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文档简介
课程目录实验一植物种子萌发和根尖取材固定实验二植物染色体制片及有丝分裂的观察实验三减数分裂制片技术及蝗虫精巢细胞显微观察实验四果蝇培养、麻醉及雌雄鉴别实验五果蝇唾腺染色体制备实验六果蝇单因子杂交/伴性遗传实验七染色体组型分析实验八果蝇基因组DNA提取实验九人类巴氏小体的观察实验十果蝇单因子杂交/伴性遗传数据分析实验十一Hardy-Weinberg遗传平衡定律的检验实验十二人类性状特征的遗传分析课程目录实验一植物种子萌发和根尖取材固定1
实验九人类巴氏小体的观察
什么是巴氏小体?巴氏小体,又叫巴尔体(Barrbody),指雌性哺乳动物体细胞间期,一块染色很深的染色质。巴氏小体实际上是浓缩了的X染色体,其上的基因基本不转录。
实验九人类巴氏小体的观察
什么是巴氏小体?巴氏小体,2巴氏小体位于细胞中的什么位置?在细胞内的位置:核膜边缘或靠近内侧形状:半圆形、三角形、卵形、短棒形及双球形大小:直径约为1微米巴氏小体位于细胞中的什么位置?在细胞内的位置:核膜边缘或靠近3巴氏小体的研究历史1949年加拿大学者Barr在雌猫神经原细胞核中发现。1955年Barr在女性口腔细胞中发现Barrbody。1959年人们把性染色体异常造成的畸形与巴氏小体的研究联系起来。1971年Barrbody被命名为x染色质。食管癌病人巴氏小体出现率低于10%;正常人细胞出现率为20-45%。最新研究进展巴氏小体的研究历史1949年加拿大学者Barr在雌猫神经原4主要内容一实验目的二实验原理(掌握)三实验材料四实验仪器及用具五药品和试剂六实验步骤(理解)七作业主要内容一实验目的5一、实验目的
1通过实验学会巴氏小体检查方法,掌握观察与鉴别X染色质的简易方法;2了解人类男女性别性染色体的功能差异;并为了解人体染色体的畸变与疾病提供参考条件.
一、实验目的
1通过实验学会巴氏小体检查方法,掌握观6性别分化胚胎发育早期未分化的性腺是中性的。性腺外部皮质内部髓质发育为雄性生殖腺(睾丸)XY染色体发育为雌性生殖腺(卵巢)XX染色体XXY型染色体,皮质、髓质同时发育。二、实验原理性别分化胚胎发育早期未分化的性腺是中性的。性腺外部皮质内部7哺乳动物的雌性细胞有两条X染色体,其中一条来自母方,另一条来自父方,在胚胎发育的早期(16天),这两条X染色体中的一条随机浓缩形成巴氏小体,(袋鼠例外:总是来自父方的x染色体失活)。雌性哺乳动物的体细胞雄性哺乳动物的体细胞一个巴氏小体一条能转录的X染色体一条能转录的X染色体一条能转录的Y染色体雌性哺乳动物的体细胞雄性哺乳动一个巴氏小体一条能转录的X染色8雌性体细胞中1条X染色体为何失活而凝缩成巴氏小体?从X、Y染色体自身的特点来考虑……雌性体细胞中1条X染色体为何失活而凝缩成巴氏小体?从X、Y染9基因的剂量补偿效应【重点】雌性xx两条染色体上基因剂量有2份,失活1份,使x连锁性状的表现在雌雄个体间无差异。在失活的x染色体上x染色质并不缺失,其上的某些基因如xg血型基因、类固醇硫酸酯基因并不失活。理论解释基因的剂量补偿效应【重点】理论解释10Lyon假说【重点】
雌性动物体细胞X染色体只有一条是有活性个的,那么雌雄个体X染色体上的基因效果相当X染色体的失活是随机的,即雌性动物的染色体角度看是嵌合体失活发生在胚胎发育的早期,已失活细胞分裂产生的细胞群遗传结构相同。雌性动物伴性基因的作用产生嵌合体Lyon假说【重点】
雌性动物体细胞X染色体只有一条是有活性11性染色体模式【了解】性染色体模式【了解】12体细胞间期Barr是小体的检查体细胞间期Barr是小体的检查13临床意义在于:1胎儿性别鉴定:从胎儿羊水中取得脱落的细胞检查,如有巴氏小体,胎儿为女性,如果细胞中无巴氏小体,胎儿为男性。2成人性别鉴定:变性男运动员参加女子项目,可通过检查其白细胞中有无巴氏小体而确定其性别。3性别畸形的判断:是否缺失或者多出巴氏小体。
巴氏小体的临床意义有哪些?临床意义在于:巴氏小体的临床意义有哪些?14三、实验材料男、女性口腔颊部粘膜细胞。四、实验仪器及用具显微镜、载玻片、盖玻片、牙签,离心管五、药品和试剂
Giemsa染液,固定液,5mol/LHCl,低渗液三、实验材料15(一)直接涂片法:(每组2-3张女生口腔细胞涂片,1张男生口腔细胞涂片。)1涂片:受检者用自来水漱口,用牙签轻轻刮取口腔上皮细胞(腮帮子处),将刮取物均匀涂布于载玻片上,晾干。2固定:将涂片放入95%的乙醇中固定30min,取出晾干。3水解:将涂片放入5molHCl中室温下水解10min,自来水缓缓冲洗。4染色:用Gimsa染液染色8-10分钟,勿干燥,用水冲洗后晾干镜检。5镜检:从低倍镜到高倍镜依次观察。
六、实验步骤
红色字体为注意事项!!!红色字体为注意事项!!!(一)直接涂片法:六、实验步骤
红色字体为注意事项!!!红色16漱口刮取涂布固定晾干取样步骤漱口刮取涂布固定晾干取样步骤17(二)滴片法:1取材:受检者用自来水漱口,用牙签轻轻刮取口腔上皮细胞,将刮取物涮于装有1ml生理盐水的离心管中。2离心:离心10分钟(5000转/分),弃上清液。3低渗:加1ml低渗液混匀,37度低渗6分钟,离心10分钟,弃上清液。4固定:加固定液95%的乙醇1ml,室温固定10分钟,离心,弃上清。5滴片:加200ul固定液与沉淀物混成细胞悬液,用滴管吸取细胞悬液,滴于洁净载玻片上,晾干。6水解:5molHCl水解10分钟。自来水冲洗。7染色:Giemsa染色8分钟,冲去染液,干后镜检。(二)滴片法:18直接涂片法操作简单,但口腔上皮细胞不易分散,细胞常重叠,而且标本上涂大量细胞才能满足计数的需要。滴片法稍繁琐,离心收集细胞较难,但细胞分散均匀,细胞经低渗后核膜膨胀,巴氏小体增大,利于辨认。两种方法的比较直接涂片法操作简单,但口腔上皮细胞不易分散,细胞常重叠,而且19细胞的理想状态:⑴核质是网状或细颗粒状分布。⑵核膜清晰,核无缺损。⑶染色适度。⑷周围无杂菌。巴氏小体的辨认标准:
选定的细胞,在高倍镜或油镜下进一步观察。巴氏小体的形态表现为一结构致密浓染小体,轮廓清楚,常附着于核膜边缘或靠近内侧。细胞的理想状态:20试验八巴氏小体课件21试验八巴氏小体课件22七、作业:1.分别观察50个男、女性可数的细胞,计算各自的巴氏小体细胞所占的百分比。2.在观察中画出2~3个典型细胞,标明巴氏小体的部位。七、作业:23思考题:1男性没有巴氏小体的理论基础。2男变女的变性手术后,该女性有无巴氏小体?3性别畸形的染色体模式可能有几种??思考题:?24课程目录实验一植物种子萌发和根尖取材固定实验二植物染色体制片及有丝分裂的观察实验三减数分裂制片技术及蝗虫精巢细胞显微观察实验四果蝇培养、麻醉及雌雄鉴别实验五果蝇唾腺染色体制备实验六果蝇单因子杂交/伴性遗传实验七染色体组型分析实验八果蝇基因组DNA提取实验九人类巴氏小体的观察实验十果蝇单因子杂交/伴性遗传数据分析实验十一Hardy-Weinberg遗传平衡定律的检验实验十二人类性状特征的遗传分析课程目录实验一植物种子萌发和根尖取材固定25
实验九人类巴氏小体的观察
什么是巴氏小体?巴氏小体,又叫巴尔体(Barrbody),指雌性哺乳动物体细胞间期,一块染色很深的染色质。巴氏小体实际上是浓缩了的X染色体,其上的基因基本不转录。
实验九人类巴氏小体的观察
什么是巴氏小体?巴氏小体,26巴氏小体位于细胞中的什么位置?在细胞内的位置:核膜边缘或靠近内侧形状:半圆形、三角形、卵形、短棒形及双球形大小:直径约为1微米巴氏小体位于细胞中的什么位置?在细胞内的位置:核膜边缘或靠近27巴氏小体的研究历史1949年加拿大学者Barr在雌猫神经原细胞核中发现。1955年Barr在女性口腔细胞中发现Barrbody。1959年人们把性染色体异常造成的畸形与巴氏小体的研究联系起来。1971年Barrbody被命名为x染色质。食管癌病人巴氏小体出现率低于10%;正常人细胞出现率为20-45%。最新研究进展巴氏小体的研究历史1949年加拿大学者Barr在雌猫神经原28主要内容一实验目的二实验原理(掌握)三实验材料四实验仪器及用具五药品和试剂六实验步骤(理解)七作业主要内容一实验目的29一、实验目的
1通过实验学会巴氏小体检查方法,掌握观察与鉴别X染色质的简易方法;2了解人类男女性别性染色体的功能差异;并为了解人体染色体的畸变与疾病提供参考条件.
一、实验目的
1通过实验学会巴氏小体检查方法,掌握观30性别分化胚胎发育早期未分化的性腺是中性的。性腺外部皮质内部髓质发育为雄性生殖腺(睾丸)XY染色体发育为雌性生殖腺(卵巢)XX染色体XXY型染色体,皮质、髓质同时发育。二、实验原理性别分化胚胎发育早期未分化的性腺是中性的。性腺外部皮质内部31哺乳动物的雌性细胞有两条X染色体,其中一条来自母方,另一条来自父方,在胚胎发育的早期(16天),这两条X染色体中的一条随机浓缩形成巴氏小体,(袋鼠例外:总是来自父方的x染色体失活)。雌性哺乳动物的体细胞雄性哺乳动物的体细胞一个巴氏小体一条能转录的X染色体一条能转录的X染色体一条能转录的Y染色体雌性哺乳动物的体细胞雄性哺乳动一个巴氏小体一条能转录的X染色32雌性体细胞中1条X染色体为何失活而凝缩成巴氏小体?从X、Y染色体自身的特点来考虑……雌性体细胞中1条X染色体为何失活而凝缩成巴氏小体?从X、Y染33基因的剂量补偿效应【重点】雌性xx两条染色体上基因剂量有2份,失活1份,使x连锁性状的表现在雌雄个体间无差异。在失活的x染色体上x染色质并不缺失,其上的某些基因如xg血型基因、类固醇硫酸酯基因并不失活。理论解释基因的剂量补偿效应【重点】理论解释34Lyon假说【重点】
雌性动物体细胞X染色体只有一条是有活性个的,那么雌雄个体X染色体上的基因效果相当X染色体的失活是随机的,即雌性动物的染色体角度看是嵌合体失活发生在胚胎发育的早期,已失活细胞分裂产生的细胞群遗传结构相同。雌性动物伴性基因的作用产生嵌合体Lyon假说【重点】
雌性动物体细胞X染色体只有一条是有活性35性染色体模式【了解】性染色体模式【了解】36体细胞间期Barr是小体的检查体细胞间期Barr是小体的检查37临床意义在于:1胎儿性别鉴定:从胎儿羊水中取得脱落的细胞检查,如有巴氏小体,胎儿为女性,如果细胞中无巴氏小体,胎儿为男性。2成人性别鉴定:变性男运动员参加女子项目,可通过检查其白细胞中有无巴氏小体而确定其性别。3性别畸形的判断:是否缺失或者多出巴氏小体。
巴氏小体的临床意义有哪些?临床意义在于:巴氏小体的临床意义有哪些?38三、实验材料男、女性口腔颊部粘膜细胞。四、实验仪器及用具显微镜、载玻片、盖玻片、牙签,离心管五、药品和试剂
Giemsa染液,固定液,5mol/LHCl,低渗液三、实验材料39(一)直接涂片法:(每组2-3张女生口腔细胞涂片,1张男生口腔细胞涂片。)1涂片:受检者用自来水漱口,用牙签轻轻刮取口腔上皮细胞(腮帮子处),将刮取物均匀涂布于载玻片上,晾干。2固定:将涂片放入95%的乙醇中固定30min,取出晾干。3水解:将涂片放入5molHCl中室温下水解10min,自来水缓缓冲洗。4染色:用Gimsa染液染色8-10分钟,勿干燥,用水冲洗后晾干镜检。5镜检:从低倍镜到高倍镜依次观察。
六、实验步骤
红色字体为注意事项!!!红色字体为注意事项!!!(一)直接涂片法:六、实验步骤
红色字体为注意事项!!!红色40漱口刮取涂布固定晾干取样步骤漱口刮取涂布固定晾干取样步骤41(二)滴片法:1取材:受检者用自来水漱口,用牙签轻轻刮取口腔上皮细胞,将刮取物涮于装有1ml生理盐水的离心管中。2离心:离心10分钟(5000转/分),弃上清液。3低渗:加1ml低渗液混匀,37度低渗6分钟,离心10分
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