBcAg：DNA复制标志，血清中（-），肝细胞核内（+）；抗HBc：无中和作用，包括抗HBcIgM：急性乙肝抗HBcIgG：恢复期3.HBeAg：感染性（+）；传染性（+）；恢复期（-）；抗Hbe：无中和作用，恢复期（+），携带者，慢性（+）；4.PreS1、PreS2和PHSA受体：新感染（+）；抗PreS1、抗PreS2：NT抗体，恢复期（+）；微生物学检查法tat、rev和nef的产物对HIV表达的正、负调节以及对维44第八章疾病与人类健康与第八章疾病与人类健康与45优选第八章疾病与人类健康与优选第八章疾病与人类健康与46生物学性状形态结构生物学性状形态结构47核衣壳核酸：两条ssRNA与核衣壳蛋白(P7)结合形成双体结构

衣壳：双层壳膜内层为衣壳蛋白（P24)

外层为内膜蛋白（P17)包膜脂质双层刺突gp120,gp41

生物学性状形态结构核衣壳核酸：两条ssRNA与核衣壳蛋白(P7)结合形成双体48

病毒基因组全长约9200bp，其5’端和3’端各有一段相同的核苷酸序列，是长末端重复序列(LTR)，中间含有env、pol、gag3个结构基因和tat、rev、nef、vif、vpu、vpr等6个调节基因。生物学性状基因组结构与功能病毒基因组全长约9200bp，其5’端和3’49结构基因

env基因：编码gp41：介导病毒包膜与宿主胞膜的融合；

gp120：有病毒颗粒与NT抗体及宿主细胞表面的CD4分子结合的部位。

pol基因：编码产生逆转录酶(p66/p53)和整合酶(p31)，与病毒的复制有关。

gag基因：编码产生蛋白前体，经酶解后形成3种蛋白(P17、

P24、P15)。调节基因：tat、rev、nef、vif、vpu、vprtat、rev和nef的产物对HIV表达的正、负调节以及对维持

HIV在细胞中复制平衡和控制HIV潜伏有重要意义。长末端重复序列(LTR)：对病毒转录的调控起关键作用。生物学性状基因组结构与功能结构基因生物学性状基因组结构与功能50

HIV病毒体的包膜糖蛋白刺突与细胞上的特异受体结合，然后病毒包膜与细胞膜发生融合。核衣壳进入细胞质内脱壳，释放其核心RNA进行复制。病毒的复制生物学性状HIV病毒体的包膜糖蛋白刺突与细胞上的特异受51病毒变异性

HIV基因组可发生变异，最易变异的是编码包膜糖蛋白的env基因和调节基因nef。估计病毒env基因核苷酸变异概率每年每个位点约0.1%，其变异率与流感病毒相似。根据nef基因序列的异同将HIV-1分为M、O、N等3组(group)12个亚型(subtype)；HIV-2型为A～F等6个亚型。在非洲主要流的是HIV-1的A、C、D、和E亚型，我国云南省感染者主要为B和C亚型。全球流行将以C和E亚型为主，另外各亚型的流行时间和传播情况也不同。

生物学性状病毒变异性生物学性状52

HIV仅感染表面有CD4受体的细胞。实验室中常用正常人T细胞分离病毒。感染病毒的细胞出现CPE。动物模型可用HIV感染恒河猴和黑猩猩。

培养特性生物学性状HIV仅感染表面有CD4受体的细胞。实验室中5356℃加热30min；冻干血制品需68℃72h方能保证污染病毒的灭活；高压蒸气灭菌（103.4kpa/121.3℃）20min可被灭活；10%漂白粉液、0.5%次氯酸钠、50%乙醇、35%异丙醇、0.3%H2O2、0.5%来苏等消毒液中室温10min保证完全被灭活。

抵抗力HIV的抵抗力不强，以下条件可被灭活：生物学性状抵抗力HIV的抵抗力不强，以下条件可被灭活：生物学性状54HBV的发现源于表面抗原的研究。全球流行将以C和E亚型为主，另外各亚型的流行时间和传播情况也不同。WHO和包括我国在内的许多国家都制定了控制HIV感染的措施：tat、rev和nef的产物对HIV表达的正、负调节以及对维持HIV进入机体后病毒开始复制，约在8～12w时出现病毒血症，此期病毒在体内广泛播散，并开始在淋巴样器官种植，3～6w在许多病人（50%～70%）体内发展成急性单核细胞增多症样表现，其后大多数病毒以前病毒的形式整合于宿主细胞染色体内，进入长期的、无症状的潜伏感染期。检测的项目主要是HBsAg和抗HBs、HBeAg和抗HBe、以及抗HBcIgM和抗HBcIgG，必要时也可检测PHSA、PreS1和PreS2的抗原和抗体。S区基因：包括S基因、PreS1与PreS2基因，分别编有此细胞株可持续地产生Dane颗粒。WHO和包括我国在内的许多国家都制定了控制HIV感染的措施：传染源a）HIV无症状携带者b）艾滋病患者病毒分离：取新鲜分离的正常人淋巴细胞或脐血淋巴细胞接种病人的血液单个核细胞、骨髓细胞、血浆或脑脊液等标本。断HBV与肝细胞的结合而起抗病毒作用。HBcAg抗原很强，能刺激机体产生抗HBc，但无中和作用。抗HBs：NT抗体，免疫力（+）；合并各种条件致病菌(如分枝杆菌、念珠菌、卡氏肺孢菌等)或其他病毒(如EBV，CMV、HHV-8型等)感染；3℃）20min可被灭活；致病性与免疫性传染源和传播途径传染源

a）HIV无症状携带者b）艾滋病患者HBV的发现源于表面抗原的研究。致病性与免疫性传染源和传播途55

2）血液传播：医源性吸毒者1）性传播：STD之一同性恋异性恋传播途径3）母致病性与免疫性婴传播：胎盘产道哺乳1）性传播：STD之一传播途径56临床表现

1)原发感染致病性与免疫性

HIV进入机体后病毒开始复制，约在8～12w时出现病毒血症，此期病毒在体内广泛播散，并开始在淋巴样器官种植，3～6w在许多病人（50%～70%）体内发展成急性单核细胞增多症样表现，其后大多数病毒以前病毒的形式整合于宿主细胞染色体内，进入长期的、无症状的潜伏感染期。

临床表现1)原发感染致病性与免疫性H57

2)潜伏感染致病性与免疫性

此期可长达6个月至10年。临床无症状，有些病人可出现无痛性淋巴结肿大。当机体受到各种因素的激发使潜伏感染的病毒再次大量增殖而引致免疫损害时，才出现临床症状，进入AIDS相关综合征期。

临床表现2)潜伏感染致病性与免疫性此期可长达6个月至1058

3)AIDS相关综合征致病性与免疫性临床表现(AIDS-rilatedcomplex,ARC)早期有发热、盗汗、全身倦怠、体重下降、皮疹及慢性腹泻等胃肠道症状，并有进行性淋巴结病及舌上白斑等口腔损害。

3)AIDS相关综合征致病性与免疫性临床表现(AIDS-r594)典型AIDS致病性与免疫性临床表现

出现中枢神经系统疾患;

合并各种条件致病菌(如分枝杆菌、念珠菌、卡氏肺孢菌等)或其他病毒(如EBV，CMV、HHV-8型等)感染；并发卡波济肉瘤(Kaposisarcoma)。在感染后10年内约有50%的人会发展为AIDS。AIDS的5年间死亡率约为90%，多于临床症状出现后2年内死亡。

4)典型AIDS致病性与免疫性临床表现出现中枢神经系60感染病毒的细胞出现CPE。③大球形颗粒，即Dane颗粒，直径42nm。传染源a）HIV无症状携带者b）艾滋病患者HIV的gp120与细胞膜上的MHCⅡ类分子有一同源区，抗gp120抗体能与这类故表明机体的免疫力不足以清除病毒，HIV一经感染便终生携带病毒。③用HBVDNA探针与肝癌组织进行Southern印迹核酸杂交时，获得阳性结果，说明肝癌细胞染色体上整合有HBVDNA。在非洲主要流的是HIV-1的A、C、D、和E亚型，我国云南省感染者主要为B和C亚型。合成寡肽疫苗根据gp120分子中的主要中和决定簇（V3区）、与CD4受体结合区（C4区）和部分T细胞决定簇（C1、C4区）的氨基酸顺序，合成各种HIV的寡肽疫苗。S区基因：包括S基因、PreS1与PreS2基因，分别编HIV的gp120与细胞膜上的MHCⅡ类分子有一同源区，抗gp120抗体能与这类HBcAg：DNA复制标志，血清中（-），肝细胞核内（+）；外壳（包膜）：厚7nm。检出高效价抗HBc，特别是抗HBcIgM则表示HBV在肝内故表明机体的免疫力不足以清除病毒，HIV一经感染便终生携带病毒。tat、rev和nef的产物对HIV表达的正、负调节以及对维持并发卡波济肉瘤(Kaposisarcoma)。病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒的出芽释放，增加了细胞膜的通透性；机体对HIV感染的免疫应答冻干血制品需68℃72h方能保证污染病毒的灭活；HIV的致病机制1）选择性地侵犯CD4+T细胞，CD4/CD8比例倒置，导致免疫功能紊乱。2）HIV感染后B细胞多克隆活化，出现高丙球蛋白血症，循环血中免疫复合物及自身抗体含量增高，但对新抗原刺激的应答受到很大阻碍。3）单核－巨噬细胞也表达少量CD4分子，受HIV感染后通常不被杀死，成为感染后较长时期的病毒储存者。4）HIV感染所致神经细胞损害：约有40％～90％的AIDS患者出现不同程度的神经异常，包括HIV脑病、脊髓病变、周围神经炎和严重的AIDS痴呆综合征。致病性与免疫性感染病毒的细胞出现CPE。HIV的致病机制致病性与免疫性61HIV对CD4+T细胞损害的机制

1）病毒感染对细胞的直接杀伤作用a.病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒的出芽释放，增加了细胞膜的通透性；b.HIV增殖时可产生大量未整合的病毒cDNA,干扰细胞的正常生物合成；c.感染T细胞表面gp120与非感染细胞的CD4结合，细胞融合死亡，T细胞减少。

2)免疫病理所引起的细胞损伤：a.受染细胞膜上表达病毒的包膜糖蛋白，可激活特异性CTL的识别，或与特异性抗体结合后通过ADCC作用而破坏细胞；b.HIV的gp120与细胞膜上的MHCⅡ类分子有一同源区，抗gp120抗体能与这类

T细胞起交叉反应，即病毒诱导的自身免疫使细胞造成免疫病损害或功能障碍。

3)HIV感染诱导细胞凋亡：病毒激活T细胞凋亡基因，表达FAS受体，当其与细胞表面FAS结合后最终导致感染细胞死亡。致病性与免疫性HIV对CD4+T细胞损害的机制致病性与免疫性623.机体对HIV感染的免疫应答

机体感染HIV后产生多种抗体，包括抗gp120等中和抗体。HIV感染也可刺激机体细胞产生免疫应答，包括CTL细胞、NK细胞及ADCC的杀伤活性，但细胞免疫依然不能清除有HIV潜伏感染的细胞，这与病毒能逃逸免疫作用有关，如:HIV损伤CD4细胞，使整个免疫系统的功能失效；病毒基因整合于宿主细胞染色体中，细胞不表达或少表达病毒结构蛋白，使宿主长期呈“无抗原状态；病毒包膜糖蛋白的一些区段的高变异性，致使不断出现新抗原而逃逸免疫系统的识别；HIV对各种免疫细胞均有损害。故表明机体的免疫力不足以清除病毒，HIV一经感染便终生携带病毒。致病性与免疫性3.机体对HIV感染的免疫应答致病性与免疫性63

HIV感染早期呈病毒血症时，从病人血液、脑脊液和骨髓细胞中能分离到病毒，从血清中查到HIV抗原；无症状的潜伏期内一般不能或很少从外周血中检测到HIV抗原；进入AIDS相关综合征或典型AIDS期，于外周血中均可查到病毒抗原、核酸及抗体。微生物学检查法HIV感染早期呈病毒血症时，从病人血液、64检测抗体

ELISA、IFA、RIA:敏感性好，应用方便。尤其ELISA法目前最为常用。但由于HIV的全病毒抗原与其他逆转录病毒（HTLV）有交叉反应，而且病毒系芽生释放，病毒包膜中常带有细胞成分，故有一定的假阳性。因此，这类试验仅适用于筛查HIV抗体.WesternBlot（WB）:HIV抗体阳性者进一步用WB法予以确认。微生物学检查法检测抗体微生物学检查法65检测病毒及其组分病毒分离：取新鲜分离的正常人淋巴细胞或脐血淋巴细胞接种病人的血液单个核细胞、骨髓细胞、血浆或脑脊液等标本。培养2～4周，细胞病变出现后，可用间接免疫荧光法检测培养细胞中的病毒抗原，或用生化方法检测培养液中的逆转录酶活性。检测病毒抗原：常用ELISA法检测衣壳蛋白。P24多出现于HIV感染的急性期，而在潜伏期中为阴性，到出现典型的艾滋病症状时，p24又可重新升高。检测病毒核酸：应用核酸杂交法检测整合在细胞中的前病毒DNA片段，可确定细胞中HIV潜伏感染的情况。应用PCR检测HIV的前病毒DNA，或用逆转录-PCR法检测病毒的RNA。微生物学检查法检测病毒及其组分微生物学检查法66防治原则WHO和包括我国在内的许多国家都制定了控制HIV感染的措施：①建立HIV感染和AIDS的监测网络，控制疾病的流行蔓延；②进行广泛的宣传教育，取缔娼妓，防止性传播疾病的流行，抵制吸毒等社会弊病；③检测高危险人群包括供血员、同性恋、静脉注射毒品成瘾者、血友病患者，国外旅游者和外事使馆人员等；④禁止进口血液制品，如凝血因子Ⅷ等；⑤加强国境检疫、留检等。防治原则WHO和包括我国在内的许多国家都制定67疫苗研究

尚缺乏理想的疫苗,目前研究得最多的是：

1.基因工程亚单位疫苗:HIV的包膜糖蛋白gp160,gp120和gp41已在细菌、酵母和真核细胞系统表达成功，免疫人和动物后可诱生特异性中和抗体和激发特异性T细胞免疫反应，在黑猩猩实验中已证明有保护作用。

2.合成寡肽疫苗根据gp120分子中的主要中和决定簇（V3区）、与CD4受体结合区（C4区）和部分T细胞决定簇（C1、C4区）的氨基酸顺序，合成各种HIV的寡肽疫苗。在实验中已证明V3肽可以刺激动物和人产生抗HIV的中和抗体和细胞毒T细胞反应。

3.重组病毒载体活疫苗用痘苗病毒、腺病毒和脊髓灰质炎病毒疫苗株作载体，将HIV基因插入构建成重组病毒载体疫苗。动物试验已证明能产生特异性细胞免疫和中和抗体。用表达HIVgp160、gp120蛋白的重组疫苗病毒接种志愿者后，可以产生较强的T细胞免疫反应，但体液免疫相对较弱。

防治原则疫苗研究防治原则682)免疫病理所引起的细胞损伤：如欧美主要是adr型，为A基因型；HBcAg：DNA复制标志，血清中（-），肝细胞核内（+）；机体对HIV感染的免疫应答病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒的出芽释放，增加了细胞膜的通透性；病毒包膜糖蛋白插入细胞膜或病毒的出芽释放，增加了细胞膜的通透性；传染源a）HIV无症状携带者b）艾滋病患者近年来，临床上也常采用PCR技术对乙型肝炎进行辅助诊断。近年来应用基因克隆技术，可使HBV基因转移给小鼠或转染细胞株。1．细胞介导的免疫病理损伤种族有关。传染源a）HIV无症状携带者b）艾滋病患者抗HBc：无中和作用，包括直至1968年确定这种抗原与血清型肝炎密切相关，称为肝炎相关抗原（hepatitisassociatedantigen，HAA）；1963年Blumberg首先在澳大利亚土著人血清中发现一种新抗原，称为澳大利亚抗原（Australiaantigen）；冻干血制品需68℃72h方能保证污染病毒的灭活；并发卡波济肉瘤(Kaposisarcoma)。⑤加强国境检疫、留检等。③大球形颗粒，即Dane颗粒，直径42nm。故表明机体的免疫力不足以清除病毒，HIV一经感染便终生携带病毒。尿液、鼻液、汗液和粪-口传播的可能性很小。AIDS的治疗①阻止HIV吸附穿入的重组可溶性CD4分子(rsCD4)的使用；②给予抑制病毒逆转录酶活性的核苷类似物如叠氮胸苷(azidothymidine,AZT),双脱氧肌苷(2，,3，-dideoxyinosine,DDI)与2，,3，-双脱氧肌苷(2，,3，-dideoxyinosine,DDC)等；③非核苷类逆转录酶抑制剂，如德拉维拉丁(Delaviradine)和耐维拉平(Nevirapine)等，国内多用施多宁；④近年来研制的蛋白酶抑制剂，如佳息患、赛科纳瓦(sapuinavir)、瑞托纳瓦(ritonavir)以及英迪纳瓦(indinavir)等；⑤免疫调节剂，如IFN-γ，IL-2和胸腺素等。

“鸡尾酒疗法”：联合交替使用2种HIV逆转录酶抑制剂和1种HIV蛋白酶抑制剂，可有效地把血液中的HIV含量减少到最低(外周血中测不出HIV或其RNA)，因而能减轻症状及延缓生命。但无法清除整合在CD4+细胞染色体上的前病毒，因此仍不能从体内彻底清除HIV。

防治原则2)免疫病理所引起的细胞损伤：AIDS的治疗防治原则69第2节乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒（hepatitisBvirus，HBV）属嗜肝DNA病毒科（hepadnaviridae）。

HBV的发现源于表面抗原的研究。1963年Blumberg首先在澳大利亚土著人血清中发现一种新抗原，称为澳大利亚抗原（Australiaantigen）；直至1968年确定这种抗原与血清型肝炎密切相关，称为肝炎相关抗原（hepatitisassociatedantigen，HAA）；1970年D.S.Dane在肝炎患者血清中发现具有传染性的颗粒，即Dane颗粒（Dane'sparticle）。从而HBV被确认。

HBV是乙型肝炎病原体，主要经输血、注射、性行为和母婴传播。起病徐缓，部分患者可转为慢性，少数还可导致肝硬化和肝癌。第2节乙型肝炎病毒70形态与结构

完整的HBV颗粒亦称Dane颗粒，直径为42nm，具有双层核壳结构：核心颗粒：直径为28nm。颗粒内部：DNA和DNA多聚酶。颗粒表面（内衣壳）：含有HBcAg和HBeAg。外壳（包膜）：厚7nm。脂质双层：含有HBsAg、PHSAr和PreSAg

蛋白质生物学性状形态与结构

生物学性状71

①小球形颗粒，直径22nm；②管形颗粒，直径22nm，长度在50～700nm之间；③大球形颗粒，即Dane颗粒，直径42nm。生物学性状形态与结构

①小球形颗粒，直径22nm；生物学性状形态与结构72HBV基因结构及复制

HBV基因结构

HBVDNA是由长链L(负链)和短链S(正链)组成的不完全双链环状DNA(cccDNA)，短链的长度相当于长链的50%～85%。

HBVDNA长链载有病毒蛋白质的全部密码，有4个开放读码框架(ORF)，分别称为S、C、P和X区。生物学性状HBV基因结构及复制

HBV基因结构生物学性状73HBV基因结构S区基因：包括S基因、PreS1与PreS2基因，分别编码HBsAg、PreS1和PreS2Ag。C区基因：编码HBcAg，还有一个PreC区可能在病毒核心和外壳的附着及结合中起作用。P区基因：最长，编码HBVDNA多聚酶、逆转录酶以及

RNaseH。X区基因：编码X蛋白，可反式激活一些细胞的癌基因及病毒的基因等，可能与肝癌的发生有关。生物学性状HBV基因结构生物学性状74HBV的复制生物学性状HBV的复制生物学性状75抗原组成

生物学性状外壳：HBsAg：是机体受HBV感染的主要标志之一。具有抗原性，能刺激机体产生保护性抗体，即抗HBs。根据HBsAg抗原性差异，HBV可分为adr、adw、ayr、

ayw等4种血清型。血清型分布有明显的地区差异，并与种族有关。如欧美主要是adr型，为A基因型；我国以

adr、ayw为多见。PreS1和PreS2：存在吸附肝细胞受体的表位；其抗原性比HBsAg更强，抗PreS1和抗PreS2通过阻断HBV与肝细胞的结合而起抗病毒作用。抗原组成生物学性状外壳：76生物学性状衣壳HBcAg：HBcAg主要定位于感染细胞核内，不易从患者血清中检出。但HBcAg也可在肝细胞膜表面表达，宿主CTL作用的主要靶抗原。

HBcAg抗原很强，能刺激机体产生抗HBc，但无中和作用。检出高效价抗HBc，特别是抗HBcIgM则表示HBV在肝内处于复制状态。HBeAg：HBeAg可作为HBV复制及血清具有传染性的标志。急性乙型肝炎进入恢复期时HBeAg消失，抗HBe阳性；但抗HBe亦见于携带者及慢性乙型肝炎血清中。抗原组成生物学性状衣壳抗原组成77易感动物和细胞培养

只有黑猩猩对HBV易感，接种后可发生与人类相似的急慢性感染。体外细胞培养尚未成功。近年来应用基因克隆技术，可使HBV基因转移给小鼠或转染细胞株。将病毒DNA导入肝癌细胞后，病毒可复制并在细胞中表达HBsAg、HBcAg和HBeAg。有此细胞株可持续地产生Dane颗粒。这些细胞培养可用于抗HBV药物的筛选、疫苗制备及HBV致病机制研究等。生物学性状易感动物和细胞培养

只有黑猩猩对HBV易感，接种后可发生78抵抗力

HBV对理化因素的抵抗力相当强：对低温、干燥、紫外线、醚、氯仿、酚等均有抵抗性。高压灭菌(121℃15min)、0.5%过氧乙酸、5%次氯酸钠、3%漂白粉液、0.2%新洁尔灭等均可使HBV失活。但应指出，HBV的感染性与HBsAg的抗原活性并非一致。如100℃10min或pH2.4处理6h均可使HBV失去感染性，但仍保持HBsAg的抗原活性。生物学性状抵抗力

HBV对理化因素的抵抗力相当强：生物学性状79传染源和传播途径

传染源急性、慢性乙肝患者及HBsAg无症状携带者均为传染源，特别是无症状的HBsAg携带者做为传染源危害性更大。致病性和免疫性传染源和传播途径致病性和免疫性80

乙型肝炎主要是经血液或注射途径传播即非胃肠道的感染(parenteralinfection)：1.血液、血制品传播：有少数HBsAg阴性、而HBVDNA阳性的血液仍可引起感染。2.医源性传播：通过注射、手术、采血、拔牙、内窥镜检查、预防接种、针刺、纹身、各种医疗器具、甚至工作人员的手，均可传播乙型肝炎。3.母婴传播主要是在围产期，分娩时新生儿经产道接触或吸吞入含HBV的母血、羊水、或分泌物所致，少数可由于宫内感染(＜10%)，也可通过母乳、体液或密切接触而传播。4.接触传播：日常生活中如共用牙刷、洗澡刷子、剃须刀等可引起HBV感染。通过唾液传播的可能性也应受到重视。性交，尤其男性同性恋亦可传播HBV。因此，在西方国家将乙肝列为性传播疾病(STD)之一。尿液、鼻液、汗液和粪-口传播的可能性很小。致病性和免疫性传播途径乙型肝炎主要是经血液或注射途径传播即非胃肠道的感染81致病机制

乙型肝炎的临床表现呈多样性，可表现为无症状病毒携带者、急性肝炎、慢性肝炎及重症肝炎等。

HBV的致病机制，除了HBV对肝细胞直接损害外，主要是通过宿主的免疫应答引起肝细胞的病理改变的临床表现。

致病性和免疫性致病机制致病性和免疫性821．细胞介导的免疫病理损伤

2．体液免疫所致的免疫损伤

3．自身免疫所致的损伤

致病性和免疫性1．细胞介导的免疫病理损伤致病性和免疫性83免疫性

体液免疫：抗HBs：中和体液中HBV，使其失去感染性。抗PreS2：封闭病毒与肝细胞表面的PHSA受体，阻止病毒吸附于肝细胞。抗Hbe：可通过与肝细胞表面HBeAg结合后，通过补体介导而参与破坏病毒感染的肝细胞。

细胞免疫：主要依靠CTL。CTL对HBV感染的肝细胞(靶细胞)有直接杀伤作用。据认为，针对HBcAg的CTL在清除HBV感染的靶细胞中有较重要的作用。致病性和免疫性NT抗体免疫性

体液免疫：致病性和免疫性NT抗体84

HBV与原发性肝癌

HBV感染与原发性肝癌的发生有密切关系，其依据是：①经流行病学调查表明，乙型肝炎患者及HBsAg携带者的原发性肝癌发生率明显高于未感染人群（危险性高217倍）；②用与HBV分子生物学相似的土拨鼠肝炎病毒(WHV)可诱发土拨鼠原发性肝癌。而未感染鼠则无一只发生肝癌；③用HBVDNA探