中药制剂分析第六章课件

含动物药、矿物药的中药制剂分析§1含动物药的中药制剂分析概述牛黄及其制剂分析天然牛黄人工牛黄：由胆酸、猪去氧胆酸、胆红素、胆固醇、无机盐等配制而成。人工培育牛黄§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析牛黄的化学成分胆色素：胆红素、胆绿素等胆汁酸类：胆酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸、猪去氧胆酸等脂类：胆固醇蛋白质、肽、氨基酸类无机元素§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析胆汁酸的性质和化学反应多以肽（甘氨胆酸、牛磺胆酸）的形式存在溶解性成盐——易溶于水游离——可溶于乙酸、丙酮、碱液，易溶于乙醇、乙醚胆酸§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析胆汁酸的性质和化学反应颜色反应Pettenkofer反应（冰水冷却）--紫色Hammarsten反应:＋20％铬酸胆酸－紫色鹅去氧胆酸－不显色温热§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析胆红素的物理性质溶解性：溶于苯、氯仿、氯苯、二硫化碳、碱液，微溶于乙醇、乙醚，成盐后易溶于水化学反应不稳定性，易被氧化Gmelin反应（浓硝酸氧化反应）VandenBergh反应（重氮化反应）蓝紫色(强酸性)→红色(pH2-5)→绿色(pH>5.5)胆红素§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析定性鉴别理化鉴别氯仿试验：＋硫酸/过氧化氢→绿色醋酸试验：＋糠醛/硫酸→蓝紫色水合氯醛试验：色素溶解，呈金黄色速效感冒(伤风)胶囊中人工牛黄鉴别取本品10粒，加50ml氯仿溶解后，加0.5%活性炭（约0.2～0.4g）充分振摇后，再加硫酸与过氧化氢溶液（30%）各2滴，振摇，即显绿色。

§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析定性鉴别薄层鉴别胆酸、去氧胆酸胆红素提取溶媒三氯甲烷、乙醇、甲醇三氯甲烷、乙醇混合液吸附剂硅胶G硅胶G展开剂异辛烷-乙酸乙酯-冰醋酸，正己烷-乙酸乙酯-甲醇-冰醋酸氯仿-乙酸乙酯-冰醋酸显色剂硫酸乙醇溶液、磷钼酸乙醇溶液§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析含量测定胆酸的测定酸碱滴定法—总胆酸比色法—去氧胆酸薄层扫描法HPLC※使用ELSD检测器或进行柱前衍生§1含动物药的中药制剂分析牛黄及其制剂分析含量测定胆红素的测定分光光度法（重氮化反应）HPLC§1含动物药的中药制剂分析麝香及其制剂分析化学成分及性质大环化合物甾族化合物胆固醇、酯、蜡蛋白质、肽、氨基酸无机盐其他成分§1含动物药的中药制剂分析麝香及其制剂分析定性鉴别GC紫外光谱法乙醇提取液→220nm,270nm乙醚提取液→231nm,265nm正己烷提取液→220nm,265nm薄层色谱法麝香保心丸中麝香的气相色谱鉴别取本品2g，研碎，加乙醚5ml，振摇，超声处理5分钟，离心，取上清夜，作为供试品溶液。另取麝香酮对照品，加乙醚制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。照气相色谱法(附录VIE)试验，以聚乙二醇(PRG)-20M和甲基硅橡胶为混合固定相，涂布浓度分别为1.64%和1.32%，柱长为2m，柱温为180℃。分别取对照品溶液与供试品溶液适量，注入气相色谱仪。供试品色谱中应呈现与对照品色谱保留时间相同的色谱峰。梅花点舌丸中麝香的薄层鉴别取本品3g，研细，加乙醚10ml，密塞，振摇10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取麝香酮对照品，加乙醇制成每1ml含5mg的溶液，作为对照品溶液。薄层条件：硅胶G，石油醚-二氯甲烷(2:3)，二硝基苯肼试液麝香酮§1含动物药的中药制剂分析麝香及其制剂分析含量测定GC固定液—苯基（50%）甲基硅酮薄层色谱法HPLC熊胆及其制剂分析熊胆为熊科动物黑熊SelenarctosthibetanusCuvier或棕熊UrsusarctosLinnaeus的干燥胆，熊胆是我国传统的名贵中药材。

§1含动物药的中药制剂分析

熊胆及其制剂分析熊胆的化学成分及性质熊胆中的主要化学成分为胆汁酸类（约占胆汁中的58～59%）成分，其中主要含牛磺熊去氧胆酸（TUDCA），胆汁酸通常与牛磺酸、甘氨酸结合，以钠盐或钙盐的形式存在。熊胆中含有的胆色素以胆红素为主，尚有胆黄素、胆褐素。还含有多种氨基酸、胆固醇、脂肪、磷脂及无机无素。

§1含动物药的中药制剂分析

定性鉴别1．光谱鉴别

取胆仁少许，制成甲醇液，测定紫外吸收光谱，在273±2nm波长处有最大吸收（猪胆在270±1nm、415±2nm波长处有吸收，牛胆在265±1nm、413±1nm波长处有吸收，羊胆在405±3nm波长处有吸收）。2．薄层层析法

常用的薄层色谱条件如下薄层板：110℃活化的硅胶G板，展开剂：异辛烷-醋酸乙酯-醋酸(5:5:1)。显色剂：喷30%硫酸乙醇溶液，于105℃加热10min,检测结果：可检出游离及结合的胆酸（黄色）、猪去氧胆酸（绿褐色）、熊去氧胆酸（绿褐色）、鹅去氧胆酸（绿褐色）、去氧胆酸（黄棕色）及石胆酸（紫色）。§1含动物药的中药制剂分析

含量测定

薄层色谱-比色法：取胆酸类样品的乙醇溶液，经色谱分离后，刮取胆酸、去氧胆酸及甘氨胆酸相应斑点，提取后在分光光度计上测定。

薄层扫描法：样品供试液经薄层色谱分离后，以熊去氧胆酸和鹅去氧胆酸为对照品，采用薄层扫描仪扫描测定。

高效液相色谱法：样品经适当处理后，以牛磺去氧胆酸和牛磺鹅去氧胆酸为对照品，采用高效液相色谱法进行测定。

气相谱法：胆酸样品制成乙酰基衍生物的甲酯，以胆甾醇己酸酯为内标物，可测定石胆酸、猪去氧胆酸、熊去氧胆酸、去氧胆酸、鹅去氧胆酸及胆酸的含量。§1含动物药的中药制剂分析

蛇胆及其制剂分析蛇胆汁为眼镜蛇科、游蛇科或蝰蛇科动物多种蛇的胆汁。味苦、寒，归肺、肝、胃经，具有行气化痰，祛风除湿，清肝明目，平肝息风，清热解毒等功效。常用于肝热目赤，肺热咳嗽，胃热疼痛，急性风湿性关节炎，痔疮，皮肤热毒等症。（一）化学成分及性质主要化学成分为胆汁酸类，且多数以牛磺酸结合的结合型胆甾酸形式存在；同时蛇胆中还有无机元素。§1含动物药的中药制剂分析

定性鉴别多以薄层色谱为主。薄层板多用硅胶G薄层板，展开系统常用的有：①异戊醇-冰醋酸-水（18：10：6）②甲苯-冰醋酸-水（10：10：1）③异辛烷-乙醚-冰醋酸-正丁醇-水（10：5：5：3：1）等。对照品：胆酸、去氧胆酸、猪去氧胆酸、熊去氧胆酸等。显色条件：30%硫酸乙醇（V/V）,喷后在105℃烘烤10min，置紫外灯（254nm）下观察。§1含动物药的中药制剂分析蛇胆及其制剂分析含量测定

蛇胆中主要成分为胆汁酸类，所以对胆汁酸类成分分析的方法很多，如比色法、薄层扫描法、高效液相色谱法，气相色谱法等。

§1含动物药的中药制剂分析§1含动物药的中药制剂分析蟾酥及其制剂分析化学成分蟾蜍甾二烯游离型--蟾毒配基结合型—蟾蜍毒素等强心甾烯蟾毒类吲哚碱类蟾毒配基§1含动物药的中药制剂分析蟾酥及其制剂分析定性鉴别显色反应+对二甲氨基苯甲醛/硫酸→蓝紫色+醋酐/硫酸→蓝紫色-蓝绿色氯仿提取液+硫酸→界面鲜黄色，氯仿层淡红色+酒石酸液/二甲氨基苯甲醛→蓝色氯仿提取液+白糖/硫酸→界面红色§1含动物药的中药制剂分析蟾酥及其制剂分析定性鉴别薄层色谱法其他方法：纸色谱、紫外光谱、红外光谱等提取剂吸附剂展开剂显色剂蟾蜍毒素类氯仿硅胶G丙酮-氯仿-环己烷三氯化锑氯仿溶液或10%硫酸乙醇试液蟾蜍碱类甲醇硅胶G氯仿-甲醇-氨水邻苯二醛§1含动物药的中药制剂分析蟾酥及其制剂分析含量测定分光光度法差示光度法薄层扫描法HPLCGC梅花点舌丸中三个蟾毒内酯的含量测定--HPLC主要色谱条件：C18柱，乙腈-水（1:1），检测波长297nm，流速1ml/min对照品：脂蟾毒配基、脂蟾毒配基、蟾毒灵供试品溶液：氯仿超声提取，中性氧化铝小柱纯化§2含矿物药中药制剂的分析矿物药的分析矿物药的分类《神农本草经》将矿物药分为上、中、下三品；明朝李时珍《本草纲目》将矿物药分别记述在火部、水部、土部、金石部、石部等。其中大部分矿物药列入金石部，金石部又分为“金、玉、石、卤”四类。后经历代的发展，从医药观点出发，目前，主要按其所含主要化学元素和化合物分类。

§2含矿物药中药制剂的分析1、溶解法（湿法）①将试样溶解在水、酸或其他溶剂中的分解方法。②通常采用水、稀酸、浓酸、混合酸的顺序进行处理。2、熔融法（干法）①将试样与固体熔剂混合，然后在高温下加热至全熔或半熔，使欲测组分转变为可溶于水或酸的化合物。

碱性熔剂，如碳酸钠、氢氧化钠。②熔剂：酸性熔剂，如硫酸氢钾、焦硫酸钾。

氧化性熔剂，如过氧化钠、碳酸钠加硝酸钾。

还原性熔剂，碳酸钠加硫等。分析方法§2含矿物药中药制剂的分析矿物药的分析分析方法容量分析法、重量分析法热分析法可见分光光度法原子吸收光谱法（AAS）§2含矿物药中药制剂的分析矿物药的分析含量测定方法1、化学分析法（1）滴定分析法：常用氧化还原滴定和配位滴定，（2）重量法：常用沉淀重量法，如汞的定量分析。2、热分析法3、可见分光光度法：一些无机金属元素可与某些化合物形成有色配合物，可用分光光度法测定。如砷盐的检查。4、原子吸收光谱法：该法能测定几乎全部金属元素和一些碱金属元素，广泛应用于中药原料其制剂中各种微量元素的分析。§2含矿物药中药制剂的分析§2含矿物药中药制剂的分析

含砷矿物药及其制剂分析含砷矿物药：雄黄、雌黄、砒石、砒霜分解硝酸、硫酸等酸性溶剂分解过氧化钠、碳酸钠熔融分解硫酸－过氧化氢、硫酸－硝酸钾※分解时，应防止砷化合物挥发而损失。雄黄雌黄§2含矿物药中药制剂的分析含砷矿物药及其制剂分析定性鉴别硫的鉴别As2S2+2KClO3+3HNO3

→2KAsO3+2H2SO4+Cl2↑+NO2↑H2SO4+BaCl2

→BaSO4↓(白色沉淀)+2HCl砷的鉴别2As2S2+7O2

→2As2O3+4SO2↑As2S3+9O2

→As2O3+6SO2↑As2O3+3H2O→H3AsO3H3AsO3+H2S→As2S3↓(黄色絮状沉淀)+H2O△△△§2含矿物药中药制剂的分析

含砷矿物药及其制剂分析含量测定碘量法直接碘量法硫酸分解－直接碘量法H3AsO3+I2蓝色碱熔分解－直接碘量法间接碘量法硫酸过氧化氢分解－间接碘量法分光光度法（Ag-DDC法）pH=8淀粉§2含矿物药中药制剂的分析含砷矿物药及其制剂分析含量测定牛黄解毒片中雄黄含量测定取本品20片，研细，称取2片量(含雄黄约0.1g)，精密称定，置锥形瓶中，加硫酸钾1g、硫酸铵2g与样品混匀。加硫酸15ml，直火加热至溶液呈淡黄色，冷却，缓缓加水50ml，加热微沸3～5分钟，放冷，加酚酞指示液2滴，用40％氢氧化钠溶液中和至显微红色，放冷，用0.25mol/L硫酸溶液中和至褪色，加碳酸氢钠5g，摇匀后，用碘滴定液(0.1mol/L)滴定，至近终点时，加淀粉指示液2ml,滴定至溶液显紫蓝色。国外开具的“问题中药黑名单”

美国：

禁止出售的中成药有：附子理中丸、安宫牛黄丸、安神补脑丸、抗癌灵、解

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