中药标准物质在中药质量控制中的应用广州XXXX

中药标准物质在中药质量控制中的应用马双成中国食品药品检定研究院中药民族药检定所主要内容✏

一、概述✏二、国外中药标准物质的研制和管理概况✏三、中国中药标准物质的研制和管理概况✏四、中药对照物质的选择原则✏五、中药对照物质的技术要求✏六、中药对照物质的替代研究✏七、中药对照物质的应用✏八、展望一、概述药品标准物质定义：药品标准物质是指供药品标准中物理和化学测试及生物方法试验用，具有确定特性量值，用于校准设备、评价测量方法或者给供试药品赋值的材料或物质。药品标准物质分类：标准品，系指含有单一成分或混合组分，用于生物检定、抗生素或生化药品中效价、毒性或含量测定的国家药品标准物质。其生物学活性以国际单位（IU）、单位（U）或以重量单位（g，mg，μg）表示。对照品，系指含有单一成分、组合成分或混合组分，用于化学药品、抗生素、部分生化药品、药用辅料、中药材（含饮片）、提取物、中成药、生物制品（理化测定）等检验及仪器校准用的国家药品标准物质。对照提取物，系指经提取制备，含有多种主要有效成分或指标性成分，用于药材（含饮片）、提取物、中成药等鉴别或含量测定用的国家药品标准物质。对照药材，系指中药材粉末，用于药材（含饮片）、提取物、中成药等鉴别用的国家药品标准物质。参考品，系指用于微生物（或其产物）的定性鉴定或疾病诊断的生物试剂、生物材料或特异性抗血清；或指用于定量检测某些制品的生物效价的参考物质，如用于麻疹活疫苗滴度或类毒素絮状单位测定的国家药品标准物质，其效价以特定活性单位表示。药品标准物质的分类药品标准物质的建立药品标准物质的建立包括确定品种、获取候选药品标准物质、确定标定方案、分析标定、审核批准和分包装。1、品种的确定除另有规定外，根据国家药品标准制修订提出的使用要求（品种、用途），确定需要制备的品种。2、候选药品标准物质的获取候选标准品、对照品及参考品应从正常工艺生产的原料中选取一批质量满意的产品或从中药材（含饮片）中提取获得。候选对照提取物应从基原明确的中药材（含饮片）或其它动植物中提取获得。候选对照药材应从种、属来源明确的中药材获得。药品标准物质的建立3、药品标准物质的标定药品标准物质的标定须经3个以上有药品监督管理部门认可的实验室协作进行。参加单位应采用统一的设计方案、统一的方法和统一的记录格式，标定结果须经统计学处理（至少需要5次独立的有效结果）。一般采用各协作单位结果的均值表示。药品标准物质的标定包括性质鉴定、结构鉴定、纯度分析、量值确定和稳定性考察等。4、分装、包装药品标准物质的分包装条件参照药品GMP要求执行，主要控制分包装环境的温度、湿度、光照及与安全性有关的因素等。药品标准物质采用单剂量包装形式以保证使用的可靠性。包装容器所使用的材料应保证药品标准物质质量。药品标准物质的使用药品标准物质供执行法定药品标准使用，包括校准设备、评价测量方法或者对供试药品进行鉴别或赋值等。药品标准物质所赋量值只在规定的用途中使用有效。如果作为其它目的使用，其适用性由使用者自行决定。药品标准物质单元包装仅限一次使用。药品标准物质溶液原则上临用前现配，不推荐保存标准物质溶液，除非使用者证明其适用性。药品标准物质的稳定性监测中检院建立常规的质量保障体系，对发行的药品标准物质采用定期的监测，确保药品标准物质正常储存的质量。如果发现药品标准物质发生质量问题，及时公示停止该批号标准物质的使用。

国家药品标准物根据测定方法和使用对象不同，可分为生物标准物质和化学标准物质，由于使用要求不同，又把上述两类分为不同级别的标准物质，即国际的、国家的及工作用三级标准物质。化学标准物质根据不同用途分为：含量测定对照物质（包括内标物）、纯度或杂质检查用对照物质、鉴别用对照物质和校正仪器用对照物质。

一、概述

国家药品标准物质的基本要求：稳定性均匀性准确性一、概述标准准物物质质的的基基本本要要求求1、稳稳定定性性稳定定性性是是指指标标准准物物质质在在规规定定的的时时间间和和环环境境条条件件下下，，其其特性性量量值值保保持持在在规规定定范范围围内内的能力力。影响稳定性性的因因素有有：光、温温度、、湿度度等物理理因素素；分分解、、化合合等化化学因因素和和细菌菌作用用等生生物因因素。。稳定---表现在：固固体物物质不不风化化、不不吸水水、不不分解解、不不聚合合；液液体物物质不不产生生沉淀淀、不不吸水水、不不发霉霉；气气体和和液体体物质质对容容器内内壁、、瓶塞塞不腐腐蚀、、不吸吸附等等等。。（物物理和和化学学变化化）2、均匀匀性均匀性性是物物质的的一种种或几几种特特性具具有相相同组组分或或相同同结构构的状状态。。所谓均均匀性性指的的是物物质各各部分分之间间特性性量值值的差差异不不能用用实验验方法法检测测出来来。这这样，，均匀匀性的的实际际概念念就包包括物物质本本身的的特性性和所所用的的计量量方法法的某某些参参数，，例如如计量量方法法的精精密度度(标准偏偏差)和试样样的大大小(实验取取样量量)等。标准物物质的的均匀匀性是是对给给定的的取样样量而而言。。标准物物质的的基本本要求求标准物物质的的基本本要求求3、准确确性准确性性是指指标准准物质质具有有准确确计量量的特特性。。当用计计量方方法确确定标标准值值时，，标准准值是是被鉴鉴定特特性量量之真真值的的最佳佳估计计。国家药药品标标准物物质的的作用用新药研研发药品生生产药品贸贸易药品监监管实验室室质量量保证证体系系一、概概述在药品品生产产中的的作用用现代化化的生生产过过程从从原、辅辅料的的检验验、生产过过程控控制到产品质质量检检验都离不不开分分析检检测工工作，，往往往需要要使用用药品品标准准物质质。药物生生产设设备及及分析析仪器器是否否处于于良好好的质质量控控制状状态，，需要要进行行验证证以及及期间间核查查，也也往往往需要要使用用药品品标准准物质质。在药品品贸易易中的的作用用药品的的竞争争首先先是产产品质质量的的竞争争质量的的竞争争一部部分要要落实实到产产品标标准——技术壁壁垒标准物物质是是质量量标准准的有有机组组成部部分标准物物质保保证产产品质质量与与检验验结果果的一一致性性，减减少贸贸易纷纷争。。在药品品监管管中的的作用用缺少某某种药药品标标准物物质,影响药药品检检验和和市场场监管管制伪、、掺假假、中中药中中掺化化学药药在实验验室质质量保保证体体系中中的作作用为了保保证检检测实实验室室始终终处于于良好好状态态，需需要对对检测测体系系和检检测方方法进进行验验证或或期间间核查查，最最简单单有效效的方方法就就是可可以采用标标准物物质进进行考考察。采用标准物物质做做长期期质量量控制制图，以监监视其其检验验能力力的长长期有有效性性，或或者用用标准准物质质评价价测量量结果果的准准确度度。在实验验室认认证工工作中中检查查、询询问、、了解解实验验室的的组织织机构构、仪仪器设设备、、工作作环境境、人人员情情况和和管理理制度度是一一方面面，另另一方方面，，还应应进行行实验验检测测结果果的考考核，，选择择标准准物质质最为为准确确可靠靠。中药对对照物物质研究始始于1985年，根根据《中国药药典》及卫生生部、、国家家食品品药品品监督督管理理局药药品标标准（（中药药成方方制剂剂标准准，新新药转转正标标准，，中药药保健健药品品转国国家药药品标标准，，地方方标准准升国国家药药品标标准等等）收收载使使用对对照物物质的的品种种情况况，已建立立了中中药化化学对对照品品585种，对对照药药材720种，供中药药材及及中成成药检检验中中使用用，同同时也也为中中药新新药研研制、、中药药科研研提供供了大大量对对照物物质，，取得得了显显著的的社会会效益益。年版中药化学对照品对照药材对照提取物1985601601990100390199514394020002071520200528221811201046336916历版《中国药药典》收载中中药标标准物物质中药对对照物物质✏中药化化学对对照品品（包包括内内标物物）✏对照提提取物物✏对照药药材中药对对照物物质是国家家颁布布的一一种计计量标标准，，它必必须具具备：：✏材料均均匀（（同质质性均均匀性性）✏性能稳稳定✏准确定定值（（溯源源性））✏合法程程序中药对对照物物质中药化化学对对照品品是指中中国药药典及及卫生生部、、国家家食品品药品品监督督管理理局药药品标标准（（中药药成方方制剂剂标准准，新新药转转正标标准，，中药药保健健药品品转国国家药药品标标准，，地方方标准准升国国家药药品标标准等等）收收载使使用的的实物对对照，属于于化学对对照品品的范畴畴。中药对对照物物质（1）鉴别别用用中中药药化化学学对对照照品品，主主要要用用于于中中药药材材、、中中药药饮饮片片、、中中药药提提取取物物及及中中成成药药的的薄层层色色谱谱、、气气相相色色谱谱等色色谱谱法法鉴鉴别别项项目目，，纯度度应达达到到95%以上上；；（2）含量量测测定定用用中中药药化化学学对对照照品品，用用于于中中药药材材、、中中药药饮饮片片、、中中药药提提取取物物及及中中成成药药的的紫紫外外分分光光光光度度法法、、比比色色法法、、薄薄层层-紫外外分分光光光光度度法法、、薄薄层层扫扫描描法法、、高高效效液液相相色色谱谱法法、、气气相相色色谱谱法法等等测测定定用用，，纯纯度度要要求求98%以上上。用用于于单体体成成分分原原料料及及其其制制剂剂的的含含量量测测定定对照照品品，，则则视视同同化化学学药药品品对对照照物物质质对对待待，，纯纯度度要要求求在在99.5%以上上，其其中中也也包包括括色色谱谱法法中中的的内内标标物物质质；；根据据用用途途分分类类：：4类中药药对对照照物物质质（3）杂质质检检查查用用中中药药化化学学对对照照品品，用用于于中中药药材材、、中中药药饮饮片片、、中中药药提提取取物物及及中中成成药药的的薄薄层层色色谱谱、、气气相相色色谱谱等等色色谱谱法法检查查杂杂质质、、区区分分药药材材品品种种或或毒毒性性成成分分的的限限量量检检查查等。。根根据据使使用用目目的的应应分别别符符合合鉴鉴别别用用或或含含量量测测定定用对对照照品品的的纯纯度度要要求求；；（4）提取取物物和和挥挥发发油油对对照照物物，这这是是一一类类非非单单体体成成分分对对照照物物，，用用于于薄薄层层色色谱谱或或其其他他色色谱谱鉴鉴别别用用，，要求求其其主主要要成成分分比比例例相相对对固固定定。。根据据用用途途分分类类：：4类中药药对对照照物物质质中药药化化学学对对照照品品的的特点点：：（1）中药药化化学学对对照照品品的原原料料绝绝大大部部分分由由天天然然动动、、植植物物中中提提取取得得到到。。由由于于天天然然成成分分复复杂杂，，含含量量相相对对较较低低，，部部分分单单体体稳稳定定性性差差，，提取取得到到一一定定数数量量的的单单体体成成分分有相当当难度度；（2）中中药药化化学学对对照照品品，，无相相应应的的国国际际对对照照物物质质和和系系统统的的文文献献资资料料，只只能能利利用用散散在在的的原原始始文文献献资资料料。。因因此此，，中中药药化化学学对对照照品品的的制制备备除除遵循循一般般化学学对对照照品品制制备备的的原原则则外，，还要要对对原原料料的的选选择择、、原原料料的的提提取取精精制制技技术术、、结结构构鉴鉴定定及及纯纯度度分分析析方方法法等等进进行行认认真真的的研研究究，以以保保证证中中药药化化学学对对照照品品的的质质量量要要求求和和品品种种增增长长的的需需求求。。中药对对照物物质对照药药材系指经经鉴定、、标化化合格格后，用用于鉴别原原料药药及其其制剂剂的对照照物质质（包包括原原药材材及其其粉末末），，它作作为与与中药药化学学对照照物质质并行行的对对照物物质，，应用用于中中药材材或中中成药药的薄薄层鉴鉴别。。中药对对照物物质对照药药材是国家家药品品标准准物质质的一一个重重要组组成部部分，，药品品标准准中规规定使使用的的对照照药材材必须须经过过严格格的标标定。。中国食食品药药品检检定研研究院院负责中中药对对照药药材原原料的的采集、、标定定、制制备、、分发发、贮贮藏及及保管管等工作作。中药对对照物物质药典管理机构国际药典（Ph.Int）WHO委托欧洲药事管理局（EDQM）美国药典（USP）美国药典会（USP）欧洲药典（Ph.Eur）欧洲药事管理局（EDQM）日本药典（JP）日本公定书协会（PMRJ）英国药典（BP）英国药典会实验室（BPCL）二、国国外中中药标准物物质的研制制和管管理概概况欧洲药药典附录5.12<referencestandards>中定义义标准物物质广义上上包含含对照品品、标标准品品和对对照谱谱图，还可可分为为一级级对照照物质质和二二级对对照物物质，，参考考物质质和有有证参参考物物质。。该导导则规规定了了各种种不同同用途途的标标准物物质的的制备备、生生产、、标签签、储储存和和销售售、再再检测测程序序。美国药药典在generalchapter<11>中对药药品标标准物物质进进行了了规定定。它它将对对照物物质仅仅分为为USPRS和USPAS（主要要满足足非药药典内内用途途）两两大类类。并并规定定了标标准物物质的的批号号制度度及正正确使使用方方法等等。二、国国外中中药标准物物质的研制制和管管理概概况美国药药典的的标准准物质质开发发流程程至少三三家实实验室室参与与标定定交由美美国USP标准物物质委委员会会审核核确定定持续的的适用用性监监测二、国国外中中药标准物物质的研制制和管管理概概况欧洲药药典：：最新的的EP7.0收载了了162个中药药材标标准和和75个中药药制剂剂标准准。欧洲洲药典典各论论中收收载的的中药药标准准一般般包括括三个个方面面：鉴鉴别（（显微微鉴别别和薄薄层色色谱鉴鉴别））、检检查（（重金金属、、农残残、水水分、、灰分分、可可提取取物等等）、、含量量测定定（活活性成成分含含量测测定））。目前欧欧洲药药典对对中药药质量量标准准非常常感兴兴趣，，EDQM目前对对中药药标准准物质质候选选物的的需求求很大大。美国USP提供20多种对对照提提取物物，同同时也也在开开发新新的植植物药药标准准物质质。二、国国外中中药标准物物质的研制制和管管理概概况EDQM特别强强调含量测测定用用标准准物质质的赋赋值必必须是是和使使用该该标准准物质质的药药典方方法相相关联联，他们的标标准物质赋赋值过程如如下：1）EDQM准备试验方方案并首先先对标准物物质候选物物进行分析析测定；2）试验方案案和候选物物样品发往往协作标定定实验室（（一般是5个实验室））；3）各协作标标定实验室室按照试验验方案进行行分析测定定并反馈试试验数据；；4）EDQM实验室对各各协作标定定实验室的的试验数据据进行评估估；5）确定赋值值并报告给给专家委员员会；6）专家委员员会批准赋赋值。二、国外中中药标准物质的研制和管管理概况除了EDQM自己的实验验室之外，，他们的协作标定实实验室一般来自欧洲官方药药品质量控控制实验室室网，在协作标标定研究的的时候，一一般会邀请药品品生产企业业的质控实实验室参加。各协协作标定实实验室在按按照试验方方案标定完完毕后，EDQM的实验室还还会采用与与标定方法法不同原理理的分析方方法对候选选物再进行行分析检测测以验证协协作标定的的试验结果果，通常采用的的分析测试试方法包括括：示差量量热扫描（（测纯度））、非水滴滴定、定量量核磁和元元素分析。。二、国外中中药标准物质的研制和管管理概况药典要求温温度EDQM采用的温度度室温5℃2－8℃－20℃－15℃以下－－20℃以下－20℃－80℃（如果可行行）－50℃－80℃－80℃液氮二、国外中中药标准物质的研制和管管理概况标准物质主主要的封装装设备包括括天平、手手套箱和封封装机（液液体标准物物质），对于有特殊殊要求的标标注物质（比如引湿湿性强的物物质、有毒毒物质、易易氧化物质质）分别采采用控制湿度、、负压以及及充氩气环环境进行封装，，对于生物负载敏敏感的物质质还控制和检测测封装环境境的微生物物条件。所有的分分装仪器都都经过了DQ,IQ,OQ和PQ确认。为了了保证用户户在使用时时能够取出出标示重量量的标准物物质，EDQM的标准物质质在分装的的时候都按按标示装量量的10%超限分装。二、国外中中药标准物质的研制和管管理概况EDQM建立了一套套完整的质质量管理体体系，包括括质量方针针、质量手手册、程序序文件和SOP。目前EDQM遵循ISO9001质量管理体体系，具体体包括：ISO17025:检测和校准准实验室能能力；ISO导则34：标准物质质生产者能能力；ISO17034:能力测试验验证。化学试剂方方面EDQM重点强调的工作是有害试剂的的分类、小包装试剂剂的标签以及逐步淘汰使使用危害性性高的化学学试剂。二、国外中中药标准物质的研制和管管理概况二、国外中中药标准物质的研制和管管理概况LGC：英国政府府化学家实实验室分为四大部部分：司法法鉴定实验验室（Forensics）、基因组组分析（Genomics）、科学与与技术（Science&Technology）和标准（Standards），主要业务包包括：提供供实验室检检测服务、、计量标准准、提供标标准物质和和组织实验验室能力验验证。二、国外中中药标准物质的研制和管管理概况LGC号称是世界上最大大的标准物物质提供单单位，他们目前前能够提供供超过100，000种标准物质质，这些标标准物质种种类齐全，，包括：食食品、化妆妆品、医疗疗器械、环环境检测、、临床检测测、药品、、生物制品品等。与其其他国家药药典标准物物质不同是是，LGC提供的药品品标准物质质主要是杂杂质标准物物质，目前大概概能够提供供2,200种。1.国家药品标标准物质体体系不断完完善2.国家药品标标准物质的的质量保证证3.国家药品标标准物质的的供应保障障三、中国中中药标准物质的研制和管管理概况药品标准物物质质量体体系研制、制备备计划的制制定(1)首批研制项项目申请及及可行性审审批原料选择与与检验(1)原料的审核核（2）原料主要要检验指标标及检验结结果分装(1)分装环境的的控制（2）分装品种种、规格、、数量作业业指导书标定、定值值(1)抽取代表性性样本（2）仪器设备备保持良好好工作状态态（3）标定依据据、标定方方法、数据据处理、定定值原则（4）标准物质质研制报告告稳定性核查查研制报告的的审批包装、入库库保存供应用户信息反反馈(1)不同时间间间隔，不稳稳定特性量量值的核查查(1)研制报告的的审评程序序（2）研制报告告的审批(1)研制报告审审批后，再再进行包装装、入库（2）确保适当当的保存设设施及条件件(1)标准物质服服务中心对对外供应（2）经认可的的二级供应应网络(1)收集用户对对质量、品品种、服务务的信息（2）采取纠正正措施，并并向管理层层汇报2.药品标准物物质的质量量保证化学对照照品标定定程序与与标定项项目基本信息理化检测结构确证定值稳定性实验汇总结论结构式、分子式、CAS号原料来源、数量、分装各国药典收载情况标定拟采用的标准方法TLC纯度分析HPLC纯度分析干燥失重水分炽灼残渣熔点比旋度TGA测定残留溶剂引湿性试验……UV、IR、MS、NMR综合上述结果，作出可否满足药品标准用途的结论质量平衡法（协作标定）外标法容量法DSC等期间核查要求的测定项目技术要求求首批对照照品标定定项目：：UVIRNMRMS元素分析析X－射线衍衍射官能团分分析2.药品标准准物质的的质量保保证HPLC(DAD)GCTLCCEDSC相溶度法法UV、IR、NMR滴定旋光度水分、残残留溶媒媒、干燥燥失重2.药品标准准物质的的质量保保证TLC薄层纯度检查薄层板：：Si-G展开剂：：甲苯-醋酸乙酯酯-甲酸(9:4:1)二氯甲烷烷-甲醇(20:1)显色剂：：UV366nm下检视

512550100μg512550100μg201005201005炽灼残渣渣测定1．炽灼温度（℃）6002．放冷至室温时间称重（g）炽灼时间（小时）3．恒重空坩埚（直至恒重）第一次24.599765第二次24.5997614．供试品称重（g）0.104555．恒重残渣及坩埚（直至恒重）第一次24.599825第二次24.599861炽灼残渣（%）0.10水分（卡卡氏）测测定称样量（g）0.052380.049250.03515水分（％）0.39150.42400.3895平均（％）0.4017RSD%4.83残留溶剂剂测定称样量（g）0.21450.2376溶剂（％）未检出未检出平均（％）RSD%定值值1、外标法法：以110837-201005批为对照照测定，，含量值值为99.0%2、质量平衡衡法：含量=“HPLC1%自身对照照纯度””×（（1-水分%-残渣%）=99.91%×(1-0.40%-0.10%)=99.4%（本批样样品含水水以0.40%计，炽灼灼残渣以以0.10%计）质量平衡衡法通式式含量=“色谱纯度度”×（（1-水分%-残渣%-残留溶剂剂%）色谱纯度度为适当当色谱条条件下（（HPLC、GC）自身对对照纯度（根据品品种情况况可采取取1%~10%自身对照照纯度））。首批药品品标准物物质的建建立原则则✏新建标准准物质必必须考虑虑其制备备、标定定、保存存和分发发使用的的可能性性✏专属性强强、稳定定性强、、可大量量制备✏质量控制制标准中中所收载载的药品品标准物物质要具具有可行行性、适适用性。✏质量控制制标准要要有可靠靠性首批药品品标准物物质的建建立原则则化学对照照品的质质量要求求用途USPWHOEDQM

中国含量测定≥99.5％≥99.5％合格原料≥99.5％或合格原料限度检查≥98％≥90%≥90.0%≥90%（TLC）≥95%（LC等）系统适用性试验根据具体情况根据具体情况合格原料或根据具体情况合格原料或根据具体情况鉴别根据具体情况合格原料合格原料合格原料没有标示示含量的的按100.0％计有标示含含量的，，按标示示值使用用。不需干燥燥处理的的，标示值即即为对照照品的量量值。需要干燥燥处理的的，标示值为为干燥后后对照品品的量值值。测定水分分后使用用的，扣扣除水分分后使用用。鉴别、杂杂质对照照品一般般不给出出标示值值。2.药品标准准物质的的质量保保证药品标准准物质的的定值方方式用高准确确度的绝绝对或权权威测量量方法定定值用两种以以上不同同原理的的已知准准确度的的可靠方方法定值值多个实验验室合作作定值使用一种种高精密密度方法法与已知知的一级级标准物物质直接接比较的的方法2.药品标准准物质的的质量保保证质量平衡法（100.0–水分–残渣–溶剂）x色谱纯度100纯度（%）=化学对照照品定值值影响化学学对照品品定值准准确性的的因素：：HPLC纯度水分值炽灼残渣渣残留溶剂剂引湿性稳定性监监测化学对照品的赋值原则WHOUSPEP中国质量平衡法质量平衡法质量平衡法质量平衡法含量USPEPWHO中国质量平衡法质量平衡法质量平衡法质量平衡法EP：X(%)=(100.0––水分/溶剂)x色谱纯度度/100冻干：硫硫酸长春春地辛5.11mg/瓶（根根据原料料纯度、、水分））WHO：X（%）=（100.0––水分–残渣）x色谱纯度度/100USP：X(%)=(100.0––水分/溶剂)x色谱纯度度/1002.药品标准准物质的的质量保保证协作标定定——《药品标准准物质技技术规范范》《药品标准准物质协协作标定定技术要要求》药品标准准物质量量值测定定选择的的定值方法法应考虑虑到其相相关药品品标准及及预期的的用途，可采用用多个实实验室协协作标定定。参加协作作标定的的实验室室应具有检检测药品品标准物物质的必必备条件件，每个实实验室采采用统一的测测量方法法。协作实实验室的的数目或或独立定定值组数数应符合统计计学的要求，，负责定定值的实实验室必必须对其其他参加加实验室室进行质质量控制制和制定定明确的的指导原原则。2.药品标准准物质的的质量保保证2.药品标准准物质的的质量保保证（1）协作标标定工作作开展前前需提交交《药品标准准物质协协作标定定设计方方案》。包括：：样品名名称、申申请科室室、协作作标定工工作的必必要性、、拟参加加实验室室的要求求和数量量、日程程安排、、试验方方法、数数据的统统计处理理分析原原理、协协作标定定费用预预算等内内容。2.药品标准准物质的的质量保保证（2）协作标标定设计计方案审审批通过过后，为为确保参参加的实实验室协协作标定定工作顺顺利实施施，组织织者应制制定协作标定定作业指指导书主要内容容包括：：样品接接收信息息反馈；；确定检检测标准准与方法法及实验验标定SOP；制定实实验数据据记录表表。2.药品标准准物质的的质量保保证（3）协作标标定的组组织者应应及时向向标准物物质管理理处上报协作作标定结结果报告告，包括：：各实验验室数据据及统计计处理过过程与结结果、协协作标定定结果分分析和后后续处理理措施等等有关事事项。（4）协作标标定工作作完成后后，组织织者应当当向各实实验室通通报协作作标定的的结果、、技术分分析与技技术建议议。2.药品标准准物质的的质量保保证协作标定定的组织织者指定定参加的的实验室室用统一一确认有有效的实实验方案案。（5）通常协协作标定定的实验室的的数目为为3-6个，随所需需测定程程序的复复杂程度度而变化化。对于化学学对照品品的协作作标定，，参加的的实验室室数目一一般为3个。对于于生物标标准物质质的协作作标定，，参加的的实验室室数目不不少于3个。（6）对于化学对照照品的协作标标定，通通常采用用质量平衡衡原理进行定值，考虑到到量值的的延续性性，可组织1-2个实验室室进行外外标法测测定，外标法的的测定结结果仅用用于对质质量平衡衡原理定定值结果果的辅佐佐证明。（7）化学对对照品的的协作标标定主要要开展如如下项目目：干燥失重重测定、、水分测测定、含含量测定定（HPLC、GC、UV）、溶出出度测定定等。均匀性中华人民民共和国国国家标标准-标准样品品工作导导则GB/T15000.3-2008/ISOGuide35:2006。稳定性1、稳定性性影响因因素试验验-光照、温温度、湿湿度和氧氧化。2、样品期期间核查查。2.药品标准准物质的的质量保保证3.药品标准准物质的的供应保保障可查询得得到库存存状态、、批号、、价格等等信息面向社社会提提供原原料备备案、、标准准物质质订购购服务务工作作3.药品标标准物物质的的供应应保障障2010年版药药典所所需标标准物物质共共计1754种2010年版药药典一一部：：中药化化学对对照品品：463中药对对照药药材：：369848对照提提取物物：162010年版药药典二二部：：1754标准品品：36对照品品：8709063.药品标标准物物质的的供应应保障障四、中中药对对照物物质的的选择择原则则✏新建标标准物物质必必须考考虑其其制备备、标标定、、保存存和分分发使使用的的可能能性✏专属性性强、、稳定定性强强、可可大量量制备备✏质量控控制标标准中中所采采用的的中药药化学学对照照物质质要有有可靠靠性✏质量控控制标标准要要有可可靠性性四、中中药对对照物物质的的选择择原则则Activecomponentsofoneherb;2.Specificitycomponents,characteristiccomponentormarkedcomponentsofoneherb;Maincomponentofoneherb;Easytoobtain,notthermolabile;5.Othercomponentsofoneherb;四、中中药对对照物物质的的选择择原则则对照药药材应有学名鉴鉴定，使用用对照照药材材时，，要注注意与与研制制的新新制剂剂中原原料药药材的的一致致性，，尤其其是多多品种种来源源的中中药材材。中药的的伪品品多为为近缘缘植物物，在制订订质量量标准准时，，最好好进行行正、、伪品品对比比，选出出有明明显区区别的的薄层层色谱谱展开开系统统，必必要时时增加加伪品品的检检查项项目。。四、中中药对对照物物质的的选择择原则则五、中中药对对照物物质的的技术术要求求中药化化学对对照品品定值：：①纯度分分析（TLC与HPLC同时测测定））、②②结构鉴鉴定（包括括紫外外光谱谱、红红外光光谱、、质谱谱、氢氢谱、、碳谱谱）、、③理化分分析（包括括熔点点、比比旋度度、热热分析析、引引湿性性、炽炽灼残残渣、、干燥燥失重重与水水分等等项））、④④定值项项（质量量平衡衡法、、外标标法、、容量量分析析法、、差示示扫描描量热热法等等）。。对于首次研研制的品种种上述述测定定项均为必必做项项，中药药化学学对照照品的的定值值主要采采用质质量平平衡法法，即一一个化化学对对照品品的主主成分分、水水分、、有机机溶剂剂、无无机杂杂质、、有机机杂质质含量量的总总和应应为100.0%，其定定值公公式为为：含含量（（%）=（100.0–水分–有机溶溶剂-无机杂杂质））×纯度%。为保保证量量值的的准确确性，，同时时采用用“④④定值值项””中的的其他他方法法对质质量平平衡法法的量量值进进行辅辅佐证证明，，并应应广泛泛开展展协作作标定定工作作。五、中中药对对照物物质的的技术术要求求对照药药材的标定定项目目主要要包括括：①品种的的确定定：中药药对照照药材材品种种是依依据国国家标标准中中薄层层鉴别别项下下规定定使用用的药药材品品种而而确定定的,各品种种均必必须按按规定定鉴定定植物物种,以植物物种确确定发发放的的品种种；②原料的的采集集与收收集：对照照药材材原料料一般般采用用主流商商品的的道地地药材材,符合GAP规范要要求的栽培培的优优质中中药材材；③生药学学鉴定定：对药药材进进行性状、、组织织及粉粉末显显微鉴鉴定,确定药药材的的基原原,须符合合标准准规定定。④检查项项：按标标准规规定,除去杂杂质；；⑤薄层测测定项项：首先先选择择标准中中规定定的试试验方方法,其次再再根据据药材材的成成分以以不同同于标标准的的提取取方法法或展展开条条件进进行试试验。。被检检药材材必须须检出出与对对照药药材或或标本本具有有一致致的色色谱行行为,主要化化学成成分若若有已已知的的化学学对照照品，，则应应与化化学对对照品品具一一致的的色谱谱斑点点。⑥含量量测测定定项项：按按标标准准规规定定进进行行含含量量测测定定,应符符合合标标准准规规定定。。五、、中中药药对对照照物物质质的的技技术术要要求求候选选对对照照提提取取物物的制制备备要要求求：：候候选选对对照照提提取取物物的的制制备备应应对对所所需需的的原料料、、制制备备工工艺艺、、工工艺艺参参数数等等及及得得率率进行行详详细细研研究究。。以植、、动动物物为原原料料提提取取、、纯纯化化的的对对照照提提取取物物，，应应对对原原料料的的基原原（包包括括植植、、动动物物的的科科名名、、拉拉丁丁学学名名和和药药用用部部位位））、、投料料量量、、粉粉碎碎、、提提取取的的条条件件（包包括括溶溶剂剂、、用用量量、、温温度度、、次次数数等等））、、纯化化的的条条件件（包包括括萃萃取取的的溶溶剂剂及及其其用用量量、、色色谱谱的的方方法法、、填填料料、、洗洗脱脱剂剂及及其其用用量量））、、干燥燥的的条条件件等工工艺艺参参数数及及得得率率进进行行详详细细研研究究。。五、、中中药药对对照照物物质质的的技技术术要要求求对照照提提取取物物的标标定定要要求求：：①原原料料的的来来源源、、提提取取部部位位及及制制备备工工艺艺应应明明确确；；②主成成分分比比例例及及含含量量相对对固固定定（（TLC、HPLC、GC）；；③理化化特特征征换换批批间间应应一一致致（溶溶解解度度、、相相对对密密度度、、折折光光率率、、旋旋光光度度等等））。。五、、中中药药对对照照物物质质的的技技术术要要求求对照照提提取取物物的标标定定要要求求：：一般般采采用用色色谱谱方方法法进进行行鉴鉴别别，，首首选选TLC鉴别别。。对于于TLC分离离效效果果差差的的对对照照提提取取物物，，可可考考虑虑采采用用HPLC鉴别别。。对于于挥发发油油或或主主要要含含挥挥发发性性成成分分的提提取取物物，，可可采采用用GC进行行鉴鉴别别。。采用用TLC进行行鉴鉴别别，，应应对对供供试试品品溶溶液液的的制制备备方方法法、、薄薄层层板板、、展展开开系系统统、、检检测测方方法法、、点点样样量量等等进进行行比比较较、、考考察察，，建建立立分分离离度度好好、、检检测测灵灵敏敏度度高高的的TLC方法法。。采用用HPLC进行行鉴鉴别别，，应应对对供供试试品品溶溶液液的的制制备备方方法法、、色色谱谱柱柱、、流流动动相相、、柱柱温温、、流流速速、、进进样样量量、、检检测测方方法法等等进进行行考考察察。。采采用用GC进行行鉴鉴别别，，应应对对供供试试品品溶溶液液的的制制备备方方法法、、色色谱谱柱柱、、进进样样口口温温度度、、柱柱温温、、载载气气流流速速、、检检测测器器温温度度、、进进样样量量等等进进行行考考察察。。五、、中中药药对对照照物物质质的的技技术术要要求求对照照提提取取物物的标标定定要要求求：：供指指纹纹图图谱谱或或特特征征图图谱谱检检测测用用对对照照提提取取物物应应建建立立指指纹纹图图谱谱或或特特征征图图谱谱检检测测标标准准。采采用用HPLC或GC方法法建建立立指指纹纹图图谱谱或或特特征征图图谱谱，，并并对化合物物结构明明确的色色谱峰进行指认认。对照提取取物指纹纹图谱与与首批对对照提取取物指纹纹图谱比比较，其其相似度度应大于于0.95。为了确确保指纹纹图谱的的重现性性，一般般选择化化学对照照品或内内标物作作为参照照物。采采用HPLC方法建立立指纹图图谱或特特征图谱谱，应对对参照物溶溶液的制制备方法法、供试试品溶液液的制备备方法、、色谱柱柱、流动动相、柱柱温、流流速、进进样量、、检测方方法等进行考考察，并对结构构明确的的色谱峰峰进行指指认。采用GC方法建立立特征图图谱或指指纹图谱谱，应对对参照物物溶液的的制备方方法、供供试品溶溶液的制制备方法法、色谱谱柱、进进样口温温度、柱柱温、载载气流速速、检测测器温度度、进样样量等进进行考察察，并对对结构明明确的色色谱峰进进行指认认，建立立对照指指纹图谱谱。对照照提取物物指纹图图谱与对对照指纹纹图谱或或首次对对照提取取物指纹纹图谱比比较，其相似度度应大于于0.95。五、中药药对照物物质的技技术要求求对照提取取物的标定要要求：【含量测定定】用于多成成分含量量测定用用的对照照提取物物应进行行含量测测定。采用色色谱方法法测定主主要成分分的含量量。用含量测定定用化学学对照品品作对照，，测定提提取物中中相应组组分的含含量。采采用协作标定定结果的的统计值值作为标准准物质的的含量值值。应对对对照品品溶液的的制备方方法、供供试品溶溶液的制制备方法法、色谱谱条件与与系统适适用性试试验、标标准曲线线及线性性范围、、精密度度、重复复性、稳稳定性及及准确度度等进行行考察。。总可控成成分含量量不得低低于80%。六、中药药对照物物质的替替代研究究中药多成成分的复复杂性决决定了单单一成分分或指标标难以客客观评价价中药质质量,然而多指指标的质质量评价价模式,却受到中中药化学学对照品品分离难难度大、、单体不不稳定或或供应价价格高等等因素的的制约。。2010版药典增加了指纹图谱谱的质量控控制模式式,指纹图谱谱对于评评价中药药原料药药材、半半成品和和成品质质量的均均一性和和稳定性性具有重重要的意意义，但但是其属属性却是是“整体性性”和““模糊性性”。六、中药药对照物物质的替替代研究究“一测多多评”及及“替代代对照品品”模式，即即通过中中药有效效成分间间存在的的内在函数数关系和和比例关关系,仅测定1-2个成分(对照品可可以得到到者),来实现多多个成分分(没有对照照品)的同步监监控。具体思路路为：在多指标标质量评评价时,以药材中中某一典典型组分分(有对照品品供应者者)为内标,建立该组组分与其其他组分分之间的的相对校正正因子,通过校正正因子计计算其他他组分的的含量。。这种测测定一个个成分,实现对多多个成分分定量的的方法，，称为““一测多多评”。。目前该方方法的技技术适用用性和应应用的可可行性仍仍需要进进行探索索和科学学的评价价。替代对照照品法对照品替替代法：：以一一种对照照品为替替代物，，测定另另一种（（或几种种）成分分含量的的方法。。药品标准准物质面面临的挑挑战品种数量量日益增增多（包包括杂质质对照品品）部分品品种稳稳定性性差毒性极极强来源有有限制备成成本高高价格昂昂贵、、使用用不便便……替代法法？原理理在一定定的色色谱条条件下下，单单位质质量的的物质质A（替代代物））和物物质B（被替替代物物）的的响应应值的的比值值为一一恒定定值。。Aa:物质A的响应值Ab:物质B的响应值Ca:物质A的浓度Cb:物质B的浓度ABCD分类类药典““一测测多评评”II(自身多多成分分)欧洲药典中国药典对照品品替代代法研研究工工作思思路被替代代物的的性质质研究究替代物物的遴遴选分析方方法建建立校正因因子的的建立立方法比比较和和验证证物理化化学性性质、、色谱谱、质质谱信信息等等结构、、理化化性质质、色色谱特特征等等相似似、稳稳定、、经济济等影响因因素试试验、、耐用用性试试验色谱方方法、、质谱谱方法法、条条件优优化分析方方法验验证、、外标标法比比较方法的的建立立结构不不稳定定对光、、温度度、PH敏感药用植植物中中含量量低目前国国内无无对照照品价格昂昂贵检测成成本高高以大黄黄素为为替代代物测测定金金丝桃桃素类类成分分金丝桃桃素1.替代对对照品品的筛筛选大黄素素金丝桃桃素仪器：：Waters2695高效液液相色色谱仪仪;色谱柱柱：AgilentTC-C18(250mm××4.6mm，5µm);流动相相：10mmolPH4醋酸铵铵溶液液(A)-乙腈(B)梯度;流速：：1.0ml··min-1;柱温：：30℃℃;检测器器：2996PDA检测器器，检测波波长284nm;T（min）A（%）B（%）0802035298402984180205080202.分析方方法的的建立立2.分析方方法的的建立立大黄素金丝桃素伪金丝桃素贯叶金丝桃素根据替替代物物和被被替代代物的的线性性范围围，分分别吸吸取不不同浓浓度和和体积积的各各对照照品溶溶液,注入液液相色色谱仪仪，测测定峰峰面积积。按按公式式计算算被测测成分分（被被替代代物））相对对于大大黄素素（替替代物物）的的校正正因子子。3.校正因因子值值的建建立及及耐用用性试试验3.校正因因子值值的建建立及及耐用用性试试验仪器（（3种不同同类型型的HPLC仪器））色谱柱柱（5种色谱谱柱））流动相相（梯梯度、、PH）柱温(15,25,35℃℃)检测波波长（（284nm±2nm）溶液稳稳定性性（光光、热热）被替代成分校正因子RSD（%,n=20）金丝桃素1.261.5伪金丝桃素1.221.1贯叶金丝桃素5.372.03.校正因因子值值的建建立及及耐用用性试试验4.建立被被替代代成分分的定定性质谱条条件：：ESI负离子子模式式检测测：毛毛细管管电压压3kV，锥孔孔电压压60v，源温温度：：120℃℃，去溶溶剂混混度150℃℃。去溶溶剂气气（N2）流速速：300L··h-1，离子子扫描描范围围：m/z100-600;选定m/z269，503，519，535进行子子离子子扫描描。4.建立被被替代代成分分的定定性成分tRmin[M-H]-m/zUVλ/nm校正因子F大黄素23.6269222,289,440-伪金丝桃素27.0519214,285,3271.26金丝桃素33.9503216,285,3311.22贯叶金丝桃素34.95352895.37替代物物和被被替代代物分分析检检测信信息表表5.替替代代法