检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质

必修一实验二检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质教学目标尝试检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质，探讨细胞中主要化合物的种类。一、实验原理：淀粉+碘液蓝色

50--65℃水浴还原糖+斐林试剂砖红色沉淀

（Cu2O）（还原糖：单糖、麦芽糖、乳糖）蛋白质+双缩脲试剂紫色络合物脂肪+苏丹Ⅲ（Ⅳ）橘黄色（红色）蛋白质检测实验的实验结果脂肪检测实验的实验结果二、材料还原糖：应选含糖高，颜色为白色或近于白色的植物组织（防止颜色干扰实验现象的观察），如苹果、梨、葡萄淀粉：马铃薯脂肪：花生子叶、花生匀浆蛋白质：豆浆、鲜肝提取液、鸡蛋清（稀释）三、用具斐林试剂（新制Cu（OH）2）A液、0.1g/mlNaOHB液、0.05g/mlCuSO4四、试剂先混合，再使用；现配现用等体积混合双缩脲试剂:A液、0.1g/mlNaOHB液、0.01g/mlCuSO4注意：先加A液1毫升，再滴加B液3~4滴在强碱性溶液中，双缩脲与二价铜离子形成紫色络合物，称为双缩脲反应。双缩脲试剂检测肽键1、实验原理：还原性糖+斐林试剂→砖红色沉淀还原性糖：葡萄糖、果糖、麦芽糖、乳糖等非还原性糖：蔗糖、淀粉等2、配制斐林试剂：实验一：还原性糖的鉴定3、实验步骤（实验册P8）①制备苹果的组织样液（实验员老师准备）。②用量筒去2ml组织样液，再用量筒取1ml新配制好的斐林试剂。③取一只试管，将2ml苹果组织样液倒1ml斐林试剂混合均匀，此时溶液呈蓝色。④水浴加热:将试管放入盛有温水的大烧杯中，用酒精灯加热到50-65℃。(注意问题：实验册P7第10点)溶液的颜色变化过程：淡蓝色——棕色——砖红色（沉淀）。4、实验现象：溶液的颜色从蓝色变成砖红色沉淀。5、结论：苹果中含有还原性的糖。实验二：脂肪的鉴定实验原理：脂肪+苏丹Ⅲ→橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ→红色方法一：取少量脂肪样液，加入3滴苏丹Ⅲ，震荡，可看到溶液呈了橘黄色显微镜、镊子、毛笔、吸水纸、刀片、载玻片、盖玻片、培养皿50%的酒精、苏丹Ⅲ、清水3、实验步骤：①取一粒浸泡过3-4小时的花生种子，去皮，分开两片子叶，将子叶切成薄片，然后用毛笔将花生薄皮放入盛有清水的培养皿中。②取一片载玻片，用纱布擦净，用毛笔取一片最薄的材料，放在载玻片中央。③用滴管在花生种子薄片上滴几滴苏丹Ⅲ染液，染色3分钟，用吸水纸吸去花生种子薄片周围的染液。④在薄片上滴1至2滴体积分数为50%的酒精，洗去浮色，用吸水纸洗去花生子叶周围的酒精。切片①——纸片②③④⑤——观察⑥⑦4、实验现象：5、结论：显微镜下观察到橘黄色（或红色）的颗粒。花生种子细胞中含有脂肪。实验三：蛋白质的鉴定1、实验原理：蛋白质+双缩脲试剂→紫色络合物2、材料用具：豆浆、蛋清、牛奶都是很好的实验材料。在用蛋清做实验材料时，要注意将蛋清稀释，如果稀释不够，反应后的产物会粘固在试管内壁上，使反应不容易彻底。3、实验步骤：用量筒量取2ml的蛋清稀释液。再用量筒取1ml双缩脲尿试剂A液将量取的蛋清液和双缩脲试剂A液分别倒入到试管中，震荡均匀，此时可见试管内仍然是透明的。再向试管中加入3至4滴双缩脲试剂B液。震荡均匀，此时可见试管内溶液呈紫色4、实验现象：蛋清液呈紫色。5、结论：蛋清液中含有蛋白质。注意事项：①先加，再加②鉴定前，留出一部分组织样液，以便对比A液1mlB液4滴（4）淀粉的检测和观察颜色变化：变蓝1、在做生物组织中还原性糖、蛋白质、脂肪的鉴定，对实验材料的选择，叙述错误的是（

）A.甘蔗的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行还原糖的鉴定。B.花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料C.大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料。D.鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料。A2.下列关于实验操作步骤的叙述中，正确的是（）

A、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定B、脂肪的鉴定需要显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴C．鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加乙液D．用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现用现配3．下列各项可作为鉴定生物组织中还原性糖的理想材料是（）A．韭菜B．鸢尾C．菠菜D．梨BD实战演练1．(2012·高考广东卷)分析下表，可推测(

)注：“＋”显色，“＋＋”显色更深；“－”不显色。A．甲溶液含有淀粉B．乙溶液含有还原糖

C．混合溶液不含淀粉

D．混合溶液含有淀粉酶溶液双缩脲试剂碘液斐林试剂甲＋－－乙－＋＋－甲、乙混合＋＋＋D2．根据检测“生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质”实验，回答问题：

(1)检测成熟苹果果肉中存在还原糖所用的试剂是__________

该试剂与细胞内还原糖发生作用，形成______沉淀。

(2)在检测花生子叶中的脂肪的实验中，能将脂肪染成橘黄色的染液是____，用其染色时，冲洗浮色要用酒精，这是因为酒精______。(3)检测黄豆组织中存在蛋白质时，向组织液中加入双缩脲试剂A摇匀，再向样液中加入双缩脲试剂B摇匀。其中双缩脲试剂B的量只有3～4滴，而不能过量，为什么？__________________________

斐林试剂

砖红色苏丹Ⅲ能溶解苏丹Ⅲ过量的双缩脲试剂B会与试剂A反应，使溶液呈蓝色，而掩盖生成的紫色(4)本实验注意事项：①斐林试剂极不稳定，其甲液和乙液需_______，使用时再临时混合均匀用于实验。

②双缩脲试剂的使用，应先加试剂___________，

造成碱性环境，再加试剂________________。

③在可溶性还原糖的检测中，对试管中溶液加热时，试管底部不要触及________________；试管口不要朝向________________，以免溶液沸腾时冲出试管造成烫伤。分别配制、储存A液(0.1g/mLNaOH溶液)B液(0.01g/mLCuSO4溶液)烧杯底部实验者或其他人(1)图中A是

，B是

。（2）图中X是

，常用

试剂检测，Ⅰ在小麦种子中主要是指

。（3）图中Y是

，其中含有糖是

。（4）图中Z的种类有

种。（5）列举出Ⅳ的常见功能

。（6）从P的角度分析Ⅳ具有多样性的原因

。（7）HIV含有Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ中的

。课后习题一、基础题1.(1)(2)√×2.苏丹Ⅲ染液豆浆砖红色沉淀斐林试剂马铃薯橘黄色双缩脲试剂葡萄汁蓝色碘液花生子叶紫色3.B课后习题二、拓展题1.提示：细胞是有生命的，它可以主动地从环境中获取生命活动需要的元素。这是生物与非生物的区别之一。不能。因为最基本的生命系统是细胞，将细胞内含有的各种物质放在试管中，它们不能构成细胞这种结构。2.教学参考组成细胞化学元素的作用1．组成各种化合物化学元素主要以化合物的形式参与细胞的组成和细胞的代谢活动，这些化合物是生物体进行各项生命活动的基础：如N：是核酸、蛋白质、NADP+、ATP、固醇、叶绿素、生长素、甲状腺激素等的重要组成成分；P是磷脂、NADP+、ATP等的重要组成成分等。2．影响生物体的生命活动如B可促进花粉的萌发和花粉管的伸长按元素的生物学功能，大致可分为下列类型。（1）、构成原生质的基本元素：如C、H、O、N、P是构成核酸的主要元素；C、H、O、N是构成蛋白质的主要元素等。（2）、调节机体活动的元素：如离子态的Na+、K+、Ca2+、Mg2+、Cl-、H+及其他离子OH-、HCO3-、SO42-、HPO42-等。（3）、与蛋白质结合的元素：如Fe（血红蛋白、细胞色素、固氨酶等），Cu（血蓝素、细胞色素、氧化酶等），Mg（固氮酶），Co（构成维生素B12，在天然存在的形式中，维生素B12可能是与肽或蛋白质结合的），Zn（DNA聚合酶、RNA聚合酶），I（甲状腺蛋白质。这是一种含碘蛋白质，是人体内的碘库）Mn（精氨酸酶等多种酶）（4）微量调节元素：如B、Cr、Se、As、Ni等。这些元素是不可缺的，又是不可替代的。教学参考关于细胞中各化合物含量的问题1.组织细胞中含量最多的化合物是水，可以说不论是哪种细胞（脂肪细胞一般除外），该细胞是处于什么季节，什么什么地方，在什么时期，细胞中水的含量都是最多，有机化物蛋白质的含量仅于第二。2.在细胞中各化合物的含量变化以核酸最为稳定，其变化范围较小且有规律性，而水的含量变化范围为最大。同时，各化合物在细胞中的含量也不能低于最低值，否则将影响细胞的生命。多细胞生物体内，由许多相似的细胞和细胞间质有机结合而成的结构，有一定的形态、结构和生理功能。教学参考三检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质1．实验关键：（1）还原糖的鉴定a.材料应含糖量高且无色；b.斐林试剂的甲液和乙液现配现用，混合均匀。（2）脂肪的鉴定子叶应切成薄片（3）蛋白质的鉴定实验关键：a.先加双缩脲试剂A，再加双缩脲试剂Bb.鸡蛋蛋白液必须稀释(10倍)教学参考三检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质2．实验材料的准备(1)鉴定还原糖的实验材料准备：植物组织是常用的实验材料，但必须加以选择。在双子叶植物中，光合作用的主要产物葡萄糖形成后合成为淀粉，暂时储藏在叶子内，因此最好不用双子叶植物的叶子做实验材料。有些单子叶植物，如韭菜、鸢尾，并不将光合作用的初始产物转变为淀粉，因此叶内含有大量的还原单糖，但是，由于叶片中叶绿素的颜色较深，对于鉴定时的颜色反应起着掩盖作用，导致实验现象不明显，因此，也不宜用单子叶植物的叶子做实验材料。本实验最理想的实验材料是含糖量较高的生物组织(或器官)，而且组织的颜色较浅.或近于白色的.如苹果和梨的果实，经试验比较，颜色反应的明显程度，依次为苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝卜。(2)鉴定脂肪的实验材料准备：实验材料最好选择富含脂肪的种子，如花生种子(取其子叶)。供实验用的花生种子，必须提前浸泡3～4h。浸泡时间短了，不容易切成片；浸泡时间过长，则组织太软，切下的薄片不易成形。教学参考三检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质(3)鉴定蛋白质的实验材料准备：实验材料最好选用富含蛋白质的生物组织(或器官)，植物材料常用的是大豆，动物材料常用的是鸡蛋(卵白)。如用大豆，必须提前浸泡1～2h，这样容易研磨成浆。有条件的学校，可以直接采用现成的大豆磨成的豆浆，豆浆可以购买，也可用小型的榨汁机制取。如果用稀释的卵白做实验材料，实验效果会更好。3．实验的注意事项(1)斐林试剂与双缩脲试剂的不同点斐林试剂与双缩脲试剂都由NaOH和CuSO4组成，但二者有如下3点不同：a.溶液浓度不同、斐林试剂中NaOH的浓度为0.1g／mL，CuSO4的浓度为0.05g／mL；双缩脲试剂中NaOH的浓度为0.1g／mL，CuSO4的浓度为0.01g／mL。b.使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液；双缩脲试剂实质是在碱性环境下的Cu2+。c.使用方法不同。斐林试剂使用时，先把NaOH溶液和CuSO4溶液混合，而后立即使用。双缩脲试剂使用时，先加入NaOH溶液，然后再加入CuSO4溶液。教学参考三检测生物组织中的糖类、脂