第11章-革兰阴性需氧杆菌课件

内容提要*第1节布氏杆菌属第2节假单胞菌属第3节伯氏菌属第4节波氏菌属第5节泰勒菌属第6节军团菌属第7节柯克斯体属第8节弗朗西斯菌属第9节摩拉菌属第10节不动杆菌属第11章革兰阴性需氧杆菌p147

内容提要*第1节布氏杆菌属第2节假单胞菌属第11章1

该属成员众多，在医学和公共卫生学有主要意义的是布氏杆菌属等

布氏杆菌又名布鲁氏菌,1887年Bruce从死亡士兵脾脏中分到第一株布鲁菌，可引起多种动物发病，能够引起猪、牛、羊的流产、不孕、子宫、阴道炎等。主要寄居于肝、脾和淋巴组织内的单核细胞中，是胞内寄生菌。第一节布氏杆菌属（Brucella）

该属成员众多，在医学和公共卫生学有主要意义2第一节布氏杆菌属(Brucella)布氏杆菌（布鲁氏菌）—布氏杆菌病（人兽共患病）一、形态及染色特性*呈球杆形或短杆形，多单在，革兰阴性菌*柯兹罗夫斯基或改良Z-N、改良K氏染色—红色其他菌呈绿色。布鲁氏菌染色照片第一节布氏杆菌属(Brucella)布氏杆菌（布鲁氏菌）—3电镜照片：为球杆状小杆菌。电镜照片：为球杆状小杆菌。4二、培养及生化特性细菌专性需氧，初代分离（5-10％CO2）初分离生长缓慢（5-10天），传代（2-3天）·菌落有光滑(S)型、粗糙（R）型和黏液(M)型·泛酸钙和内消旋赤藓糖醇可刺激某些菌株生长血清、血液、肝汤、葡萄糖—促进生长二、培养及生化特性细菌专性需氧，初代分离（5-10％CO25马尔他布氏杆菌(羊型）：生物型1-3流产布氏杆菌（牛型）：生物型1-9猪布氏杆菌：生物型1-5绵羊布氏杆菌：沙林鼠布氏杆菌：犬布氏杆菌：三、种和生物型该属包括6个种20个生物型马尔他布氏杆菌(羊型）：生物型1-3三、种和生物型该属包括6四、抗原性*细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物A抗原与M抗原：*抗原决定簇位于细胞壁的脂多糖蛋白复合物上*光滑型布氏杆菌具有A和M两种表面抗原R抗原：*非光滑型布氏杆菌的共同抗原决定簇。—包括A、M及R抗原（表面抗原）属外抗原属内抗原四、抗原性*细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物A抗原与M抗原：7五、抵抗力本菌对外界环境的抵抗力较强*在污染的土壤和水中可存活1-4个月*咸肉中40日，羊毛中1.5-4月*皮毛2-4个月，乳、肉食品中约2个月，粪便中120d对湿热的抵抗力不强*60℃-30min或70℃-5min即杀死、煮沸立即死亡*对消毒剂的抵抗力也不强五、抵抗力本菌对外界环境的抵抗力较强*在污染的土壤和水中8六、致病性致病因子—胞内寄生及毒性较强的内毒素（细胞壁的脂多糖-LPS)引起人和多种动物（60多种）的布病*一种重要的人兽共患病*实验动物—豚鼠（最易感）、小鼠和家兔等感染人—羊布氏杆菌感染最多，其次猪布氏杆菌，流产布氏杆菌最少。六、致病性致病因子—胞内寄生及毒性较强的内毒素引起人和多种9主要—绵羊、山羊；另外牛、猪、鹿、骆驼、人等

马尔他布氏杆菌（羊布氏杆菌）主要—牛、马、犬；另外也感染水牛、羊、鹿人等流产布氏杆菌（牛布氏杆菌）主要—猪；另外也感染牛、羊、鹿、人等猪布氏杆菌易感动物：牛、羊、猪，其次马、鹿、骆驼。人 亦易感，家禽较少感染主要—绵羊、山羊；另外牛、猪、鹿、骆驼、人等马尔他布氏杆10*细菌在胞内寄生（肝、脾、骨髓、吞噬细胞等）故治疗较难和彻底感染途径：主要消化道，其次皮肤、粘膜、伤口、生殖道。气溶胶呼吸道传染。动物感染*一般无明显临床症状，多属隐性传染*病变多局限于生殖器官流产、睾丸炎、乳腺炎、子宫炎、关节炎等*细菌在胞内寄生（肝、脾、骨髓、吞噬细胞等）感染途径：主要11布氏杆菌病木乃伊胎儿（四月龄）布氏杆菌病木乃伊胎儿（四月龄）12布氏杆菌病流产胎儿（7月龄），皮下水肿布氏杆菌病流产胎儿（7月龄），皮下水肿13母猪子宫内死胎母猪子宫内死胎14布氏杆菌病流产胎盘，水肿及子叶出血、坏死布氏杆菌病流产胎盘，水肿及子叶出血、坏死15七、微生物学诊断*因表现为慢性或隐性感染—血清学检查变态反应检查细菌学检查—流产1.细菌学检查病料—流产胎儿胃内容物、流产胎盘和羊水、阴道分泌物染色镜检查—革兰氏、柯兹洛夫斯基染色分离培养鉴定（生物安全2级：P2、3级：P3实验室）：七、微生物学诊断*因表现为慢性或隐性感染—血清学检查变态162.血清学检查*血清中布氏杆菌抗体检查：7-15天出现抗体，检测抗体：玻板凝集试验、虎红平板凝集试验*病料中布氏杆菌检查（实用价值大）：用已知抗体检测病料中布氏杆菌。荧光抗体技术、间接血凝试验，免疫组化试验3.变态反应检查反应强度时间（月份）123456789101112凝集反应补体反应变态反应变态反应出现晚，不宜作早期诊断（山羊和绵羊）布氏杆菌水解素皮内发生红肿阳性反应2.血清学检查*血清中布氏杆菌抗体检查：7-15天出现抗体17第2节假单胞菌属（P.aeruginosa)

1.铜绿假单胞菌概述：铜绿假单胞菌的学名是Pseudomonasaeruginosa，当中的Pseudomonas是由希腊语的pseudo及monas所组成，意即虚假的单元，是早期微生物学用作描述病菌的。而Aeruginosa则是铜绿（即铜与空气中的氧气、二氧化碳和水等物质反应产生的物质，又称铜锈。化学式Cu2(OH)2CO3），正好表达了这种细菌所产生的青色色素。绿脓素（pyocynin）的生物合成是以群体效应来调控，就像充满囊肿性纤维化病人肺部铜绿假单胞菌的生物膜一样.第2节假单胞菌属（P.aeruginosa)

1.铜绿假单182.生物学特性：本菌是一种常见的条件致病菌，属于非发酵革兰阴性杆菌。菌体细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛，在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。菌是一种常见的条件致病菌，属于非发酵革兰氏阴性杆菌。菌体细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛，在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。本菌为专性需氧菌，生长温度范围25~42℃，最适生长温度为25~30℃，特别是该菌在4℃不生长而在42℃可以生长的特点可用以鉴别。在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素，如绿脓素（pyocynin）与带荧光的水溶性荧光素（pyoverdin）等。在血平板上会有透明溶血环。

2.生物学特性：本菌是一种常见的条件致病菌，属于非发酵革兰阴19抗原性：本菌含有O抗原（菌体抗原）以及H抗原（鞭毛抗原）。O抗原包含两种成分：一种是其外膜蛋白，为保护性抗原；另一种是脂多糖，有特异性。O抗原可用以分型。

抗原性：203.微生物学检查及其它检查标本采集采自不同感染部位的各种标本，包括血液、尿液、痰标本、脓汁、穿刺液等。还包括来自医院环境中的各种标本如水、空气、物体表面采样等。染色镜检为革兰阴性菌，菌体大小（1.5～5.0)um×宽(0.5～1)um，细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛，无芽胞3.微生物学检查及其它检查21分离培养生长对营养要求不高。在普通琼脂培养基上生长18~24h可以见到扁平、湿润的菌落，该菌所产生的带荧光的水溶性青脓素与绿脓素相结合将使得培养基呈亮绿色；在血琼脂平板上生长时可以见到在菌落的周围有溶血环，菌落呈金属光泽；如果是在液体培养基中则呈浑浊状生长，在液体表面形成菌落，而在培养基底部细菌生长不良。分离培养22第3节伯氏菌属(Burkholderia)鼻疽伯氏菌（鼻疽假单胞菌）鼻疽假单胞菌惯称鼻疽杆菌，现称鼻疽伯氏菌属动物等单蹄兽鼻疽的病原、人兽共患病病原。

无芽孢、无荚膜、不运动、单在、成对或成群的中等大小杆菌，革兰氏阴性。一、分布：在自然界分布广泛，为土壤中存在的最常见的细菌之一。各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等都有本菌存在。本菌存在的重要条件是潮湿的环境。

二、形态及染色特性第3节伯氏菌属(Burkholderia)鼻疽伯氏菌（鼻疽23二.分类鼻疽伯氏菌（P.mallei)-----------伯氏菌属类鼻疽假单胞菌（P.pseudomallei)铜绿假单胞菌（P.aeruginosa)二.分类铜绿假单胞菌（P.aeruginosa)24一、生物学性状：（1）G-杆状，微弯曲，单端有1～3根鞭毛，运动活泼。最大1.0*5.0µm（2）需氧，在普通培养基上生长良好。菌落常互相融合。-在血琼脂平板上产生透明溶血环。有些菌株能产生水溶性色素。-如果培养基或创面敷料有细菌生长，而且呈发荧光的兰绿色，可初步考虑为该菌感染。一、生物学性状：25二、可致疾病：（一）败血症铜绿假单胞菌败血症多继发于大面积烧伤、白血病、淋巴瘤、恶性肿瘤、气管切开、静脉导管、心瓣膜置换术及各种严重慢性疾病等的过程中。本菌引起的败血症约占革兰阴性杆菌败血症的第三至第四位，病死率则居首位。其临床过程与其他革兰阴性杆菌败血症相似，除早产儿及幼儿可不发热外，病人可有弛张热或稽留热，常伴休克、成人呼吸窘迫综合征(ARDS)或弥散性血管内凝血(DIC)等。皮肤出现坏疽性深脓疱为其特征性表现，周围环以红斑，皮疹出现后48～72小时，中心呈灰黑色坏疽或有溃疡，小血管内有菌栓，将渗液涂片革兰染色或培养易找到细菌。皮疹可发生于躯体任何部位，但多发于会阴、臀部或腋下，偶见于口腔粘膜，疾病晚期可出现肢端迁徙脓肿。（二）呼吸道感染原发性铜绿假单胞菌肺炎少见，常继发于宿主免疫功能受损后，尤其易发于原有肺部慢性病变基础上，如：慢性支气管炎、支气管扩张、气管切开、应用人工呼吸机后，X线表现为两侧散在支气管肺炎伴结节状渗出阴影，极少发生脓胸。二、可致疾病：26（三）心内膜炎常发生于原有心脏病基础上，心脏手术、瓣膜置换术后，细菌常接种于伤口缝线上或补缀物上，也可发生在烧伤或有药瘾病人的正常心脏瓣膜上。炎症可发生在各个瓣膜，但以三尖瓣为多见。如果抗生素延迟应用，有赘生物生长及左心瓣膜病变，则预后较严重，药物治愈率低，最好的治疗是及早进行手术切除赘生物和异物。（四）尿路感染铜绿假单胞菌是医院内泌尿道交叉感染的常见菌，占院内感染尿路分离菌的第二位，留置导尿管是截瘫病人获得感染的诱因。其他如：神经原膀胱、尿路梗阻，慢性尿路感染长期应用抗菌治疗易致铜绿假单胞菌感染。40%的铜绿假单胞菌败血症的原发病为尿路感染。（三）心内膜炎27（五）脑部感染铜绿假单胞菌脑膜炎或脑脓肿常继发于颅脑外伤、头和颈部肿瘤手术后，或耳、乳突、鼻窦感染扩散蔓延，腰穿术或脑室引流后。粒细胞缺乏、严重烧伤则为铜绿假单胞菌败血症过程中迁徙至脑部的危险因素。临床表现与其他细菌性中枢感染相同，但预后较差，病死率在60%以上。（六）骨关节感染主要由于败血症的血行迁徙或来源于邻近组织感染病灶，老年人复杂性尿路感染及泌尿生殖系手术或器械操作，可致多发性椎体骨髓炎。近年来报道，注射海洛因者常致颈椎骨髓炎。临床过程无甚特殊，较少疼痛感，预后不良。（五）脑部感染28三、致病性内毒素、荚膜和菌毛:内毒素是该菌的主要致病物质。产生多种致病因子：结构成分、毒素和酶等。选择致病菌：铜绿假单胞菌是人体正常菌群之一，感染多见于皮肤粘膜受损的部位，或机体免疫力低下患者?!

四、微生物学检查法主要是细菌学检查。四、防治原则铜绿假单胞菌可由各种途径传播，但主要是通过污染医疗器械、用具及带菌医护人员引起医源性感染。三、致病性29内容提要*第1节布氏杆菌属第2节假单胞菌属第3节伯氏菌属第4节波氏菌属第5节泰勒菌属第6节军团菌属第7节柯克斯体属第8节弗朗西斯菌属第9节摩拉菌属第10节不动杆菌属第11章革兰阴性需氧杆菌p147

内容提要*第1节布氏杆菌属第2节假单胞菌属第11章30

该属成员众多，在医学和公共卫生学有主要意义的是布氏杆菌属等

布氏杆菌又名布鲁氏菌,1887年Bruce从死亡士兵脾脏中分到第一株布鲁菌，可引起多种动物发病，能够引起猪、牛、羊的流产、不孕、子宫、阴道炎等。主要寄居于肝、脾和淋巴组织内的单核细胞中，是胞内寄生菌。第一节布氏杆菌属（Brucella）

该属成员众多，在医学和公共卫生学有主要意义31第一节布氏杆菌属(Brucella)布氏杆菌（布鲁氏菌）—布氏杆菌病（人兽共患病）一、形态及染色特性*呈球杆形或短杆形，多单在，革兰阴性菌*柯兹罗夫斯基或改良Z-N、改良K氏染色—红色其他菌呈绿色。布鲁氏菌染色照片第一节布氏杆菌属(Brucella)布氏杆菌（布鲁氏菌）—32电镜照片：为球杆状小杆菌。电镜照片：为球杆状小杆菌。33二、培养及生化特性细菌专性需氧，初代分离（5-10％CO2）初分离生长缓慢（5-10天），传代（2-3天）·菌落有光滑(S)型、粗糙（R）型和黏液(M)型·泛酸钙和内消旋赤藓糖醇可刺激某些菌株生长血清、血液、肝汤、葡萄糖—促进生长二、培养及生化特性细菌专性需氧，初代分离（5-10％CO234马尔他布氏杆菌(羊型）：生物型1-3流产布氏杆菌（牛型）：生物型1-9猪布氏杆菌：生物型1-5绵羊布氏杆菌：沙林鼠布氏杆菌：犬布氏杆菌：三、种和生物型该属包括6个种20个生物型马尔他布氏杆菌(羊型）：生物型1-3三、种和生物型该属包括35四、抗原性*细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物A抗原与M抗原：*抗原决定簇位于细胞壁的脂多糖蛋白复合物上*光滑型布氏杆菌具有A和M两种表面抗原R抗原：*非光滑型布氏杆菌的共同抗原决定簇。—包括A、M及R抗原（表面抗原）属外抗原属内抗原四、抗原性*细胞壁低蛋白含量的脂多糖复合物A抗原与M抗原：36五、抵抗力本菌对外界环境的抵抗力较强*在污染的土壤和水中可存活1-4个月*咸肉中40日，羊毛中1.5-4月*皮毛2-4个月，乳、肉食品中约2个月，粪便中120d对湿热的抵抗力不强*60℃-30min或70℃-5min即杀死、煮沸立即死亡*对消毒剂的抵抗力也不强五、抵抗力本菌对外界环境的抵抗力较强*在污染的土壤和水中37六、致病性致病因子—胞内寄生及毒性较强的内毒素（细胞壁的脂多糖-LPS)引起人和多种动物（60多种）的布病*一种重要的人兽共患病*实验动物—豚鼠（最易感）、小鼠和家兔等感染人—羊布氏杆菌感染最多，其次猪布氏杆菌，流产布氏杆菌最少。六、致病性致病因子—胞内寄生及毒性较强的内毒素引起人和多种38主要—绵羊、山羊；另外牛、猪、鹿、骆驼、人等

马尔他布氏杆菌（羊布氏杆菌）主要—牛、马、犬；另外也感染水牛、羊、鹿人等流产布氏杆菌（牛布氏杆菌）主要—猪；另外也感染牛、羊、鹿、人等猪布氏杆菌易感动物：牛、羊、猪，其次马、鹿、骆驼。人 亦易感，家禽较少感染主要—绵羊、山羊；另外牛、猪、鹿、骆驼、人等马尔他布氏杆39*细菌在胞内寄生（肝、脾、骨髓、吞噬细胞等）故治疗较难和彻底感染途径：主要消化道，其次皮肤、粘膜、伤口、生殖道。气溶胶呼吸道传染。动物感染*一般无明显临床症状，多属隐性传染*病变多局限于生殖器官流产、睾丸炎、乳腺炎、子宫炎、关节炎等*细菌在胞内寄生（肝、脾、骨髓、吞噬细胞等）感染途径：主要40布氏杆菌病木乃伊胎儿（四月龄）布氏杆菌病木乃伊胎儿（四月龄）41布氏杆菌病流产胎儿（7月龄），皮下水肿布氏杆菌病流产胎儿（7月龄），皮下水肿42母猪子宫内死胎母猪子宫内死胎43布氏杆菌病流产胎盘，水肿及子叶出血、坏死布氏杆菌病流产胎盘，水肿及子叶出血、坏死44七、微生物学诊断*因表现为慢性或隐性感染—血清学检查变态反应检查细菌学检查—流产1.细菌学检查病料—流产胎儿胃内容物、流产胎盘和羊水、阴道分泌物染色镜检查—革兰氏、柯兹洛夫斯基染色分离培养鉴定（生物安全2级：P2、3级：P3实验室）：七、微生物学诊断*因表现为慢性或隐性感染—血清学检查变态452.血清学检查*血清中布氏杆菌抗体检查：7-15天出现抗体，检测抗体：玻板凝集试验、虎红平板凝集试验*病料中布氏杆菌检查（实用价值大）：用已知抗体检测病料中布氏杆菌。荧光抗体技术、间接血凝试验，免疫组化试验3.变态反应检查反应强度时间（月份）123456789101112凝集反应补体反应变态反应变态反应出现晚，不宜作早期诊断（山羊和绵羊）布氏杆菌水解素皮内发生红肿阳性反应2.血清学检查*血清中布氏杆菌抗体检查：7-15天出现抗体46第2节假单胞菌属（P.aeruginosa)

1.铜绿假单胞菌概述：铜绿假单胞菌的学名是Pseudomonasaeruginosa，当中的Pseudomonas是由希腊语的pseudo及monas所组成，意即虚假的单元，是早期微生物学用作描述病菌的。而Aeruginosa则是铜绿（即铜与空气中的氧气、二氧化碳和水等物质反应产生的物质，又称铜锈。化学式Cu2(OH)2CO3），正好表达了这种细菌所产生的青色色素。绿脓素（pyocynin）的生物合成是以群体效应来调控，就像充满囊肿性纤维化病人肺部铜绿假单胞菌的生物膜一样.第2节假单胞菌属（P.aeruginosa)

1.铜绿假单472.生物学特性：本菌是一种常见的条件致病菌，属于非发酵革兰阴性杆菌。菌体细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛，在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。菌是一种常见的条件致病菌，属于非发酵革兰氏阴性杆菌。菌体细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛，在暗视野显微镜或相差显微镜下观察可见细菌运动活泼。本菌为专性需氧菌，生长温度范围25~42℃，最适生长温度为25~30℃，特别是该菌在4℃不生长而在42℃可以生长的特点可用以鉴别。在普通培养基上可以生存并能产生水溶性的色素，如绿脓素（pyocynin）与带荧光的水溶性荧光素（pyoverdin）等。在血平板上会有透明溶血环。

2.生物学特性：本菌是一种常见的条件致病菌，属于非发酵革兰阴48抗原性：本菌含有O抗原（菌体抗原）以及H抗原（鞭毛抗原）。O抗原包含两种成分：一种是其外膜蛋白，为保护性抗原；另一种是脂多糖，有特异性。O抗原可用以分型。

抗原性：493.微生物学检查及其它检查标本采集采自不同感染部位的各种标本，包括血液、尿液、痰标本、脓汁、穿刺液等。还包括来自医院环境中的各种标本如水、空气、物体表面采样等。染色镜检为革兰阴性菌，菌体大小（1.5～5.0)um×宽(0.5～1)um，细长且长短不一，有时呈球杆状或线状，成对或短链状排列。菌体的一端有单鞭毛，无芽胞3.微生物学检查及其它检查50分离培养生长对营养要求不高。在普通琼脂培养基上生长18~24h可以见到扁平、湿润的菌落，该菌所产生的带荧光的水溶性青脓素与绿脓素相结合将使得培养基呈亮绿色；在血琼脂平板上生长时可以见到在菌落的周围有溶血环，菌落呈金属光泽；如果是在液体培养基中则呈浑浊状生长，在液体表面形成菌落，而在培养基底部细菌生长不良。分离培养51第3节伯氏菌属(Burkholderia)鼻疽伯氏菌（鼻疽假单胞菌）鼻疽假单胞菌惯称鼻疽杆菌，现称鼻疽伯氏菌属动物等单蹄兽鼻疽的病原、人兽共患病病原。

无芽孢、无荚膜、不运动、单在、成对或成群的中等大小杆菌，革兰氏阴性。一、分布：在自然界分布广泛，为土壤中存在的最常见的细菌之一。各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等都有本菌存在。本菌存在的重要条件是潮湿的环境。

二、形态及染色特性第3节伯氏菌属(Burkholderia)鼻疽伯氏菌（鼻疽52二.分类鼻疽伯氏菌（P.mallei)-----------伯氏菌属类鼻疽假单胞菌（P.pseudomallei)铜绿假单胞菌（P.aeruginosa)二.分类铜绿假单胞菌（P.aeruginosa)53一、生物学性状：（1）G-杆状，微弯曲，单端有1～3根鞭毛，运动活泼。最大1.0*5.0µm（2）需氧，在普通培养基上生长良好。菌落常互相融合。-在血琼脂平板上产生透明溶血环。有些菌株能产生水溶性色素。-如果培养基或创面敷料有细菌生长，而且呈发荧光的兰绿色，可初步考虑为该菌感染。一、生物学性状：54二、可致疾病：（一）败血症铜绿假单胞菌败血症多继发于大面积烧伤、白血病、淋巴瘤、恶性肿瘤、气管切开、静脉导管、心瓣膜置换术及各种严重慢性疾病等的过程中。本菌引起的败血症约占革兰阴性杆菌败血症的第三至第四位，病死率则居首位。其临床过程与其他革兰阴性杆菌败血症相似，除早产儿及幼儿可不发热外，病人可有弛张热或稽留热，常