S20135420-何涛-染色体导入系在QTL定位中的应用

染色体导入系在QTL定位中的应用S20135420何涛摘要：染色体导入系是指借助分子辅助选择方法，通过连续回交和自交构建的只含有一个或几个导入片段与受体亲本不同，其他遗传背景与受体亲本完全相同的家系或品系。相对于传统的遗传群体，导入系群体大大降低了供体材料的遗传背景的干扰，提高了QTL分析的灵敏度和准确性，是QTL鉴定、精细定位、互作分析、图位克隆、性状改良及杂种优势利用和基因表达分析的理想的实验材料。本文对染色体导入系在QTL定位中的应用进行综述。关键词：染色体、导入系、QTL作物绝大多数经济性状都属于数量性状，因此研究数量性状的遗传机制对于作物遗传育种有非常重要的意义。而准确鉴定和定位QTL是进行数量性状遗传效应分析、作物杂种优势利用研究以及分子克隆的基础。但由于用于QTL鉴定和定位的传统分析群体遗传背景复杂，很难对单个QTL进行准确鉴定和定位[1]。所以一个良好的定位及分析群体是进行数量性状遗传研究的必须条件，本文对染色体导入系在QTL定位中的研究情况进行综述。1QTLQTL（quantitativetraitlocus），即数量性状基因座，指控制数量性状的基因在基因组中的位置。QTL定位就是采用类似单基因定位的方法将QTL定位在遗传图谱上，确定QTL与遗传标记间的距离（以重组率表示）。作物许多重要的农艺性状如品质、产量和抗逆性等都属于复杂数量性状。作物QTL的不断深入研究揭示了这些复杂数量性状的遗传基础。促进了这些性状的遗传改良，并使其分子剖析成为可能[2-4]。1.1QTL的定位群体QTL定位的精度在很大程度上取决于遗传图谱的标记饱和度和分离群体的重组信息量。根据分离群体的特点，作图群体分为:1.临时性群体。如F2及其衍生的F3、F4家系，回交群体（BC）等。F2群体是常用的作图群体，该群体容易配制且包含亲本任意一个位点的所有基因型，更适合于估算基因效应和检测不同类型的互作。但F2群体的一个不足之处是存在杂合基因型。对于显性标记，将无法识别显性纯合基因型和杂合基因型。F2群体的另一个缺点是不易长期保存。回交群体每一分离的基因座只有两种基因型，直接反映F1代配子的分离比例，因而其作图效率最高，但缺点是不易保存。2.永久性分离群体。主要包括重组近交系（RILs）、双单倍体群体（DH）、回交近交系（BILs）以及近等基因系（NILs）。它们共同的特点是系内基因型是一致的，而系间基因型是不同的，系间除少数甚至一个染色体区段存在差异外，其余绝大部分染色体区段完全相同。因此，它们可以把种子分散到各个不同环境做重复试验以增加QTL检测的准确性，特别是NIL，由于消除了其他背景的干扰，甚至是主效QTL对微效QTL的掩盖，因此QTL定位效率很高[5]。但也正由于这类群体系内基因型的一致性，因而不能估算显性效应;而且，除非群体足够大，否则它们提供的信息不如F2等群体。如DH群体，由于在染色体加倍过程中可能存在基因丢失，因此构建分子标记连锁图时尽量不用这种群体。1.2QTL定位分子标记目前，研究所采用的分子标记主要有基于分子杂交的RFLP（RestrictionFragmentLengthPolymorphism）[6]，基于PCR扩增的RAPD（RandomAmplifiedPolymorphicDNA）[7]、SSR（SimpleSequenceRepeat）[8]、AFLP（AmplifiedFragmentLengthPolymorphism）[9]以及单核苷酸多态性标记SNP（SingleNucleotidePolymorphism）[10]和表达序列标签EST（ExpressedSequenceTags）[11]等等。此外近年来还发展了序列标志位点（SequencetaggedSites，STS）[12]、转录转座子分子标记（SequencespecificAmplificationPolymorphism，S-SAP）[13]、IRAP（InterretrotransposonAmplifiedPolymorphism）[14]、REMAP（RetrotransposonmicrosatelliteAmplificationPolymorphis）[15]和RBIP（RetrotransPoson-basedInsertionPolymorphism）[15]等。2染色体导入系染色体导入系(chromosomeintrogressionlines，CILs)，又称为染色体片段代换系(chromosomesegmentsubstitutionlines，CSSLs)或代换系(substitutionlines，SLs)，指只含有一个或几个导入片段与受体亲本不同，其他遗传背景与受体亲本完全相同的家系或品系。其中只含一个染色体片段与受体亲本不同的，称为单片段代换系(singlesegmentsubstitutionline，SSSL)，这是最理想的代换系。相对于传统的遗传群体，导入系群体大大降低了供体材料的遗传背景的干扰，提高了QTL分析的灵敏度和准确性，是QTL鉴定、精细定位、互作分析、图位克隆、性状改良及杂种优势利用和基因表达分析的理想的实验材料。2.1染色体导入系的构建染色体导入系的构建主要是通过多代回交来建立。先将供体亲本与受体亲本杂交获得F1，再以受体亲本作为轮回亲本，经过多代回交并结合MAS技术筛选构建大规模染色体片段导入系或代换系[16]。龙萍[17]利用我国和国际水稻所的21个优良品种做轮回亲本、来源于24个国家和地区的188份品种资源做供体亲本，通过杂交、连续回交结合性状筛选，构建了近6万份具有轮回亲本遗传背景的近等基因导入系。Li等对2万个水稻ILs的定向选择，鉴定得到了许多来源不同的新基因和耐旱、耐渍、特异的农艺性状和生理性状的导入系，如273个耐旱ILs，175个耐盐ILs和203个抗飞虱的ILs。2.2染色体导入系在QTL中的应用目前主要农作物中，水稻、玉米、棉花、大豆等均已建立了导入系或代换系群体，并在QTL定位中得到了大量应用。在水稻上，Li等ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Li</Author><Year>2011</Year><RecNum>238</RecNum><record><rec-number>238</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="9pwdta05da9waiedtz2vxtde0t2w0r0r50fa">238</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Li,Min</author><author>Sun,Penglin</author><author>Zhou,Hongju</author><author>Chen,Sheng</author><author>Yu,Sibin</author></authors></contributors><titles><title>Identificationofquantitativetraitlociassociatedwithgerminationusingchromosomesegmentsubstitutionlinesofrice(OryzasativaL.)</title><secondary-title>TAGTheoreticalandAppliedGenetics</secondary-title></titles><periodical><full-title>TAGTheoreticalandAppliedGenetics</full-title></periodical><pages>411-420</pages><volume>123</volume><number>3</number><keywords><keyword>BiomedicalandLifeSciences</keyword></keywords><dates><year>2011</year></dates><publisher>SpringerBerlin/Heidelberg</publisher><isbn>0040-5752</isbn><urls><related-urls><url>/10.1007/s00122-011-1593-9</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.1007/s00122-011-1593-9</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[18]在定位水稻发芽率的研究中，将粳稻品种Nipponbare的染色体片段导入珍籼97，得到了143个染色体代换系群体，在2、5、6、10号染色体上定位出4个相关QTL。再通过利用CSSL的F2群体，在2号染色体上证实了一个主效QTL(qGR2)，并从中找到一个在种子中优先表达的候选基因OsMADS29。杨雷等ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>杨雷</Author><Year>2011</Year><RecNum>20</RecNum><record><rec-number>20</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="9pwdta05da9waiedtz2vxtde0t2w0r0r50fa">20</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>杨雷,</author><author>柳絮,</author><author>吴振映,</author><author>王文英,</author><author>姚方印,</author><author>刘开启,</author></authors></contributors><titles><title>水稻单片段代换系抽穗期qtl鉴定及遗传分析</title><secondary-title>山东农业科学</secondary-title><short-title>agri</short-title></titles><periodical><full-title>山东农业科学</full-title></periodical><number>05</number><keywords><keyword>水稻</keyword><keyword>抽穗期</keyword><keyword>qtl鉴定</keyword><keyword>单片段代换系</keyword><keyword>遗传分析</keyword></keywords><dates><year>2011</year></dates><isbn>1001-4942</isbn><work-type>Journal</work-type><urls></urls></record></Cite></EndNote>[19]以带有晚抽穗基因的单片段代换系为供体，以华粳籼74为受体构建单片段代换系，发展F2次级分离群体，定位出水稻第6染色体上存在与抽穗期相关的QTL，并鉴定出抽穗期由单基因控制，早抽穗表现为显性。在此基础上，WangADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Wang</Author><Year>2011</Year><RecNum>230</RecNum><record><rec-number>230</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="9pwdta05da9waiedtz2vxtde0t2w0r0r50fa">230</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Wang,Binbin</author><author>Zhu,Changxiang</author><author>Liu,Xu</author><author>Wang,Wenying</author><author>Ding,Hanfeng</author><author>Jiang,Mingsong</author><author>Li,Guangxian</author><author>Liu,Wei</author><author>Yao,Fangyin</author></authors></contributors><titles><title>FineMappingofqHD4-1,aQTLControllingtheHeadingDate,toa20.7-kbDNAFragmentinRice(OryzasativaL.)</title><secondary-title>PlantMolecularBiologyReporter</secondary-title></titles><periodical><full-title>PlantMolecularBiologyReporter</full-title></periodical><pages>702-713</pages><volume>29</volume><number>3</number><keywords><keyword>BiomedicalandLifeSciences</keyword></keywords><dates><year>2011</year></dates><publisher>SpringerNetherlands</publisher><isbn>0735-9640</isbn><urls><related-urls><url>/10.1007/s11105-010-0278-x</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.1007/s11105-010-0278-x</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[20]等、PeiADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Pei</Author><Year>2011</Year><RecNum>232</RecNum><record><rec-number>232</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="9pwdta05da9waiedtz2vxtde0t2w0r0r50fa">232</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Pei,Chengguo</author><author>Liu,Xu</author><author>Wang,Wenying</author><author>Ding,Hanfeng</author><author>Jiang,Mingsong</author><author>Li,Guangxian</author><author>Zhu,Changxiang</author><author>Wen,Fujiang</author><author>Yao,Fangyin</author></authors></contributors><titles><title>FineMappingofqHD8-1,aQTLControllingtheHeadingDate,toa26-kbDNAFragmentinRice(OryzasativaL.)</title><secondary-title>JournalofPlantBiology</secondary-title></titles><periodical><full-title>JournalofPlantBiology</full-title></periodical><pages>190-198</pages><volume>54</volume><number>3</number><keywords><keyword>BiomedicalandLifeSciences</keyword></keywords><dates><year>2011</year></dates><publisher>SpringerNewYork</publisher><isbn>1226-9239</isbn><urls><related-urls><url>/10.1007/s12374-011-9155-x</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.1007/s12374-011-9155-x</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[21]等，进一步精细定位了qHD4-1和qHD8-1两个QTL。赵芳明等ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>赵芳明</Author><Year>2011</Year><RecNum>21</RecNum><record><rec-number>21</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="9pwdta05da9waiedtz2vxtde0t2w0r0r50fa">21</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>赵芳明,</author><author>张桂权,</author><author>曾瑞珍,</author><author>杨正林,</author><author>凌英华,</author><author>桑贤春,</author><author>何光华,</author></authors></contributors><titles><title>基于单片段代换系的水稻粒型qtl加性及上位性效应分析</title><secondary-title>作物学报</secondary-title><short-title>xbzw</short-title></titles><periodical><full-title>作物学报</full-title></periodical><number>03</number><keywords><keyword>水稻</keyword><keyword>单片段代换系</keyword><keyword>粒型qtl</keyword><keyword>加性效应</keyword><keyword>上位性效应</keyword></keywords><dates><year>2011</year></dates><isbn>0496-3490</isbn><work-type>Journal</work-type><urls></urls></record></Cite></EndNote>[22]以l6个单片段代换系(SSSL)及15个双片段代换系分析了水稻粒型性状QTL的加性及上位性效应，共检测到9个水稻粒型性状QTL和7对双基因互作，揭示了同一粒长QTL与不同单片段代换系聚合时会产生不同的互作效应。李生强等ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>李生强</Author><Year>2011</Year><RecNum>17</RecNum><record><rec-number>17</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="9pwdta05da9waiedtz2vxtde0t2w0r0r50fa">17</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>李生强,</author><author>崔国昆,</author><author>关成冉,</author><author>王俊,</author><author>梁国华,</author></authors></contributors><titles><title>基于水稻单片段代换系的粒形qtl定位</title><secondary-title>中国水稻科学</secondary-title><short-title>zgsk</short-title></titles><periodical><full-title>中国水稻科学</full-title></periodical><number>02</number><keywords><keyword>水稻</keyword><keyword>单片段代换系</keyword><keyword>粒形</keyword><keyword>数量性状基因座</keyword></keywords><dates><year>2011</year></dates><isbn>1001-7216</isbn><work-type>Journal</work-type><urls></urls></record></Cite></EndNote>[23]利用22个单片段代换系，共鉴定出22个与粒形相关的QTL，包括7个粒长QTL，6个粒宽QTL，5个谷粒长宽比QTL和4个粒厚QTL。朱金燕等ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>朱金燕</Author><Year>2011</Year><RecNum>24</RecNum><record><rec-number>24</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="9pwdta05da9waiedtz2vxtde0t2w0r0r50fa">24</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>朱金燕,</author><author>嵇朝球,</author><author>周勇,</author><author>王军,</author><author>王中德,</author><author>杨杰,</author><author>范方军,</author><author>梁国华,</author><author>仲维功,</author></authors></contributors><titles><title>利用染色体单片段代换系定位水稻株高qtl</title><secondary-title>植物学报</secondary-title><short-title>zwxt</short-title></titles><periodical><full-title>植物学报</full-title></periodical><number>06</number><keywords><keyword>株高</keyword><keyword>数量性状位点</keyword><keyword>水稻</keyword><keyword>单片段代换系</keyword><keyword>代换作图</keyword></keywords><dates><year>2011</year></dates><isbn>1674-3466</isbn><work-type>Journal</work-type><urls></urls></record></Cite></EndNote>[24]以85个单片段代换系为材料定位了24个水稻株高QTL。任德勇等ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>任德勇</Author><Year>2010</Year><RecNum>18</RecNum><record><rec-number>18</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="9pwdta05da9waiedtz2vxtde0t2w0r0r50fa">18</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>任德勇,</author><author>何光华,</author><author>凌英华,</author><author>桑贤春,</author><author>杨正林,</author><author>赵芳明,</author></authors></contributors><titles><title>基于单片段代换系的水稻穗长qtl加性及其上位性效应</title><secondary-title>植物学报</secondary-title><short-title>zwxt</short-title></titles><periodical><full-title>植物学报</full-title></periodical><number>06</number><keywords><keyword>上位性效应</keyword><keyword>穗长</keyword><keyword>qtl</keyword><keyword>水稻</keyword><keyword>单片段代换系</keyword></keywords><dates><year>2010</year></dates><isbn>1674-3466</isbn><work-type>Journal</work-type><urls></urls></record></Cite></EndNote>[25]则利用染色体片段代换系进行了水稻穗长QTL加性及其上位性效应分析。在棉花上，WangP等ADDINEN.CITEADDINEN.CITE.DATA[26]以海岛棉（G.barbadense）TM-1为受体亲本，陆地棉(G.barbadense)Hai7124为供体亲本，构建染色体片段导入系（CHSLs）。该群体由包含298个导入片段的174个群体组成，其中86个群体（49.1%）为单片段导入。导入片段平均长度为16.7cM，总长度为2948.7cM，覆盖了83.3%的4倍体棉花基因组。利用此群体，通过对4个环境下收集的数据进行综合分析，发现了与棉花纤维质量相关的43个加性效应QTL和6个上位性效应QTL，其中有6个QTL在各环境中均表现稳定。在玉米上，Chung等ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Chung</Author><Year>2010</Year><RecNum>255</RecNum><record><rec-number>255</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="9pwdta05da9waiedtz2vxtde0t2w0r0r50fa">255</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Chung,C.L.</author><author>Longfellow,J.M.</author><author>Walsh,E.K.</author><author>Kerdieh,Z.</author><author>VanEsbroeck,G.</author><author>Balint-Kurti,P.</author><author>Nelson,R.J.</author></authors></contributors><auth-address>Dept.ofPlantPathologyandPlant-MicrobeBiology,CornellUniversity,Ithaca,NY14853,USA.</auth-address><titles><title>Resistancelociaffectingdistinctstagesoffungalpathogenesis:useofintrogressionlinesforQTLmappingandcharacterizationinthemaize--Setosphaeriaturcicapathosystem</title><secondary-title>BMCPlantBiol</secondary-title></titles><periodical><full-title>BMCPlantBiol</full-title></periodical><pages>103</pages><volume>10</volume><edition>2010/06/10</edition><keywords><keyword>Ascomycota/physiology</keyword><keyword>ChromosomeMapping</keyword><keyword>DNA,Plant/genetics</keyword><keyword>Host-PathogenInteractions</keyword><keyword>Immunity,Innate</keyword><keyword>Models,Genetic</keyword><keyword>Phenotype</keyword><keyword>PlantDiseases/genetics</keyword><keyword>QuantitativeTraitLoci</keyword><keyword>Zeamays/genetics/immunology/microbiology</keyword></keywords><dates><year>2010</year></dates><isbn>1471-2229(Electronic) 1471-2229(Linking)</isbn><accession-num>20529319</accession-num><urls></urls><custom2>3017769</custom2><electronic-resource-num>1471-2229-10-103[pii] 10.1186/1471-2229-10-103[doi]</electronic-resource-num><remote-database-provider>Nlm</remote-database-provider><language>eng</language></record></Cite></EndNote>[27]用Tx303和B73为亲本构建的82个代换系群体对玉米大斑病进行QTL定位和分析。得到了两个可靠表达的QTL：qNLB1.06和qNLB1.02。在温室与田间的重复试验表明：qNLB1.06减少真菌侵入的效率，qNLB1.02增加侵染位点附近胼胝质和多酚的积累，阻碍菌丝向维管束中生长。除了对玉米大斑病的抗性，qNLB1.02还与玉米细菌性枯萎病和普通锈病有关，而qNLB1.06也增强对玉米细菌性枯萎病的抗性。EvertonA.Brenner等ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>Brenner</Author><Year>2012</Year><RecNum>236</RecNum><record><rec-number>236</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="9pwdta05da9waiedtz2vxtde0t2w0r0r50fa">236</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>Brenner,Everton</author><author>Blanco,Mike</author><author>Gardner,Candice</author><author>Lübberstedt,Thomas</author></authors></contributors><titles><title>Genotypicandphenotypiccharacterizationofisogenicdoubledhaploidexoticintrogressionlinesinmaize</title><secondary-title>MolecularBreeding</secondary-title></titles><periodical><full-title>MolecularBreeding</full-title></periodical><pages>1-16</pages><keywords><keyword>BiomedicalandLifeSciences</keyword></keywords><dates><year>2012</year></dates><publisher>SpringerNetherlands</publisher><isbn>1380-3743</isbn><urls><related-urls><url>/10.1007/s11032-011-9684-5</url></related-urls></urls><electronic-resource-num>10.1007/s11032-011-9684-5</electronic-resource-num></record></Cite></EndNote>[28]将31个外源玉米种质导入PHZ51和PB47中，得到50个BC1DH群体，含有199个SNP位点分布在整个基因组，其中平均11.8%的标记来自于外源供体等位基因。这50个BC1DH群体包含了轮回亲本92.9%的基因组。利用此群体，通过关联分析揭示了细胞壁消化、倒伏和花期推迟有关的数量性状多态性。邢向茹等ADDINEN.CITE<EndNote><Cite><Author>邢向茹</Author><Year>2011</Year><RecNum>37</RecNum><record><rec-number>37</rec-number><foreign-keys><keyapp="EN"db-id="9pwdta05da9waiedtz2vxtde0t2w0r0r50fa">37</key></foreign-keys><ref-typename="JournalArticle">17</ref-type><contributors><authors><author>邢向茹,</author><author>陈晨,</author><author>刘瑞响,</author><author>赵璞,</author><author>李成璞,</author><author>张祖新,</author></authors></contributors><titles><title>低氮胁迫对玉米染色体片段导入系产量和苗期性状的影响</title><secondary-title>安徽农业科学</secondary-title><short-title>ahny</short-title></titles><periodical><full-title>安徽农业科学</full-title></periodical><number>21</number><keywords><keyword>玉米</keyword><keyword>氮胁迫</keyword><keyword>产量</keyword><keyword>苗期性状</keyword><keyword>处理时期</keyword></keywords><dates><year>2011</year></dates><isbn>0517-6611</isbn><work-type>Journal</work-type><urls></urls></record></Cite></EndNote>[29]以Ye478及Ye478为背景的5个染色体片段导人系为材料，研究了低氮胁迫下产量和苗期性状的影响。展望理想状态下，整个导入系覆盖了受体亲本的全基因组，不同导入系带有供体亲本基因组不同片段。与轮回亲本比较，两个株系之间性状的任何显著差异都是因为导入片段在供体与受体间存在的等位差异，因而可有效消除基因组上其他位点因分离而产生的遗传差异，提高QTL定位的准确性和稳定性。染色体导入系为更深入研究QTL提供了良好的条件，特别是染色体单片段代换系，在QTL的鉴定和精细定位，QTL遗传效应分析及QTL克隆以及应用于品种改良和杂种优势利用的研究中具有巨大的优越性，为我们的研究带来极大的方便。参考文献[1].DarvasiA.,WeinrebA.,MinkeV.,WellerJ.I.,andSollerM..Detectingmarker-QTLlinkageandestimatingQTLgeneeffectandmaplocationusingasaturatedgeneticmap.Genetics,1993,134:943-951.[2].ZhuH,HayesP,KleinhofsA,KudrnaD,LiuZ,PromL,SteffensonB,ToojindaT,VivarH,GilchristL,1999.DoesfunctionfollowformPrincipalQTLsforFusariumheadblight(FHB)resistancearecoincidentwithQTLsforinflorescencetraitsandplantheightinadoubled-haploidpopulationofbarley.TheoreticalandAppliedGenetics,99(7～8):1221～1232[3].YanJQ,HeCX,BenmoussaM,WuP,ZhuJ,1998.Quantitativetraitlocianalysisforthedevelopmentalbehavioroftillernumberinrice(OryzasativaL.).TheoreticalandAppliedGenetic,97(1～2):267～274[4].YanJQ,ZhouJ,HeCX,MebroukB,WuP,1998b.Moleculardissectionofdevelopmentalbehaviorofplantheightinrice(OryzasativaL.).Genetics,150:1257～1265[5].朱军.运用混合线性模型定位复杂数量性状基因的方法J.浙江大学学报,1999,333:327–3351[6].GRODZICKERT,WIILIAMSJ.SHARPP.SAMBROOKJ.Physicalmappingoftemperature-sensitivemutationsofadenoviruses[J].ColdSpringHarbor.Syrup.Quant.Biol.1974.39：439—446.[7].WILLIAMSJGK,KUBEIIKAR,LIVAKKJ,etal.DNApolymorphismsamplifiedbyarbitraryprimersareusefulasgeneticmarkers[J].Nucleic.Acids.Res.,1990,18：6531-6535.[8].AKKAYAMS.BHAGWATAA.CREGANPB.LengthpolymorphismsofsimplesequencerepeatDNAinsoybean[J].Genera,1992,132：1131-1139.[9].VOSP,HOGERSR,BLEEKERM,eta1.AFIP：AnewtechniqueforDNAfingerprinting[J].Nucl.Acid.Res.1995,23：4407-4414.[10].CHORJ,MINDRINOSM,RICHARDSDR.ela1.GenomewidemappingwithbiallelicmarkersinArabidopsisthaliana[J].NatureGenetics。1999,23：203-207.[11].ADAMSMD,KEIIEYJM,GOCAYNEJD,elal.ComplementaryDNAsequencing：expressedsequencetagsandhumangenomeproject[J].Science,1991,252(5013)：1651-1656.[12].OLSONM,HOODL,CANTORC,etal.Acommonlanguageforphysicalmappingofthehumangenome[J].SciemP,1989,245(4925)：1434-1435.[13].WAUGHR,MCLEANK,FIAVEI1AJ,elal.GeneticdistributionofBARE-1-likeretrotransposableelementsinthebarleygenomerevealedbysequence-specificamplificationpolymorphism(S-SAP)[J].Mo1.Gen.Genet.,1997,253：687-694.[14].KALENDARR,GROBT,REGINAM,elal.IRAPandREMAP：twonewretrotransposon-basedDNAfinger-printingtechniques[J].Theor.App1.Genet.,1999,98：704-711.[15].FLAVELLAJ,KNOXMR,PEARCESR,ELLISTHN.Retrotransposon-basedinsertionpolymorphism(RBIP)forhighthroghputmarkeranalysis[J].P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