标准质量操作手册2

标准质量操作手册全自动血细胞分析仪的标准操作规程实验室名称项目制定日期太昊路社区卫生服务中心化验室URIT-2900Plus全自动血细胞分析仪操作规程2012年6月1日一.目的URIT-2900Plus全自动血细胞分析仪的标准操作二.适用仪器范围URIT-2900Plus全自动血细胞分析仪三.该SOP变动程序本标准操作程序的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出并报经下述人员批准签字:专业主管、科主任。四.仪器工作原理URIT-2900Plus血细胞分析仪采用的单通道计数，也就是白细胞和红细胞分两次在同一样品环内进行技术。定量的血液经过采样机构用定量的稀释液进行稀释，抽取一部分在采样针中；样品杯内的稀释后的血液再经过融血剂对红细胞进行破坏处理后，血液中的细胞就只剩下了白细胞。仪器恒流源装置部分的内外电极分别放置于在样品杯的内外室中，两室之间相隔一个直径为80um的红宝石孔。其中后室充满了一定浓度的细胞悬浮液；前室充满了稀释液。由于细胞比稀释液导电性能要低，为相对不良导体。计数时，当前室的一个细胞颗粒通过宝石孔时，内外电极之间就会产生一个瞬间脉冲电压，脉冲的数量与细胞的数量成正比；脉冲的高度与细胞体积大小成正比。在负压的作用下，一定容量的细胞会不断地通过小孔，从而产生一连串的脉冲信号，通过对这些脉冲信号的放大、阈值调节、鉴别、整形、A/D转换后送入计数系统进行计数，就可求得一定容积的细胞总数。五.开机程序1开机前检查：1）试剂的检查：对每天要用的试剂进行检查，如量不够，准备好备用试剂。2）仪器的检查：检查液体管道、电线的连接。3）废液桶的检查：检查废液桶，确保每天开机前已清空。4）检查打印纸是否充足。2开机按下血液分析仪后端的主电源开关打开电源，前端面板的主电源指示灯会点亮。（除存放和运输外，应保持主电源开关打开），此时清洗液体管道、体统初始化和电路自检等工作会自动进行。指示灯变成绿色，仪器进入血细胞分析仪窗口。六.质控物检测在测量样本之前，先测定质控物，质控物在质控模式中进行测定。1将质控物从冰箱中取出，置室温后充分混匀进行测定。2将测定结果进行分析，质控物测定结果在允许误差范围内才能做病人样本测定。七.样本测定1标本采集：静脉血的采集采血姿势建议为坐位。扎上压脉带，时间最好不要超过半分钟。用安尔碘消毒，采血部位待干，抽血，使用含EDTA-K2抗凝剂的试管，立即颠倒混匀6-8次，防止标本凝固。末梢血的采集一般可采用局部穿刺法，典型的采集方法是从指端穿刺采集，采用20ul定容采血管采集。2样本编号，登记。（室温保存，在采集后8小时内进行分析）3确认是静脉血模式状态（末梢血模式状态指示灯处于不亮的状态）4在准确界面中确认IDNo.、测定项目、样本类型。5将血样颠倒混匀，将取样针插入试管侧壁下，按下测定开关，仪器吸入样本开始检测。注意事项：采血过程必须干净无污染。指端穿刺采血时，请勿过分压挤穿刺部位，以免组织液混入血液。使用优利特公司推荐的抗凝剂。避免剧烈摇动采血管，以免产生气泡。在短时间内（4小时之内）不能将血样处理完毕，建议用户将血样存放于（2-8）0C的冷藏室内。八.血样计数、分析血样采集后应尽快进行计数、分析，建议在3-5分钟内测试完毕。预稀释模式1将清洁的空试管置于采样针下，在血细胞分析仪上点击“排液”按钮，仪器排出稀释液到试管中，将试管移出；2将20ul定容采血管内的血样迅速注入准备好的盛有稀释液的试管中，轻轻摇动试管，使血样与稀释液充分混匀；3将盛有血样的试管置于采样针下（应确保采样针轻挨试管底部），按仪器前面板的RUN键，仪器前面板的工作状态指示灯变成橙色，等听到蜂鸣器发出清脆的“滴”声后，才能将试管移走。4仪器开始自动分析样本，请等待分析结果。全血模式1轻轻摇动试管使血样混匀后，将试管置于采样针下（应确认采样针在试管底部），按仪器前面板的RUN键，仪器前面板的工作状态指示灯变成橙色，等到蜂鸣器发出清脆的“滴”声后，才能将试管移出；2仪器开始自动分析样本，请等待分析结果。计数、分析结束后，仪器将会将结果显示在学习班分析一窗口的相应参数后面，并绘出WBC、RBC、PLT的直方图。注意：1、在计数前，请务必确认当前的工作方式（全血方式、预稀释方式）是您需要的。2、在预稀释模式下，一次采血进行混匀后，可以进行两次预稀释测试。九.报告输出当血液样本分析完成后，1若“自动打印”设置为开，参数语言设置为“中文”，则记录仪（打印机）会自动打印出中文参数的测试报告。2若“自动打印”设置为开，参数语言设置为“英文”，则记录仪（打印机）会自动打印出英文参数的测试报告。3若“自动打印”设置为关，按“打印”键，可以将当前样本数据的血细胞分析报告，通过内置记录仪打印出来。4若“自动打印”设置为关，按“打印”键，可以将当前样本数据的血细胞分析报告，通过外置打印机打印出来。十.关机程序当天血液测试完毕或每天下班前关机时必须执行关机程序。仪器将进行每日的保养并对测量管路进行清洗，确保液路在仪器停止工作时无蛋白质集聚，同时使采样系统保持清洁。具体关机步骤如下：1选择“关机”菜单，按“确认”键，屏幕弹出关机窗口；2移动光标到“确认”，按“确认”键关闭系统；3仪器开始对液路进行清洗保养；4关机程序运行完毕后，仪器屏幕会显示“谢谢使用，现在请关闭电源”的提示，此时关闭仪器后面的电源开关；5清理工作台并处理废液。注意：禁止违规进行关机操作，否则将导致仪器性能和可靠性的降低。非法关机容易引起系统数据丢失，造成系统操作失灵。非法关机或不关机，仪器将不对夜路进行灌注清洗，容易引起管路内血样的蛋白沉积，造成堵孔。十一.仪器保养1日保养项目：仪器连续工作时间超过8小时的，自动清洗应设为4小时。仪器连续工作时间超过4小时但不足8小时的，自动清洗应设为4小时。一起连续工作不足4小时的，自动清洗应设为2小时。仪器使用一年，自动清洗应减少一小时。2周保养项目：每周必须对仪器的表面污渍特别是采样针周围可能残留的血液样本溅出物进行清理、清洁，防止蛋白质的沉积、霉变和污染。用干净的清洁布蘸中性洗涤剂先对仪器的采样针周围表面进行清洁，再清洁其它表面。3月保养项目：每月保养主要是针对机械零件的保养，主要包括润滑电机轴，润滑采样机构的X向、Y向导杆等。注意：进行保养前，请确认仪器主机已切断电源。尿液分析(尿常规)仪的标准操作规程实验室名称项目制定日期太昊路社区卫生服务中心化验室URIT-200尿液分析仪2012年6月1日一.标本采集：门诊就诊病人，取一次性尿杯，留取随机中段尿30ML，置于方盘内待检。注意：尿标本应避免经血、白带、精液、粪便等混入，造成污染。留取尿标本后应在2小时内完成检验，如果2小时内不能完成，应放4℃冰箱保存，但不超过8小时。尿量不够、放置时间超过2小时、污染等不合格标本，应按标本拒签程序，拒绝签收。二.液干化学检验：1仪器工作原理：仪器的光电传感器由光源和光电接收管组成。光源发出的光照射在尿试纸条的试纸块上，试纸块的颜色深浅对光的吸收及反射程度不一样，试纸块反映颜色的深浅与尿液中的各种成分的浓度成正比，颜色越深，吸收光亮值越大，反射光亮值越低，则反射率越小，反之颜色越浅，吸收光量值越小，反射光量值越高，反射率也越大。各试纸块的反射光进入光电传感器中，将光信号转换成电压信号，完成了光电转换。其电压强度与光反射强度的高低有关，该电压信号经过I/V转换送入中央处理器CPU进行处理，并由打印机打印出测试结果。2操作步骤1）仪器：URITEST-200A2）试纸条：URIT11A3）质控品：UQ-114）操作步骤：接通电源，打开电源开关。准备好尿试纸条、吸水卫生纸。在仪器待机状态下按“开始”键。听到蜂鸣声后，把试纸条浸入尿液中。在滤纸上滤干。浸过尿液的的尿试纸条请用吸水卫生纸吸干残液后，放入试纸条槽，以免交叉污染。把试纸条置于试纸槽内。仪器处于连续测试时，每隔一定时间鸣叫一次，操作者可以继续测试。仪器处于高速测试状态时，显示器显示的鸣叫计数值为第13秒。仪器处于低速测试时，显示器的鸣叫数值为第4秒，操作人员可听蜂鸣声，也可参看显示的计数值作为每次测试的起点。凡听到蜂鸣声，操作者放入的试纸条都能有效测出数据。未听到蜂鸣声请勿放入试纸条。注意事项：1.仪器处于高速测试状态时，对尿试纸条的放置有一定的要求，每次放尿试纸条的位置要基本相同，把尿试纸条放在传送带上的最佳放置位置；2.使用干净的取样杯；3.使用新鲜的尿液；4.尿试纸条浸入尿液的时间为2s，所有试纸块应全部浸入尿液中；5.仪器使用的最佳温度是230C--270C，室温和尿样最好控制在这个温度范围，建议在空调室内使用，冬天要用水浴槽保持尿样的温度；6.尿液中含有维生素C，（凡有Vc呈阳性结果者）可以造成葡萄糖和隐血含量低的假象，应要求病人停服维生素C后重新检测。3仪器的维护和保养：1）.标准试纸条标准试纸条主要用来检验仪器是否能正常工作。标准试纸条存放于随机的一个小方形塑料盒中，共两条，一条日常用，一条备用，每当使用者对仪器测量结果持有怀疑时，可用标准试纸条检验，检测结果与小盒上的数据对比，如与上面的数据相符合，则说明仪器运行正常，反之仪器失常。注意：标准试纸条不能浸入尿中或水中。2）仪器应安装在无太阳直射光、无溅水、有电源但无强电磁干扰的地方，否则引起操作不便；3）电源要求：100-240V～50Hz；4）仪器必须有良好的接地线；5）保证仪器的清洁才能维持良好的运行；6）如果仪器长期不使用，应用软布或塑料布覆盖在仪器上，下次使用时，先用标准试纸条检查后再使用。阴道分泌物检查的标准操作规程阴道分泌物是女性生殖系统分泌的液体，其中主要是有阴道分泌的液体。一.清洁度取阴道分泌物，用生理盐水涂片，高倍镜检查，根据所含白细胞(或脓细胞)、上皮细胞、杆菌、球菌的多少，分成I—Ⅳ度，判定结果见表阴道涂片清洁度判定表清洁度杆菌球菌上皮细胞脓细胞或白细胞I多-满视野0-5／高倍视野Ⅱ少少1／2视野5—15／高倍视野Ⅲ少多少15—30／高倍视野Ⅳ-大量-大于30／高倍视野临床意义：清洁度Ⅰ—Ⅱ度内视为正常，Ⅲ、Ⅳ度量为异常，多数为阴道炎。可发现阴道霉菌、阴道滴虫等病原体。单纯不清洁度增高而不见滴虫、霉菌者，可见于非特异性阴道炎。二.滴虫检查阴道滴虫呈梨形，比白细胞大2倍，顶端有鞭毛4根，在25—42℃温度下可活动。因此，在寒冷天气，标本要采取保温措施。滴虫活动的最适pH值为5.5—6.0。三.霉菌检查在湿片高倍镜下见卵圆形孢子，革兰染色油镜下可见革兰阳性孢子或假菌丝与出芽细胞相连接，成链状及分枝状。找到阴道霉菌是霉菌性阴道炎的诊断依据。四.线索细胞检查为阴道鳞状上皮细胞黏附多数加德纳菌所致，生理盐水涂片可见细胞边缘呈锯齿状，细胞已有溶解，其上附着大量加德纳菌及厌氧菌，表面毛糙，有斑点和大量细小颗粒。大便常规检验的标准操作规程一.标本采集1采集粪便标本的方法因检查目的不同而有差别，如一般检验留取新鲜指头大小(约5g)即可，放入干燥、清洁、无吸水性的有盖容器内送检，标本容器最好用内层涂腊的硬纸盒，便于检查后焚毁。血吸虫毛蝴孵化则留全量新鲜便(不少于30g)。细菌检查的粪便标本应收集于灭菌封口的容器内，勿混入消毒剂及其它化学药品。2检查蛲虫卵需要用软玻璃纸拭子，在清晨排便前由肛门四周拭取标本，也可用棉拭子拭取，但均须立即镜检。3检查阿米巴滋养体，应于排便后立即检查。冬季需采取保温措施，迅速送检。4不应该采取尿壶或便盆中的粪便标本。若标本中混入尿液，可使柔弱的原虫致死。用白明胶膜法检查粪便中的胰蛋白酶活性时，可因尿液中存在溶解白明胶的物质而导致其检查结果假阳性率的增高。粪便标本中也不可混入植物、泥土、污水等，因腐生性原虫、真菌抱子、植物种子、花粉易混淆实验结果。 5盛粪便标本的容器必须有盖，有明显标记。粪便标本应选择其中脓血粘液等病理成分，若无病理成分，可多部位取材。采取标本后，应在一小时内完成检查，否则可因PH及消化酶等影响，而使粪便中细胞成分破坏分解。6检查胆石、胰石、寄生虫体及虫卵计数，应收集24h粪便送验。7隐血试验，应嘱患者收集标本前3日禁食动物性食物。连续检查3天，并选取外表及内层粪便。收集标本后须迅速进行检查，以免因长时间放置使隐血反应的敏感度降低。二.常规检验1颜色可根据观察所见报告，如黄色、褐色、土灰色、绿色、红色、柏油样等。正常粪便因粪胆素而呈棕黄色，但可因饮食、药物或病理原因影响而改变粪便颜色。灰白色见于钡餐后、服硅酸铝、阻塞性黄疽、胆汁减少或缺乏。绿色见于食用含叶绿素的蔬菜后及含胆绿素时。红色见于下消化道出血、食用西红柿、西瓜等。柏油样便见于上消化道出血等。酱色常见于阿米巴痢疾、食用大量咖啡、巧克力等。米泔水样见于霍乱。2性状可报告为软、硬、糊状、泡沫样、稀汁样、血水样、血样、粘液血样、粘液脓样、有不消化食物等。正常时为有形软便。1）球形硬便：便秘时可见。2）粘液稀便：见于肠壁受刺激或发炎时，如肠炎、痢疾和急性血吸虫病等。3）粘液脓性血便：多见于细菌性痢疾。4）酱色粘液(可带脓)便：多见于阿米巴痢疾。5）稀汁样便:可见于急性肠胃炎,大量时见于伪膜性肠炎及隐孢子虫感染。6）米泔样便并有大量肠粘膜脱落，见于霍乱、副霍乱等。7）扁平带状便：可能因直肠或肛门狭窄所致。3寄生虫虫体蛔虫、蛲虫、绦虫节片等较大虫体，肉眼即可分辨。钩虫虫体常需将粪便冲洗过筛后方可看到。服驱虫剂后排便时应检查有无虫体。驱绦虫后应仔细寻找有无虫头。4直接涂片镜检1）洁净玻片上加等渗盐水1—2滴，选择粪便的异常部分，或挑取不同部位的粪便做直接涂片检查。2)最好取大玻片，制成涂片后，应覆以盖片。涂片的厚度以能透过印刷物字迹为准。3)在涂片中如发现疑似包囊，则在该涂片上加1滴碘液，在高倍下仔细鉴别，如仍不能决定时，可取全量粪便浓缩法检查。4)虫卵的报告方式：未找到者注明“未找到虫卵”，找到一种报告一种，找到几种报告几种，并在该虫卵后面注明数量若干，以低倍视野计算。5)应注意将植物纤维及其细胞与寄生虫、人体细胞相鉴别，并应注意有无肌纤维、结缔组织、弹力纤维、淀粉颗粒、脂肪小滴球等。若大量出现，则提示消化不良或胰腺外分泌功能不全。6)细胞中应该注意红细胞、白细胞、嗜酸性粒细胞(直接涂片干后用瑞氏染色)、上皮细胞、巨噬细胞等。7)夏科—雷登(Charcot—Leyden)结晶：为无色或浅黄色两端尖而透明具有折光性的菱形结晶，大小不一。常见于肠道溃疡，尤以阿米巴感染粪便中最易检出。过敏性腹泻及钩虫病患者粪便亦常可见到。8)细菌：占粪便净重的l／3(4000亿／g干粪)，正常菌群主要是大肠杆菌和肠球菌，占80％；而过路菌(产气杆菌、变形杆菌、绿脓杆菌等)不超过10％；芽胞茵(如梭状菌)和酵母菌为常住菌，但总量不超过10％。正常菌群消失或比例失调可因大量应用抗生素所致，除涂片染色找细菌外，应采用不同培养基培养鉴定。红细胞沉降率测定检验的标准操作规程原理离体抗凝血液置于特制刻度测定管(魏氏法血沉管)内，垂直立于室温中，一定时间时观察上层血浆高度的毫米数值报告之。二.器材及试剂专用血沉管1支109mmoI／L(32g/L)枸橼酸钠溶液：取含二分子结晶水的枸橼酸钠(分子量294．12)3．28，用蒸馏水溶解，稀释至100ml。此液在室温保存不得超过2周。三.操作1专用血沉管1支，加抗凝剂0．2ml。2静脉采血后，取下针头，加血至刻度，颠倒混匀。3用血沉管(300mm×2．5mm)吸取上述混匀血液至“0”刻度处，拭去管外附着的血液，将血沉管直立在血沉架上。4记时，室温中静置lh，读出血沉仪上的读数即是血沉值。四.参考值男:＜15mm／60min女：＜20mm／60min五.附注1红细胞在单位时间内下沉的速度与血浆蛋白的量和质，血浆中脂类的量和质，红细胞的大小与数量，是否成串钱相聚以及血沉管的内径、清洁度、放置位置是否垂直，室温高低等因素都有关系。2要求l)标本采集时避免脂肪血。(2)血液和抗凝剂比例要准确。

(3)血沉管内径要标准(2．5mm)，放置要垂直。(4)做血沉的标本要在采集后3h内测定，并充分混匀。3．室温过低、过高和贫血时，对结果都有影响。为此，血沉应尽量放在18—25℃室温下测定。室温过高时血沉加快，可以按温度系数校正。室温过低时血沉减慢，无法校正。六.临床意义增快：(l)生理性：年幼小儿、经期、妊娠3个月至产后1个月。(2)病理性：急性炎症、结缔组织病、活动性结核、风湿热活动期、组织严重破坏、贫血、恶性肿瘤、高球蛋白血症、重金属中毒等。血型鉴定的标准操作规程一.ABO血型鉴定根据红细胞上有或无A抗原或／和B抗原，将血型分为A型、B型、AB型及O型4种。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型准确鉴定ABO血型。所谓正定型，是用已知抗—A和抗—B分型血清来测定红细胞上有无相应的A抗原或／和B抗原；所谓反定型，是用已知A细胞和B细胞来测定血清中有无相应的抗—A或／和抗—B。1试剂和材料1）抗—A(B型血)、抗—B(A型血)及抗—A十B(O型血)分型血清，制备方法见本节附注；2）5％A、B及O型试剂红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注；3）受检者血清；4）受检者5％红细胞盐水悬液，制备方法见本节附注。二.方法1试管法1)取洁净小试管(内径10mm×60mm)3支，分别标明抗—A、抗—B和抗—A十B，用滴管分别加抗—A、抗—B和抗—A十B。分型血清各l滴于试管底部，再以滴管分别加入受检者5％红细胞盐水悬液1滴，混和。2)另取洁净小试管(内径10mm×60mm)3支，分别标明A、B和O细胞。用滴管分别加入受检者血清l滴于试管底部，再分别以滴管加入A、B和O型5％试剂红细胞悬液l滴，混和。3)立即以1000r／min离心lmin。4)将试管轻轻摇动，使沉于管底的红细胞浮起，先以内眼观察有无凝集(或溶血)现象。如内眼不见凝集，应将反应物倒于玻片上，再以低倍镜检查。5)观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于A、B亚型、类B或cisAB的发现。6)凝集强度判断标准4十红细胞凝集成一大块，血清清晰透明。3十红细胞凝集成数小块，血清尚清晰。2十红细胞凝块分散成许多小块，见到游离红细胞。1十肉眼可见大颗粒，周围有较多游离红细胞土镜下可见数个红细胞凝集在一起，周围有很多游离红细胞MF混合凝集外观(mixedfield)是指镜下可见少数红细胞凝集，而极大多数红细胞仍呈分散分布。一表示阴性，镜下未见凝集，红细胞均匀分布。2．玻片法1)取清洁玻片1张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明抗-A、抗-B和抗-A十B，分别用滴管滴加抗-A、抗-B和抗-A十B分型血清l滴于标明的方格内，再各加受检者2％红细胞悬液1滴，混和。2)另取洁净玻片一张(或白瓷板1块)，用蜡笔划成方格，标明A细胞、B细胞和O细胞，用滴管各加受检者血清1滴，再分别用滴管滴加A、B和O型试剂红细胞悬液1滴。3)将玻片(或白瓷板)不断轻轻转动，使血清与细胞充分混匀，连续约15min，以肉眼观察有无凝集(或溶血)反应。如以玻片作试验时，也可用低倍镜观察结果。结果判定：ABO血型正反定型结果：分型血清+受检者红细胞受检者血型受检者血清+试剂红细胞抗-A抗-B抗-A十BA细胞B细胞O细胞十─十A─十──十十B十一────O十十─十十十AB───注：十为凝集；—为不凝集。附注：1．分型血清质量性能符合要求，用毕后应放置冰箱保存，以免细菌污染。2．试剂红细胞以3个健康者同型新鲜红细胞混和，用生理盐水洗涤1次，以除却存在于血清中的抗体及可溶性抗原。3．试管、滴管和玻片必须清洁干燥，防止溶血。4．操作方法应按规定，一般应先加血清，然后再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。5．按理IgM抗-A和抗-B与相应红细胞的反应温度以4℃为最强，但为了防止冷凝集现象的干扰，一般仍在室温(20—24℃)内进行试验，37℃可使反应减弱。6．离心时间不宜过长或过短，速度不宜过快或过慢，以防假阳性或假阴性结果。7．观察时应注意红细胞呈特异性凝集、继发性凝固以及缗钱状排列的区别。8．判断结果后应仔细核对、记录，避免笔误。正反定型结果不一致的原因：有技术性问题或红细胞和血清本身的问题，常见者有以下几种：1.分型血清效价太低、亲和力不强。如抗—A血清效价不高，可将A亚型误定为O型，AB型误定为B型。2．红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例不适当，使反应不明显，误判为阴性反应。3．受检者红细胞上抗原位点过少(如亚型)或抗原性减弱(见于白血病或恶性肿瘤：以及类B或cisAB等。4．受检者血清中蛋白紊乱(高球蛋白血症)，或实验时温度过高，常引起红细胞呈缗钱状排列。5．受检者血清中缺乏应有的抗-A及或抗—B抗体，如丙种