2015春-电泳系统使用及注意事项资料

电泳系统运用及留意事项

科研试验中心栾广信电源开关停止键启动键暂停键恒压模式恒流模式参数上下调整键显示屏恒压和恒流模式显示灯电路途插口电泳仪电源水平电泳主要用来检测不同大小的DNA或者RNA片段；垂直电泳主要用来检测不同大小的蛋白质或者小片段的DNA或者RNA水平电泳系统水平电泳槽凝胶盒制胶槽样品梳琼脂糖凝胶的制备见视频水平电泳的运用见视频一、水平电泳系统运用留意事项1、凝胶制备2、加样3、电泳条件设置，起先电泳4、结束电泳，取出样品1、凝胶制备留意事项1.1琼脂糖应完全熔化呈清澈、透亮的液体。1.2溶化后，当胶冷却至60～70℃时加入染料，充分摇匀。1.3倒胶时，动作要轻，避开产生气泡，直到在整个凝胶盒表面形成匀整的胶层。1.4科研中心严禁运用EB染料!!!!!1.5一般在胶冷却室温30～45min后垂直向上拔出梳子。1.6一般电泳时，凝胶的厚度在5～7mm之间最合适。凝胶太薄，样品会溢出；凝胶太厚，会降低电泳图像上样品的信号强度。2、加样留意事项负极正极加样孔2.1将凝胶盒放入电泳槽中，点样孔靠近电泳槽的负极2.3上样前样品和LoadingBuffer（载样缓冲液）应当充分混匀，否则样品会漂散。2.2电泳缓冲液应高于凝胶面2㎜左右。3、电泳仪运用留意事项3.1留意连接方式：连接电泳槽的电线时留意颜色的匹配，黑色连接线连接黑色插孔，红色连接线连接红色插孔。3.2电泳仪电线插孔连接方式：黑黑红红3.3不要在层析冷柜中运用电泳仪。3.4在暂停状态下可：重新接线，重新选择恒压或者恒流模式，重新设定参数3.5如是定时的程序，系统会自动停止运行；如是不定时的程序，按Stop按钮终止

4、结束电泳留意事项

1、只有在按下STOP键后方可关机，严禁当仪器处在RUN和PAUSE状态时关机。2、移除电泳槽盖时要当心，不要使电泳缓冲液溢出。3、运用后用去离子水清洗电泳槽内部及凝胶盒、制胶槽、样品梳。垂直电泳系统SDS胶的制备见视频SDS电泳见视频二、垂直电泳系统运用方法1、玻璃盒和灌胶台组装2、灌胶3、电泳模具装配4、上样5、电泳1、玻璃盒和灌胶台组装留意事项

1、把灌胶架直立放在一平坦表面上，压力板处于打开位置。2、放入灌胶架时，使短玻板正对灌胶架前面3、两玻板底部平齐以免灌胶时漏胶。4、玻板运用前确定要干净2、灌胶留意事项

1、把梳子完全放入装配好的凝胶盒，在梳齿下方1cm处的玻璃板上做上标记，以此作为分别胶灌注的平面。取掉梳子。2、灌胶前，加水检测是否漏胶3、灌胶前确定要混匀，灌胶时，尽量避开气泡产生4、分别胶凝固后，插入一张滤纸以吸干分别胶上方两玻璃板间的水或缓冲液。5、插梳子时，先将一端插入，然后插入另一端可避开产生气泡。6、配分别胶和浓缩胶时，TEMED最终加入，TEMED可以催化过硫酸铵产生自由基，从而加速丙烯酰胺凝胶的聚合。7、运用后用蒸馏水、去离子水冲洗灌胶架和灌胶台。

3、电泳模具装配留意事项

1、确保凝胶盒夹心的短玻板朝内对着U形垫子的凹口。2、内槽加满缓冲液，

外槽缓冲液没过电极4、上样留意事项用注射器或者移液器加样时尽量贴壁。盖上电泳槽盖时，槽盖上的小孔确定要对准电泳槽对应的凸出部分5、电泳仪运用留意事项1、盖上电泳槽盖时，确保盖上的插头和微型槽插孔上的颜色一样。2、电源线按正确的电极插入电泳